上海市人類精子庫捐獻(xiàn)者HIV復(fù)查失訪狀況調(diào)查和回顧性分析

宋平平 鄒沙沙 王亞楠 曹小蓉 劉 勇 李 錚 胡洪亮

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院泌尿外科（上海 200001）

·臨床經(jīng)驗(yàn)·

上海市人類精子庫捐獻(xiàn)者HIV復(fù)查失訪狀況調(diào)查和回顧性分析

宋平平 鄒沙沙 王亞楠 曹小蓉 劉 勇 李 錚 胡洪亮*

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院泌尿外科（上海 200001）

近年來，研究發(fā)現(xiàn)人類免疫缺陷病毒（Human immunodeficiency virus ，HIV）感染人數(shù)增多并呈現(xiàn)低齡化的趨勢。HIV感染人體后，主要攻擊、破壞CD4+T淋巴細(xì)胞，經(jīng)過一段時(shí)間（一般是6～8年）的潛伏期，人體細(xì)胞免疫功能下降而導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生一系列機(jī)會性感染或腫瘤，最終人體喪失對各種疾病的抵抗能力而導(dǎo)致死亡[1]，同時(shí)，大量研究發(fā)現(xiàn)HIV感染可造成精子活力、精子活率、精子密度、精子總數(shù)降低和畸形率增加[2]；并且HIV可通過父嬰垂直傳播。HIV病毒也可感染人體各期生殖細(xì)胞，其中，病毒顆粒是通過結(jié)合在精子細(xì)胞膜上和（或）存在于精子胞漿中，使病毒RNA整合到宿主精子基因組內(nèi)。因而，受精時(shí)攜帶HIV 基因的人類精子會進(jìn)入正常卵母細(xì)胞。在胚胎發(fā)育過程中，HIV 基因隨宿主細(xì)胞分裂復(fù)制和表達(dá)，從而使子代患病[3]。因此，臨床上對精液捐獻(xiàn)者進(jìn)行HIV檢測意義重大，它可大大減少供精人工授精及體外受精后代患AIDS的風(fēng)險(xiǎn)，從而在一定程度上可降低HIV的傳播。

HIV感染存在窗口期，窗口期一般為2周～12周，這段時(shí)間人體雖感染艾滋病毒，但外周血液中往往不能夠檢測出病毒抗體的[4]。窗口期的長短存在個(gè)體差異，并且與檢測方法及相應(yīng)試劑的敏感性有關(guān)。由于窗口期的樣本用常規(guī)的檢測方法是不能檢出的，這一階段在監(jiān)測檢疫、防疫、發(fā)病、治療等預(yù)防醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)方面均出現(xiàn)很多問題。因此，針對精液初篩合格的捐獻(xiàn)者，我?guī)觳扇【杈咄瓿删杈?個(gè)月復(fù)查HIV的方法，從而避免了窗口期檢測假陰性的結(jié)果而誤診，這對確診HIV感染與否具有重要的意義。然而，HIV復(fù)查存在失訪的情況，因而本文通過調(diào)查分析HIV失訪狀況及原因，為臨床進(jìn)一步改進(jìn)工作方法，提高工作成效提供參考。

資料和方法

一、研究對象

選擇2006年至2013年在上海市人類精子庫所有HIV復(fù)查的合格捐獻(xiàn)者及HIV復(fù)查失訪的捐獻(xiàn)者。年齡≥18歲，精液體積≥2mL，液化時(shí)間少于60min，密度大于60×106/mL，存活率大于60%，前向運(yùn)動精子百分率大于60%，精子正常形態(tài)率大于4%，圓細(xì)胞＜1×106/mL。

二、資料統(tǒng)計(jì)分析

本研究針對2006年至2013年上海市人類精子庫HIV復(fù)查失訪人數(shù)，HIV復(fù)查合格人數(shù)，及失訪率分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，如圖1、2所示。

圖1 2006年至2013年上海市人類精子庫HIV復(fù)查失訪人數(shù)及合格人數(shù)

