楊曉琨 陳宇昕

(天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，天津 300192)

局灶性節(jié)段性腎小球硬化(FSGS)是一種常見(jiàn)的原發(fā)性腎小球疾病，常導(dǎo)致顯著的腎功能不全及終末期腎功能衰竭。高血壓是FSGS一個(gè)顯著臨床特點(diǎn)，活檢時(shí)已有50%血壓高于正常［1］。而高血壓不僅會(huì)加重腎功能不全，還是導(dǎo)致動(dòng)脈硬化、左室肥厚和心力衰竭等心血管疾病的重要因素［2］。本研究采用SD大鼠單側(cè)腎切除術(shù)后，經(jīng)尾靜脈分次注射阿霉素法建立FSGS腎病模型，觀(guān)察辛通暢絡(luò)中藥復(fù)方對(duì)FSGS腎病大鼠尾動(dòng)脈血壓的影響。為辛通暢絡(luò)中藥復(fù)方改善慢性腎臟病心血管危險(xiǎn)因素的研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)選用Spragoe-Dawleg(SD)遠(yuǎn)交系健康雄性大鼠90只，按體重分層隨機(jī)分為對(duì)照組18只，造模組72只。體重(180±20)g，SPF/VAF級(jí)，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所動(dòng)物中心提供(合格證號(hào)：SCXK津2005-0001)。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品 鹽酸阿霉素(鹽酸多柔比星 ，深圳萬(wàn)樂(lè)藥業(yè)有限公司，規(guī)格：10 mg/支;批號(hào)0706E1);腎絡(luò)寧［由柴胡12 g、黃芩 10 g、生黃芪 30 g、當(dāng)歸 10 g、女貞子15 g、澤蘭15 g、水蛭10 g、細(xì)辛3 g等組成，為中藥組治療藥物。以上8味藥按比例稱(chēng)取后加水煎煮、濃縮成50 ml(生藥含量：2.1 g/ml)，裝瓶密封，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｖ兴庯嬈?gòu)于天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院中藥房;中藥飲片的質(zhì)檢和腎絡(luò)寧的制備由天津中醫(yī)藥大學(xué)藥廠(chǎng)協(xié)助完成;腎絡(luò)寧的質(zhì)檢由天津市藥品檢驗(yàn)所核定］;鹽酸貝那普利(為西藥組治療藥物，由北京諾華制藥有限公司提供;規(guī)格：10 mg/片;批號(hào)x 1167。每片貝那普利溶入到25 ml生理鹽水中，制備成0.4 mg/ml的混懸液)。

1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備 BP-6無(wú)創(chuàng)動(dòng)物血壓測(cè)量系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司)。

1.4 方法

1.4.1 模型建立與分組 實(shí)驗(yàn)大鼠經(jīng)適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，按體重分層隨機(jī)分為對(duì)照組18只、造模組72只。①造模組大鼠按50 mg/kg的劑量進(jìn)行腹腔注射1.5%戊巴比妥鈉對(duì)大鼠麻醉后行左腎切除術(shù)。對(duì)照組給予相同麻醉及手術(shù)切口，但不結(jié)扎左腎門(mén)血管和切除腎臟。②造模組于左腎切除術(shù)后1周(實(shí)驗(yàn)第8 d)按3 mg/kg體重劑量經(jīng)尾靜脈注射阿霉素溶液(用無(wú)菌注射用水配制成1 mg/ml的濃度);對(duì)照組采用相同方法注射生理鹽水0.5 ml。③阿霉素首次注射后第4周末(實(shí)驗(yàn)第35 d)，造模組再次按2 mg/kg體重劑量經(jīng)尾靜脈注射阿霉素溶液，對(duì)照組于同時(shí)間經(jīng)尾靜脈再次注射0.5 ml生理鹽水。造模9周末(實(shí)驗(yàn)第63 d)，造模組按體重分層隨機(jī)分為模型組、中藥組和西藥組。自造模9周末中藥組和西藥組大鼠開(kāi)始灌胃給藥，對(duì)照組和模型組給予等量生理鹽水。中藥組和西藥組大鼠的給藥劑量按藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥方法(馬氏定理)計(jì)算，均以成人劑量(60 kg體重)的20倍劑量給藥，即：中藥組為1.67 ml/100 g 體重(3.5 g/100 g體重)劑量，西藥組為 0.83 ml/100 g體重(0.33 mg/100 g體重)劑量。療程為12周。實(shí)驗(yàn)全程給予普通飼料，自由進(jìn)食和飲水。

1.4.2 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本檢測(cè)方法 實(shí)驗(yàn)治療第12周末，采用尾袖法測(cè)量大鼠安靜清醒條件下尾動(dòng)脈收縮壓及舒張壓。將大鼠在40℃環(huán)境中預(yù)熱5 min后，固定于舒適位置，引入加壓袖口放置于大鼠尾根部，充氣加壓使之超過(guò)收縮壓30 mmHg(壓力達(dá)到收縮壓水平時(shí)脈搏搏動(dòng)消失，據(jù)此判斷)，然后緩慢減壓，經(jīng)壓力換能器和放大器連接于Medlab生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄血壓。每只鼠連續(xù)測(cè)量3次，間隔60 s，取其平均值。

