池春燕，陳荇

(福建省立醫(yī)院輸血科，福建福州350001)

·檢驗(yàn)與臨床·

微柱凝膠法在嬰幼兒ABO血型鑒定中的應(yīng)用探討

池春燕，陳荇

(福建省立醫(yī)院輸血科，福建福州350001)

目的動(dòng)態(tài)觀察微柱凝膠法與鹽水試管法檢測(cè)嬰幼兒ABO血型正反定型結(jié)果，以探討微柱凝膠法在嬰幼兒ABO血型鑒定中的應(yīng)用。方法將嬰幼兒分為Ⅰ組(0～6個(gè)月)、Ⅱ組(6個(gè)月后～1周歲)。應(yīng)用微柱凝膠法分別對(duì)Ⅰ、Ⅱ組嬰幼兒的ABO血型進(jìn)行鑒定，正反定型不相符者，使用鹽水試管法進(jìn)一步鑒定。結(jié)果采用微柱凝膠法對(duì)嬰幼兒ABO血型進(jìn)行正反定型，Ⅰ組正反不相符率較高，為63%；Ⅱ組正反不相符率大幅降低,為17%，而用鹽水試管法(4℃)離心2～3次后，正反定型基本相符。結(jié)論微柱凝膠法給ABO血型的鑒定工作帶來(lái)了很大的方便，但由于嬰幼兒在出生4～6個(gè)月后ABO血型抗體才基本產(chǎn)生，有的效價(jià)仍較弱，所以還必須結(jié)合鹽水試管法加以鑒定，以確保嬰幼兒ABO血型鑒定的正確，保證兒科臨床輸血的安全。

嬰幼兒;ABO血型鑒定;微柱凝膠法

DOI∶10.3969/j.issn.1674-1129.2014.06.027

ABO血型系統(tǒng)是臨床輸血最重要的血型系統(tǒng)，ABO血型鑒定錯(cuò)誤會(huì)引起嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)，從而危及病人的生命安全。新生兒由于其ABO血型抗原抗體產(chǎn)生的特殊性，ABO血型鑒定比較容易產(chǎn)生正反不符的情況。因此，本文統(tǒng)計(jì)了我院共180例2011年6月至2013年10月期間的0～1周歲的新生兒及嬰幼兒患者ABO血型鑒定的結(jié)果，進(jìn)行比較分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選自本院2011年6月至2013年10月期間的0～1周歲的新生兒及嬰幼兒患者(排除AB型血的嬰幼兒、血液病、免疫系統(tǒng)疾病的患兒)共180例，男102例，女78例。將嬰幼兒按年齡分為兩組：0～6個(gè)月為Ⅰ組，72例；6個(gè)月后～1周歲為Ⅱ組，108例。

1.2 儀器與試劑WADiana Compact全自動(dòng)血型儀，WADiana Compact全自動(dòng)血型處理系統(tǒng)，L600型湘儀離心機(jī)。單克隆抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清(河北醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程中心提供)，5%標(biāo)準(zhǔn)A1型、B型、O型紅細(xì)胞懸液(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供)，ABORh血型卡(北京斑珀斯技貿(mào)有限責(zé)任公司提供)。

1.3 方法

1.3.1 微柱凝膠法采集嬰幼兒EDTA抗凝靜脈血1.5～2.5ml，用WADiana Compact全自動(dòng)血型儀(配置WADiana Compact專(zhuān)用數(shù)據(jù)工作站)，采用微柱凝膠檢測(cè)技術(shù)，按照操作說(shuō)明書(shū)完成樣本的檢測(cè)并判讀結(jié)果。

1.3.2 鹽水試管法6個(gè)月后～1周歲的嬰幼兒樣本，微柱凝膠法正反不相符的，用鹽水試管法參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[1]再次進(jìn)行血型鑒定。若反定結(jié)果仍較弱，可加大血清用量，再離心一次;若仍未檢出，可將反定試管置于4℃冰箱至少2h(應(yīng)同時(shí)做陰性對(duì)照管排除冷凝集)[2]，取出離心后觀察反定結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法率的比較，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。數(shù)據(jù)采用上海金仕達(dá)衛(wèi)寧實(shí)驗(yàn)室管理系統(tǒng)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)計(jì)算并分析。

