宋惠英

復旦大學附屬中山醫(yī)院青浦分院輸血管理科，上海201700

微柱凝膠抗球蛋白法與常規(guī)抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測價值對比

宋惠英

復旦大學附屬中山醫(yī)院青浦分院輸血管理科，上海201700

目的探討微柱凝膠抗球蛋白法與常規(guī)抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測價值差異。方法選取含有紅細胞同種抗體血液樣本163例，分別采用微柱凝膠抗球蛋白法與常規(guī)抗球蛋白法檢測；比較兩種方法紅細胞同種抗體總檢出準確率，-D，-E，-C，-c，-e，-C+e，-E+c，-M，-N，-S，-s，-Dia，-Fya，-Fyb，-Jka，-Jkb，-K，-k，-Lua，-Lub，-Lea，-Leb，-P1及未知抗體特異性檢出準確率等。結果常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測準確率分別為82.21%（134/163），98.77%（161/163）；微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測準確率顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；其中常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于MSN系統(tǒng)M抗體檢測準確率分別為28.00%（7/25），100.00%（25/25）；而常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于未知抗體特異性抗體檢測準確率分別為52.17%（12/23），100.00%（23/23）；微柱凝膠抗球蛋白法用于MSN系統(tǒng)M抗體、未知抗體特異性抗體檢測準確率均顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測總體價值優(yōu)于試管抗球蛋白；但在臨床配血時如微柱凝膠抗球蛋白法檢測出現(xiàn)不匹配現(xiàn)象，應與常規(guī)試管抗球蛋白法聯(lián)合應用以提高輸血指導效果。

微柱凝膠抗球蛋白法；抗球蛋白法；紅細胞；同種抗體；檢測

作為輸血安全檢驗重要組成部分之一，紅細胞不規(guī)則抗體篩查對于預防輸血反應和避免新生兒溶血癥發(fā)生作用關鍵[1-2]；臨床常規(guī)采用試管抗球蛋白法進行紅細胞同種抗體檢測，但操作較為繁瑣[3]，而近年來微柱凝膠抗蛋白法以其操作簡便，肉眼可行結果判定等優(yōu)勢開始在臨床得到推廣使用[4]，但兩種方法紅細胞同種抗體檢測準確率優(yōu)劣仍存在爭議。本次研究選取含有紅細胞同種抗體血液樣本163例，分別采用微柱凝膠抗球蛋白法與常規(guī)抗球蛋白法檢測；比較兩種方法紅細胞同種抗體總檢出準確率和各分型檢出準確率，探討兩種方法用于紅細胞同種抗體檢測價值差異。

1 資料與方法

1.1 血液標本來源

選取我院檢驗科2012年1月—2013年10月收集因輸血前相容性不符或發(fā)生輸血不良反應血液標本163例，每份標本均包含抗凝和不抗凝血各10 mL。

1.2 檢測儀器與試劑

檢測儀器選擇TXK4型血型血清學用離心機（長沙英泰離心機儀器有限公司生產(chǎn)），Diana免疫微柱孵育器(長春博研科學儀器有限公司生產(chǎn))；檢測試劑包括低離子/抗人球蛋白卡，抗球蛋白，譜試劑紅細胞系及抗體篩查標準品，均由Diamed AG公司生產(chǎn)。

1.3 檢測方法

1.3.1 抗球蛋白法以混合待檢測液體（血清50 uL+3%～5%譜試劑紅細胞系懸液25 uL）于37℃溫箱內(nèi)孵育40 min，足量鹽水反復沖洗4～5次，傾倒上清后加入抗球蛋白50 uL，100r/min離心1 min后觀察。

1.3.2 微柱凝膠抗球蛋白法以0.8%譜試劑紅細胞系懸液50 uL注入低離子/抗人球蛋白卡中，再取待檢測血清或血漿標本加入同一卡中，于37℃溫箱內(nèi)孵育20 min，依次以80r/min離心2 min，200r/min離心4 min后觀察，參照試劑說明書進行結果判定[5]。

1.4 統(tǒng)計學處理

本次研究數(shù)據(jù)錄入分析分別選擇Epidata3.08和SPSS 18.0軟件；統(tǒng)計學方法采用χ2檢驗；P＜0.05判定為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測準確率分別為82.21%（134/163），98.77%（161/163）；微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測準確率顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；其中常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于MSN系統(tǒng)M抗體檢測準確率分別為28.00%（7/25），100.00%（25/25）；而常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于未知抗體特異性抗體檢測準確率分別為52.17%（12/23），100.00%（23/23）；微柱凝膠抗球蛋白法用于MSN系統(tǒng)M抗體、未知抗體特異性抗體檢測準確率均顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；見表1。

