郭超群++++++李運(yùn)琴++++++劉志勇++++++來祝檁++++++夏琳靜++++++王林++++++閆曉鵬

[摘要] 目的 探討冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫的建立及應(yīng)用，以利于冰凍亞型紅細(xì)胞的合理選擇和應(yīng)用。 方法 以甘油作為防凍劑，將ABO亞型紅細(xì)胞進(jìn)行甘油化和適當(dāng)分裝后，于-80℃低溫冰箱冰凍保存；同時(shí)詳細(xì)記錄每份紅細(xì)胞的來源、亞型種類、弱抗原與抗血清的反應(yīng)強(qiáng)度、紅細(xì)胞容量、預(yù)期用途、分裝容器、分裝總份數(shù)、每份分裝量、血漿是否含ABO不規(guī)則抗體、是否保存對(duì)應(yīng)血漿以及獻(xiàn)血碼或姓名、性別、年齡、民族、身份證號(hào)碼、通訊地址、聯(lián)系電話等資料，建立冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫；根據(jù)不同工作需要，從紅細(xì)胞信息庫中選擇合適的亞型紅細(xì)胞，經(jīng)融化洗滌，加入合適的保存介質(zhì)和抑菌劑后使用。 結(jié)果 從冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫中選擇合適的亞型標(biāo)本，在血站和醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定相關(guān)工作中應(yīng)用后，無償獻(xiàn)血者和醫(yī)院患者的ABO亞型檢出率顯著提高，進(jìn)一步保證了臨床輸血的安全性和有效性。 結(jié)論 ABO亞型紅細(xì)胞的冰凍保存及其信息庫的建立，能使ABO亞型紅細(xì)胞得到充分有效的利用，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，可在采供血機(jī)構(gòu)和醫(yī)院供血庫進(jìn)行推廣應(yīng)用。

[關(guān)鍵詞] 信息庫；紅細(xì)胞；冰凍；ABO亞型

[中圖分類號(hào)] R331.1+41 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）07（b）-0187-04

ABO亞型是指在常見的人類A、B、O、AB 4種血型之下進(jìn)一步細(xì)分的ABO血型[1]，如A血型的A2、Aint、A3、AX、Aend、Am、Ay、Ael等，B血型的B3、BX、Bend、Bm、Bel等，AB血型的A2B、A3B、AB3、AXB、ABX、AmB、ABm、cisAB、B（A）等，這些亞型是由于基因突變導(dǎo)致的紅細(xì)胞抗原減弱[2]。在血型血清學(xué)試驗(yàn)中，ABO亞型由于紅細(xì)胞A、B抗原減弱或血漿中同時(shí)含有ABO不規(guī)則抗體，極易因漏檢和誤判而導(dǎo)致嚴(yán)重的輸血不良反應(yīng)，給安全輸血帶來極大隱患[3-8]。因此，正確鑒定獻(xiàn)血者和臨床患者中存在的ABO亞型，在保證臨床輸血安全方面具有十分重要的意義。2010年以來，筆者利用冰凍保存RhD陰性血液的原理，將日常工作中確定為亞型的血液和標(biāo)本進(jìn)行冰凍保存，建立了冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫，并在血站和醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定相關(guān)工作中得到了一定范圍的應(yīng)用，有效提高了無償獻(xiàn)血者和臨床患者的ABO亞型檢出率，進(jìn)一步保證了臨床輸血安全。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2010年1月～2013年12月，進(jìn)行冰凍保存的ABO亞型血液和標(biāo)本，16份來自本站無償獻(xiàn)血者血液（其中包括2010年以前獻(xiàn)血時(shí)被確定為正常血型，2010年以后重復(fù)獻(xiàn)血時(shí)被確定為亞型的4名無償獻(xiàn)血者血液），15份來自臨床供血庫送檢的患者標(biāo)本，14份是家系調(diào)查標(biāo)本。

1.2 初始血液和標(biāo)本的選擇條件

所有進(jìn)行冰凍保存的血液和標(biāo)本均被確定為ABO亞型，采集時(shí)間<6 d，無溶血和脂血，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP等傳染性指標(biāo)檢測均為陰性。