2 結(jié)果

2.1 微柱凝膠法鑒定180例0～1周歲嬰幼兒ABO血型，不同年齡組正反不相符率分別為：Ⅰ組為63%，Ⅱ組為17%。從表1分析得出，Ⅰ組的ABO血型正反不相符率與Ⅱ組的相比，結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 兩組ABO血型鑒定微柱凝膠法正反定型不相符情況

2.2 微柱凝膠法與鹽水試管法反定型結(jié)果比較將18例6個(gè)月后～1周歲嬰幼兒正反定型不相符的樣本，采用鹽水試管法再次測(cè)定，可不同程度檢測(cè)出樣本血清中更多的ABO血型抗體。置于4℃冰箱后，發(fā)現(xiàn)抗體效價(jià)更強(qiáng)了。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 18例6個(gè)月后～1周歲嬰幼兒微柱凝膠法與鹽水試管法反定結(jié)果比較

3 討論

由于嬰幼兒ABO血型抗體在出生4～6個(gè)月后才產(chǎn)生[3]，故筆者按年齡0～6個(gè)月、6個(gè)月后～1周歲將嬰幼兒分為兩組。從表1結(jié)果可以得出，隨著月齡的增長(zhǎng)，特別是6個(gè)月以后，嬰幼兒血清中ABO血型抗體不斷產(chǎn)生，效價(jià)愈來(lái)愈強(qiáng)，ABO血型正反相符率也大幅提高。

微柱凝膠法利用凝膠顆粒的分子篩技術(shù)，將凝集與不凝集的紅細(xì)胞通過(guò)離心而分開(kāi)，以此反映抗原抗體的特異性反應(yīng)，反應(yīng)溫度為37℃，而且隨著全自動(dòng)血型儀的應(yīng)用，操作更是簡(jiǎn)便，重復(fù)性強(qiáng)，特異性高，結(jié)果易于觀察，大有取代鹽水試管法之趨勢(shì)[4]。但是血型鑒定由于受冷抗體、藥物等因素的干擾，常出現(xiàn)正反定型不相符的現(xiàn)象，有人提出微柱凝膠法檢測(cè)ABO血型與鹽水試管法相比無(wú)明顯優(yōu)勢(shì)[5]。

嬰幼兒血型又有其特殊性，出生后血液中的ABO血型抗體產(chǎn)生時(shí)間不一，產(chǎn)生時(shí)間較抗原晚，一般要在4～6個(gè)月，且效價(jià)不及成人[6]，所以嬰幼兒ABO血型鑒定較易出現(xiàn)正反不相符現(xiàn)象。我國(guó)首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院輸血科及國(guó)內(nèi)多家兒童醫(yī)院輸血科對(duì)≤6個(gè)月的嬰幼兒受血者鑒定ABO血型只作正定型，如果正定型反應(yīng)強(qiáng)度正常，即以正定型結(jié)果為準(zhǔn)。對(duì)＞6個(gè)月的嬰幼兒受血者則同時(shí)做正反定型相互印證[7]。ABO血型抗體主要是天然的IgM抗體，在4℃反應(yīng)結(jié)果更好，所以當(dāng)＞6個(gè)月的嬰幼兒ABO血型正反不相符時(shí)，若用鹽水試管法或結(jié)合其4℃反應(yīng)可以更好地檢測(cè)較弱抗體，提高ABO血型鑒定正反相符率。本次試驗(yàn)也印證了此觀點(diǎn)(見(jiàn)表2)。

綜上所述，微柱凝膠法的應(yīng)用給ABO血型的檢測(cè)工作帶來(lái)了很大的方便，但嬰幼兒ABO血型的鑒定有其特殊性，對(duì)＞6個(gè)月的嬰幼兒如果用此方法發(fā)現(xiàn)正反不相符時(shí)，應(yīng)采用鹽水試管法進(jìn)一步驗(yàn)證，保證血型的準(zhǔn)確性，確保嬰幼兒輸血安全。

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R457.1+1,R446.62

A

1674-1129(2014)06-0724-02

2014-07-14；

2014-09-20)