表1 微柱凝膠抗球蛋白法與常規(guī)抗球蛋白法用于紅細胞同種抗

3 討論

常規(guī)試管抗球蛋白法和微柱凝膠蛋白凝膠法均以抗球蛋白為檢測基礎[6]；其中常規(guī)試管抗球蛋白試驗是公認檢測IgG抗體金標準，其通過將IgG抗體致敏紅細胞與抗球蛋白混合后觀察是否有凝集反應出現(xiàn)[7-8]；而微柱凝膠抗球蛋白法檢測機制為綜合生化、免疫學及物理等多種方法方法，利用游離紅細胞和聚集紅細胞直徑不同，以一定孔徑凝膠介質分離不同狀態(tài)紅細胞[9-10]。本次研究結果顯示，常規(guī)抗球蛋白法與微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測準確率分別為82.21%（134/163），98.77%（161/ 163）；微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測準確率顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；其中微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測準確率與之前報道基本一致，但常規(guī)抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測準確率低于以往報道[11-12]，可能與研究血液樣本，檢測儀器及試劑差異有關。而微柱凝膠抗球蛋白法用于MSN系統(tǒng)M抗體、未知抗體特異性抗體檢測準確率均顯著高于常規(guī)抗球蛋白法，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），這與常規(guī)食管抗球蛋白法37℃孵育時間長于微柱凝膠抗球蛋白法有關，因延長孵育時間可降低對冷性抗體檢測準確率[13-14]。

綜上所述，微柱凝膠抗球蛋白法用于紅細胞同種抗體檢測總體價值優(yōu)于試管抗球蛋白；但在臨床配血時如微柱凝膠抗球蛋白法檢測出現(xiàn)不匹配現(xiàn)象，應與常規(guī)試管抗球蛋白法聯(lián)合應用以提高輸血指導效果。

[1]于天華,遇紅梅,梁海英,等.5050名患者Rh分型及不規(guī)則抗體鑒定結果分析[J].中國輸血雜志,2012,25(8):756-758.

[2]王玲,陳曉曼,王倩,等.臨床輸血前常規(guī)檢查RhE、C抗原必要性分析[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2012,33(16):2032-2034.

[3]朱瑩,王婧.微柱凝膠技術檢測521例O型血孕婦IgG A（B）抗體效價[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2013,10(1):33-34.

[4]李娟,方代華,許琴,等.微柱凝膠技術在新生兒同種免疫性溶血病診斷中的臨床應用[J].中國實用醫(yī)刊,2013,40(15):56-57.

[5]張建武,邢志偉,孫志平,等.微柱凝膠抗人球蛋白法檢測不規(guī)則抗體在輸血中的應用[J].河北醫(yī)藥,2009,31(20):2826-2827.

[6]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006:254.

[7]張志哲,黃青枝,吳會紅,等.應用ROC曲線評價產(chǎn)前IgG抗A（B）效價檢測對早期診斷ABO新生兒溶血病的價值[J].檢驗醫(yī)學,2011,26(5): 338-339.

[8]蘇宇清,喻瓊,梁延連,等.微柱凝膠抗球蛋白技術檢測紅細胞同種抗體能力的研究[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2011,26(6):73-75.

[9]李嵐,董洪強,張瓊麗.微柱凝膠技術在血小板抗體篩選中的應用[J].現(xiàn)代醫(yī)學,2009,37(6):470-472.

[10]陳昌達,李就文,陳超群,等.微柱凝膠技術檢測紅細胞免疫性抗體的臨床應用[J].分子診斷與治療雜志,2010,2(5):342-343.

[11]劉峰,李歸寧,王寒旭,等.微柱凝膠技術在ABO新生兒溶血病患兒輸血前檢驗中的應用研究[J].臨床血液學雜志(輸血與檢驗版),2013,26 (1):76-79.

[12]高艷,陳志強,陳桃,等.微柱凝膠技術在新生兒溶血病實驗診斷中的應用[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生報導，2014,20(3):350-351.

[13]何子毅,劉仁強,劉景春,等.纖維蛋白析出對微柱凝膠實驗結果影響的解決方法研究[J].中山大學學報(醫(yī)學科學版),2009,30(Z2):242-245.

[14]蘇宇清,喻瓊,梁延連.微柱凝膠抗球蛋白技術檢測紅細胞同種抗體能力的研究[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2011,26(6):73-75.

R446.6

A

1672-5654（2014）10（a）-0180-02

2014-08-05）

宋惠英（1970-），女，上海松江，大專，主管檢驗師，主要從事臨床輸血前后的實驗。