圖2 2006年至2013年上海市人類精子庫復(fù)查失訪率

三、 HIV檢測流程

捐獻(xiàn)者第一次抽血檢測其HIV抗體，捐獻(xiàn)完成后的半年后再次檢測其血中HIV抗體，檢測陰性后方可使用。HIV抗體陽性者標(biāo)本應(yīng)啟動緊急處理方案。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對前4年（2006年至2009年）與后4年（2010年至2013年）的HIV失訪率采用t-test進(jìn)行成組設(shè)計(jì)的兩獨(dú)立樣本比較分析。

結(jié) 果

HIV復(fù)查合格捐精人數(shù)及復(fù)查失訪人數(shù)均呈逐年上升趨勢，其中前4年上升趨勢不明顯，后4年上升趨勢非常顯著（圖1）（由于HIV復(fù)查存在延遲現(xiàn)象，故2013年HIV查復(fù)合格人數(shù)僅統(tǒng)計(jì)2013上半年捐精者人數(shù)）。失訪率也呈相似趨勢，但幅度相對較低。然而2012、2013失訪率卻有所下降（圖2）。

對前4年和后4年的失訪率進(jìn)行T-test分析：t=-4.11，自由度=6，P=0.0063（P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。

討 論

2006年至2009年，HIV復(fù)查合格人數(shù)和復(fù)查失訪率分別是110、185、185、278人次與1.79%、2.12%、5.13%、5.44%。 而2010年至2013年，HIV復(fù)查合格人數(shù)和復(fù)查失訪率則分別是870、879、1356、1046與10.68%、14.83%、11.95%、7.27%。 前4年HIV復(fù)查失訪率相對后4年低，這主要是由于工作量相對較低，各項(xiàng)工作相對開展到位。2010年至2013年，上海市人類精子庫進(jìn)入了迅速發(fā)展的階段，HIV復(fù)查合格捐精人數(shù)迅速增長；隨之，復(fù)查失訪人數(shù)也逐年增加。值得注意的是，從2006年至2009年HIV復(fù)查失訪率也逐年升高，然而，2012年至2013年，失訪率卻有所下降，這是由于從2012年開始上海市人類精子庫提高了管理措施，進(jìn)一步開發(fā)與運(yùn)用了計(jì)算機(jī)管理系統(tǒng)，及時(shí)提醒和督促捐精完成六個(gè)月后的HIV抽血復(fù)查。這也說明了，網(wǎng)絡(luò)管理系統(tǒng)的完善與實(shí)施，為精子庫提供了一套科學(xué)、方便、高效的方法，可大大提高的HIV復(fù)查成效。

HIV-1傳染60%～90%是通過性傳播來實(shí)現(xiàn)的，尤其是在發(fā)展中國家[5]。男性艾滋病患者精液中可檢測到HIV病毒，并可通過父嬰垂直傳播。HIV病毒主要檢測于非精子細(xì)胞和精漿中，至于精子細(xì)胞是否存在HIV病毒至今仍有爭議。研究發(fā)現(xiàn)，將洗滌的精子細(xì)胞暴露于HIV gag DNA轉(zhuǎn)染的重組質(zhì)粒中，艾滋病毒基因可整合到人類精子細(xì)胞核或染色體的基因組中，并且攜帶HIV-1 gag基因精子能夠進(jìn)入卵母細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)正常的受精，并在早期胚胎細(xì)胞實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)錄（產(chǎn)生mRNA），然后翻譯（產(chǎn)生蛋白質(zhì)）[6]。 由上可見，也可通過HIV病毒核酸檢測捐精者精液中病毒含量，可篩選出HIV陽性患者，大大減少供精人工授精及體外受精后代患AIDS的風(fēng)險(xiǎn)，從而在一定程度上可降低HIV的傳播。因此，對于一部分HIV失訪的捐精者（能聯(lián)系到本人并經(jīng)其同意），可通過P24抗原和病毒核酸檢測精液，結(jié)果陰性的精液可直接應(yīng)用于臨床，以避免前期檢測費(fèi)用的浪費(fèi)及標(biāo)本的流失，提高精子庫捐精的成效。