1.3 方法

1.3.1 亞型紅細(xì)胞的冰凍保存

從醫(yī)院患者或家系調(diào)查獲得的小容量ABO亞型標(biāo)本，按文獻(xiàn)[9]的方法用注射器和真空采血管進(jìn)行甘油化，分裝后保存于-80℃低溫冰箱。被確定為亞型的無償獻(xiàn)血者血液，用Cryafugedessi型大容量低溫離心機(jī)（德國賀利氏公司），按RCF 1600×g離心10 min，或1280×g離心18 min，分離出濃縮紅細(xì)胞，使紅細(xì)胞壓積控制在0.75±0.05[10]，然后稱取需要甘油化紅細(xì)胞的重量，按終濃度40%[11]計(jì)算甘油添加量，用COBE2991TM1型血細(xì)胞淘洗機(jī)（美國COBE血液技術(shù)公司）進(jìn)行甘油化，甘油的添加速度控制在8～10 ml/min，震蕩頻率控制在90～100次/min，添加完畢靜止平衡30 min，以RCF 1250×g離心10 min，去除多余的水分和甘油，使甘油化紅細(xì)胞的壓積控制在0.60±0.05[11]。分裝后于-80℃低溫冰箱冰凍保存。分離出的血漿根據(jù)需要選擇性保存于-30℃低溫冰箱。

1.3.2 冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫的建立

上述所有進(jìn)行冰凍保存的ABO亞型紅細(xì)胞，均詳細(xì)記錄每份紅細(xì)胞的來源、亞型種類、弱抗原與抗血清的反應(yīng)強(qiáng)度、紅細(xì)胞容量、預(yù)期用途、分裝容器、分裝總份數(shù)、每份分裝量、血漿是否含ABO不規(guī)則抗體、是否保存對(duì)應(yīng)血漿以及獻(xiàn)血碼或姓名、性別、年齡、民族、身份證號(hào)碼、通訊地址、聯(lián)系電話等資料，從而建立冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫。目前，冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫中，分門別類冰凍保存的ABO亞型紅細(xì)胞共有45例，其中A2 3例，A2B 3例，A3 2例，B3 2例，Ax 3例，BX 4例，Bend 2例，AXB 3例，ABx 6例，Am 1例，Bm 2例，AmB 1例，ABm 1例，Ael 1例，Bel 2例，A3B 1例，AB3 2例，B（A）6例。

1.3.3 冰凍亞型紅細(xì)胞的使用

1.3.3.1 冰凍亞型紅細(xì)胞的融化和洗滌 根據(jù)不同工作需要，從冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫中選擇合適的亞型紅細(xì)胞，將其從低溫冰箱中取出，迅速投入37℃水浴箱中，不斷輕輕搖動(dòng)，使紅細(xì)胞在5 min內(nèi)迅速融化，繼續(xù)復(fù)溫至紅細(xì)胞表面溫度達(dá)（20±2）℃[12]。用9%氯化鈉溶液洗滌1次，加入量為紅細(xì)胞標(biāo)計(jì)量的1/2，加入速度40～50 ml/min，震蕩頻率90～100次/min，靜止平衡5 min，以RCF 1250×g離心10 min，去上清；用1.6%氯化鈉溶液洗滌1次，加入量和紅細(xì)胞標(biāo)計(jì)量相同，其他條件同9%氯化鈉溶液洗滌；用0.9%氯化鈉溶液洗滌2次，根據(jù)容器大小以最大量加入，加入速度和震蕩頻率也可適當(dāng)加快，每次均靜止平衡5 min，以RCF 1250×g離心10 min，去上清。然后按壓積紅細(xì)胞的1.5倍加入合適的保存介質(zhì)。endprint