1.4.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，總體數(shù)據(jù)進(jìn)行組間單因素方差分析，顯著性差異水平設(shè)定為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 收縮壓 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，治療前(第0周末)模型組、西藥組、中藥組大鼠收縮壓均明顯高于對(duì)照組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較有顯著性差異(P＜0.01);治療第4、8、12周末，模型組收縮壓呈持續(xù)增高，而中、西藥組自第4周開(kāi)始均已逐漸下降，至治療第8、12周末，均明顯低于模型組，經(jīng)比較有顯著性差異(P＜0.01)，治療期間各時(shí)相比較，中、西藥組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。見(jiàn)表1和圖1。

表1 實(shí)驗(yàn)治療第0、4、8和12周末各組大鼠收縮壓的變化 mmHg

圖1 各組收縮壓治療期間變化比較

2.2 舒張壓 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，治療前(第0周末)模型組、西藥組、中藥組大鼠舒張壓均明顯高于對(duì)照組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較有顯著性差異(P＜0.01);治療第4、8和12周末，模型組舒張壓亦呈持續(xù)增高，而中、西藥組自第4周開(kāi)始均已下降，至治療第8、12周末，均明顯低于模型組，經(jīng)比較有顯著性差異(P＜0.01)，治療期間各時(shí)相比較，中、西藥組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。見(jiàn)表2和圖2。

表2 實(shí)驗(yàn)治療第0、4、8和12周末各組大鼠舒張壓的變化 mmHg

圖2 各組舒張壓治療期間變化比較

3 討論

病的危險(xiǎn)因素，這些危險(xiǎn)因素通過(guò)多種機(jī)制導(dǎo)致心血管疾病。相關(guān)資料顯示，慢性腎臟病病人死于心血管疾病者在其總死亡率中高達(dá)30% ～50%［3］，一般而言，在慢性腎臟病的早期往往已存在心血管并發(fā)癥，其發(fā)生率更隨腎功能進(jìn)展而增加，即使腎功能稍有降低，也是心血管事件(心力衰竭、心肌梗死等)發(fā)生的重要危險(xiǎn)因子［4］，至終末期腎臟病時(shí)達(dá)最高峰。目前為減少慢性腎臟病的心血管并發(fā)癥，多是通過(guò)改善腎功能異常的措施來(lái)減少心血管病發(fā)病的危險(xiǎn)性。

依據(jù)FSGS及其心血管病變是以氣血虛損、樞機(jī)不利、濕濁瘀毒蘊(yùn)結(jié)、心腎脈絡(luò)損傷為基本病機(jī)，本實(shí)驗(yàn)以辛通暢絡(luò)、益氣和血為法，篩選組合既往臨床觀(guān)察具有療效優(yōu)勢(shì)的中藥復(fù)方腎絡(luò)寧為中醫(yī)干預(yù)觀(guān)察藥物。

腎絡(luò)寧由三組藥物組成，其一，以柴胡、黃芩疏利少陽(yáng)，暢達(dá)三焦，樞轉(zhuǎn)氣機(jī)，兼清郁熱。其二，以黃芪、當(dāng)歸、女貞子益氣補(bǔ)血滋陰，扶正理虛。其三，以澤蘭、水蛭、細(xì)辛辛通暢絡(luò)，化瘀利水。諸藥協(xié)同，疏導(dǎo)調(diào)節(jié)，養(yǎng)臟和絡(luò)，促進(jìn)氣血調(diào)和流暢，滲灌臟腑組織。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，本方案所用中、西藥物均可明顯降低FSGS腎病大鼠收縮壓及舒張壓，與模型組比較，具顯著性差異(P＜0.01)，治療期間各時(shí)相比較，中藥組與西藥組療效相似。

此結(jié)果表明腎絡(luò)寧對(duì)FSGS大鼠具有降低收縮壓、舒張壓的作用，且療效與貝那普利相似，提示腎絡(luò)寧可通過(guò)降低高血壓，減輕高血壓對(duì)腎小球和小管間質(zhì)的損害，進(jìn)而保護(hù)腎功能，延緩腎小球硬化;同時(shí)通過(guò)降低高血壓，延緩動(dòng)脈硬化、動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生，從而降低心血管疾病發(fā)生率。為研究辛通暢絡(luò)中藥復(fù)方改善慢性腎臟病心血管疾病的機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

1 Gusmano R，Mazzucco G，Monga G，et al.Focal and seg-mental glomerulosclerosis(FSGS).Clinical，morphologicaland genetic features［J］.J Nephrol，2004，17(1)：139-157

2 蔡建芳.營(yíng)養(yǎng)不良-炎癥-動(dòng)脈粥樣硬化綜合征與慢性腎功能衰竭［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)·泌尿系統(tǒng)分冊(cè)，2003，23(2)：198-201

3 楊敏.慢性腎臟病心血管病變的防治［J］.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2004，12(12)：699-700

4 張麗，戴勇.慢性腎功能不全患者心血管病變的研究［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2008，14(2)：243-245