本文針對研究捐精者完成后半年HIV復(fù)查情況，統(tǒng)計(jì)其失訪結(jié)果，總結(jié)失訪主要原因如下：捐獻(xiàn)者居住地址的改變，聯(lián)系方式的更換（換號、停機(jī)），捐獻(xiàn)意圖的改變，中途放棄等。WHO要求半年之后進(jìn)行第二次抽血復(fù)查HIV，捐精者在這個(gè)過程中存在以上原因，導(dǎo)致復(fù)查失訪。初篩合格的捐精者如半年后不能進(jìn)一步抽血復(fù)查HIV抗體，使即便合格的精液不能應(yīng)用于臨床，導(dǎo)致前期檢測費(fèi)用的浪費(fèi)及標(biāo)本的流失，使供應(yīng)與需求之間的矛盾更為緊張，嚴(yán)重影響臨床供應(yīng)。

自2003年3月至2012年3月，9年以來上海市人類精子庫共初篩捐獻(xiàn)志愿者11 563人，其中艾滋病病毒攜帶者3 例（0.03 %）， 其中2 人為同性戀者， 另一人有嫖娼史。HIV 陽性均為30歲以下青年人，說明近年來社會上青年人性觀念淡薄，特別是男同性戀之間的性傳播是HIV 感染率增高的危險(xiǎn)因素之一。

目前檢測HIV的方法總體來說可以分為抗體檢測和病毒檢測兩大類。其中，病毒檢測包括細(xì)胞培養(yǎng)（病毒分離）、p24抗原檢測和病毒核酸檢測。隨著檢測技術(shù)的不斷進(jìn)展，HIV感染窗口期逐漸縮短[7]。近年發(fā)展起來的第4代HIV檢測試劑可同時(shí)檢測HIV p24抗原和抗體，據(jù)報(bào)道其檢測窗口期可比使用第3代HIV抗體檢測試劑縮短幾天到2周[8,9]。

針對上海市人類精子庫HIV復(fù)查失訪狀況，建議進(jìn)一步提高精子庫管理措施，使各項(xiàng)工作逐步到位；可適當(dāng)縮短HIV復(fù)查時(shí)間，大大降低失訪率[10]；隨著檢測技術(shù)的革新，可同時(shí)采用新技術(shù)進(jìn)行檢測，從而更加有效篩選合格的精液應(yīng)用于臨床。

授精, 人工(非丈夫供體); HIV感染;數(shù)據(jù)收集; 回顧性研究

1 王敏, 范學(xué)工. 48 例HIV/ AIDS 住院病例分析. 實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué) 2006; 13 (5): 1118-1120

2 侯志偉, 李練兵, 呂靜, 等. HIV感染對患者精液質(zhì)量的影響. 癌變?畸變?突變 2011; 23(3): 202-205

3 康祥錦, 黃天華. HIV病毒父嬰垂直傳播的研究進(jìn)展. 癌變?畸變?突變 2009; 21(1): 74-76

4 方雯丹, 李聞文. HIV感染窗口期及其檢測技術(shù)的研究.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)教育 2012; 19(3): 43-45

5 Doncel GF, Joseph T, Thurman AR. Role of Semenin HIV-1 transmission:inhibitor or facilitator?Am J Reprod Immunol2011;65(3):292-301

6 Wang D, Kang XJ, Li LB, et al. In vitro study on vertical transmission of the HIV-1 gag gene by human sperm. J Med Virol 2011; 83(1): 16-23

7 Sickinger E, Jonas G, Yem AW,et al.Performance evaluation of the new fully automated human immunodef ciency virus antigen-antibody combination assay designed for blood screening.Transfusion2008; 48(4): 584-593

8 許文燕, 邱茂鋒, 佐合拉?吐爾地, 等. 第四代HIV抗原抗體酶聯(lián)檢測試劑縮短HIV檢測窗口期的研究. 中華醫(yī)學(xué)會雜志 2007; 30(3): 284-287

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10 呂傳臣, 馬雪梅, 曾毅. 人類免疫缺陷病毒(HIV)檢測技術(shù)的研究進(jìn)展.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志 2006; 5(4): 421-423

（2014-01-20收稿）

10.3969/j.issn.1008-0848.2014.07.012

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*通訊作者, E-mail: hongliang_hu67@hotmail.com