張妍，解軍波，2，張彥青，2，*，張明春，2

（1.天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院，天津300134；2.天津市食品生物技術(shù)重點實驗室，天津300134）

雙孢蘑菇（Agaricus bisporus（J.E.Lange）Imbach）是一種傘菌目蘑菇科的草腐菌，又叫洋蘑菇、白蘑菇、圓蘑菇[1]。雙孢蘑菇含有豐富的蛋白質(zhì)、多糖、維生素、微量元素等物質(zhì)[2]，營養(yǎng)豐富，味道鮮美，因此成為世界上廣泛栽培和食用的真菌品種之一[3-4]。

現(xiàn)代研究表明，雙孢蘑菇具有多種生理活性，包括抗氧化[5]、免疫調(diào)節(jié)[6]、抗腫瘤[7]、抗肝性脂肪變性[8]等，其中，多糖被認(rèn)為是雙孢蘑菇最主要的活性成分，在保健食品開發(fā)方面表現(xiàn)出較為廣闊的潛力[9]。近年來，雙孢蘑菇多糖已經(jīng)逐漸成為當(dāng)前真菌多糖研究的熱點，然而，目前市場上有關(guān)雙孢蘑菇多糖的保健產(chǎn)品仍不多見，大大限制了該寶貴資源的深入開發(fā)利用。

分散片是指在水中能迅速崩解并均勻分散的片劑[10]，與普通片劑、膠囊劑等固體制劑相比，具有制備簡單、服用方便、崩解迅速及吸收快等特點。本實驗采用正交試驗優(yōu)選處方工藝，研究制備雙孢蘑菇多糖分散片，為雙孢蘑菇多糖的合理開發(fā)與利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

雙孢菇蘑菇多糖：天津商業(yè)大學(xué)自制；交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、淀粉、乳糖：天津市雅博生物工程技術(shù)有限公司；微晶纖維素、滑石粉：北京鳳禮精求商貿(mào)有限責(zé)任公司。

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（RE-52AB）：上海亞榮生化儀器廠；BP211D電子分析天平：德國Sartoriμs公司；電熱恒溫干燥箱（202-2AB型）：天津市泰斯特儀器有限公司；DP30A型單沖式壓片機(jī)：北京國藥龍立科技有限公司；電熱恒溫水浴鍋：北京長風(fēng)儀器儀表公司；ZBS-6G智能崩解實驗儀：天津大學(xué)無線電廠；YD-I片劑硬度測試儀：天津市鑫洲科技有限公司；UV7504紫外分光光度計：上海欣茂儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 雙孢蘑菇多糖的制備

取雙孢蘑菇干品，粉碎，制成粒度為60目～80目的雙孢蘑菇粉。將上述雙孢蘑菇粉進(jìn)行微波提?。ㄎ⒉üβ?00 W），提取時間為5 min，以水為提取溶劑，料液比為1∶100。將上述所得雙孢蘑菇水提液，冷卻至室溫，離心10 min（4 500 r/min）。收集上清液，加入4倍量無水乙醇，靜置過夜后分取沉淀，加水超聲溶解，采用三氯醋酸法進(jìn)行除蛋白處理，所得溶液進(jìn)行真空干燥，即得。

1.2.2 分散片的制備方法

按濕法制粒壓片法，將原輔料分別過100目篩，按處方比例稱取雙孢蘑菇多糖（100 mg）、和填充劑等，混合均勻后加入95%乙醇溶液為潤濕劑制成軟材，過18目篩制濕顆粒，60℃干燥箱干燥1.5 h，18目篩整粒，加入處方量的崩解劑（交聯(lián)羧甲基纖維素鈉）、潤滑劑（滑石粉），混合均勻后壓片，片重為400 mg。

1.2.3 崩解時限

按照2010年版《中華人民共和國藥典》二部附錄XA[11]崩解時限測定方法，隨機(jī)取6片分散片，置于（37±1）℃水中測定崩解時間，在3 min內(nèi)崩解視為合格。

1.2.4 分散均勻性

按照2010年版《中華人民共和國藥典》二部附錄IA分散片項下要求，隨機(jī)取6片分散片，置100 mL水（15℃～25℃）中，振搖3 min，應(yīng)全部崩解并通過二號篩為合格。

1.2.5 正交實驗設(shè)計因素與水平設(shè)計

以對雙孢蘑菇多糖分散片質(zhì)量影響較大的交聯(lián)羧甲基纖維素鈉的用量、填充劑的種類和滑石粉的用量為因素，采用正交試驗法設(shè)計3因素3水平試驗，優(yōu)化雙孢蘑菇多糖分散片的處方，因素和水平見表1。

表1 正交因素試驗水平表Table 1 Factors and levels of orthogonal test

2 結(jié)果與分析

2.1 雙孢蘑菇多糖分散片處方優(yōu)化的正交試驗

根據(jù)表1中的因素和水平，制備雙孢蘑菇多糖分散片，以崩解時間和分散均勻性作為評判指標(biāo)，篩選最佳處方，試驗結(jié)果見表2、表3。

表2 正交試驗結(jié)果Table 2 The results of orthogonal test

表3 正交試驗數(shù)據(jù)方差分析表Table 3 The analysis of variance

由表2的直觀分析和表3的方差分析結(jié)果可知，影響因素主次為B＞A＞C，結(jié)果顯示：最優(yōu)處方為A1B1C3，即交聯(lián)羧甲基纖維素鈉60 mg，以微晶纖維素作為填充劑，滑石粉8 mg。

2.2 驗證實驗

按照優(yōu)化處方，制備3批雙孢蘑菇多糖分散片，所得分散片淡黃色，形狀一致，外觀完整光潔，邊緣整齊，色澤均勻（見圖1）。

圖1 雙孢蘑菇多糖分散片F(xiàn)ig.1 The immediate release tablets Agaricus bisporus polysaccharide

分別測定3批分散片的分散均勻性和崩解時限，結(jié)果見表4。

表4 驗證實驗結(jié)果Table 4 The result of testing experiment

由試驗結(jié)果可知，根據(jù)優(yōu)化處方制備所得的雙孢菇多糖分散片，分散均勻性和崩解時間均符合《中華人民共和國藥典》（2010版）分散片項下要求，且重現(xiàn)性良好。

3 結(jié)論

分散片設(shè)計的主要原則是使該制劑遇水后在短時間（小于3 min）內(nèi)形成小顆粒，并分散成均勻混懸液[12]，因此，優(yōu)化選擇處方中各組分的種類和比例是制備合格分散片制劑的關(guān)鍵。

采用濕法制粒壓片法制備雙孢蘑菇多糖分散片，以崩解時限，分散均勻性為考察指標(biāo)，通過正交實驗設(shè)計篩選雙孢蘑菇多糖分散片的處方，優(yōu)化得到了以交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、微晶纖維素和滑石粉為主要輔料的制劑處方，最優(yōu)處方為交聯(lián)羧甲基纖維素鈉60 mg，以微晶纖維素作為填充劑，滑石粉8 mg。該劑型與普通片劑相比，崩解迅速，服用方便，制備工藝簡單易行，成本較低，可以用于雙孢蘑菇多糖分散片的制備。

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