1.3.3.2 紅細(xì)胞融化洗滌后的保存 紅細(xì)胞融化洗滌后，如作為本站無償獻(xiàn)血者和醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定室內(nèi)質(zhì)控品時(shí)，用MAP紅細(xì)胞保存液作為保存介質(zhì)；作為醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定質(zhì)量測評(píng)、輸血技能比武及ABO血型鑒定技能培訓(xùn)的標(biāo)本時(shí)，用血漿作為保存介質(zhì)；作為單克隆抗血清等血型檢測試劑的質(zhì)量評(píng)估、進(jìn)貨驗(yàn)證的標(biāo)本時(shí)，MAP和血漿均可作為其保存介質(zhì)。在加入保存介質(zhì)的紅細(xì)胞中，按終濃度0.05 mg/ml的比例加入硫酸慶大霉素抑菌劑，混勻后分裝貼簽，2～6℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3.3 冰凍亞型紅細(xì)胞的使用及范圍 每次使用前，將紅細(xì)胞從2～6℃冰箱中取出，置于室溫平衡15～30 min，用完后立即放回2～6℃冰箱保存，每天置于室溫時(shí)間應(yīng)≤1 h。每次使用前必須檢查紅細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)溶血、顏色變化、細(xì)菌污染等，即放棄使用并更換新的紅細(xì)胞。紅細(xì)胞必須在規(guī)定的有效期內(nèi)使用。以MAP紅細(xì)胞保存液作為保存介質(zhì)時(shí)的有效期規(guī)定為40 d；以血漿作為保存介質(zhì)時(shí)的有效期規(guī)定為20 d。幾年來，從冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫中選擇合適的亞型標(biāo)本，在血站和醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定相關(guān)工作中得到了一定規(guī)模的應(yīng)用（表1）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用Modern 2000TMV5.0計(jì)算機(jī)管理軟件統(tǒng)計(jì)冰凍亞型紅細(xì)胞使用前（2006年1月～2009年12月）和使用后（2010年1月～2013年12月）無償獻(xiàn)血者人數(shù)（不計(jì)重復(fù)獻(xiàn)血者）；根據(jù)血型室實(shí)驗(yàn)記錄統(tǒng)計(jì)兩組無償獻(xiàn)血者對(duì)應(yīng)的ABO亞型檢出例數(shù)（不計(jì)重復(fù)檢測者），并計(jì)算ABO亞型檢出率；采用χ2檢驗(yàn)比較兩組ABO亞型檢出率的差異性，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 冰凍亞型紅細(xì)胞在血站的應(yīng)用效果

冰凍亞型紅細(xì)胞在血站ABO血型鑒定相關(guān)工作中應(yīng)用后，無償獻(xiàn)血者ABO亞型檢出率顯著提高（表2）。

2.2 冰凍亞型紅細(xì)胞在醫(yī)院供血庫中的應(yīng)用效果

冰凍亞型紅細(xì)胞在醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定相關(guān)工作中應(yīng)用后，從患者中檢出的疑似亞型標(biāo)本例數(shù)明顯增加，經(jīng)本站血型室協(xié)助確認(rèn)為亞型的標(biāo)本例數(shù)也相應(yīng)增加（表3）。

3 討論

ABO亞型的血清學(xué)特征是紅細(xì)胞A、B抗原呈不同程度減弱，所以極易漏檢和誤判而導(dǎo)致輸血不良反應(yīng)。在日常工作中，若獻(xiàn)血者的血液被確定為亞型，其血液一般不能作為正常血液供應(yīng)臨床，常常進(jìn)行報(bào)廢處理；如果獻(xiàn)血者的亞型因漏檢和誤判而誤輸給臨床患者，則可引起嚴(yán)重的輸血不良反應(yīng)。若臨床患者的血型被確定為亞型，則必須按以下原則選擇血液進(jìn)行輸注[13]，即輸注紅細(xì)胞時(shí)，盡量選擇O型；輸注血漿或冷沉淀時(shí)，選擇AB型或亞型對(duì)應(yīng)的正常血型；輸注血小板時(shí)，選擇亞型對(duì)應(yīng)的正常血型，否則，因患者的亞型漏檢和誤判而輸錯(cuò)血液時(shí)，同樣可引起嚴(yán)重的輸血不良反應(yīng)。可見，正確鑒定ABO亞型的重要性。

筆者通過認(rèn)真分析ABO亞型漏檢誤判的各種原因，利用其抗原減弱的特點(diǎn)，將其作為弱陽性參考品應(yīng)用于單克隆抗血清等血型檢測試劑的質(zhì)量評(píng)估及進(jìn)貨驗(yàn)證；作為弱陽性質(zhì)控品用于本站無償獻(xiàn)血者及醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定的室內(nèi)質(zhì)控；作為弱陽性標(biāo)本用于對(duì)醫(yī)院供血庫進(jìn)行ABO血型鑒定質(zhì)量測評(píng)、輸血技能比武及ABO血型鑒定技能培訓(xùn)等工作中，取得良好效果。本研究結(jié)果顯示，ABO亞型紅細(xì)胞在血站和醫(yī)院供血庫的相關(guān)工作中進(jìn)行應(yīng)用后，有效提高了無償獻(xiàn)血者及臨床患者的ABO亞型檢出率，促進(jìn)了臨床輸血的安全性和有效性。

但ABO亞型在人群中只有約1.50/萬[14]的比例，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于RhD陰性在人群中0.3%～0.5%[15]的比例。所以，筆者將其進(jìn)行冰凍保存并建立了冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫，使日常工作中被確定為ABO亞型且需要報(bào)廢的血液和標(biāo)本得到了充分有效的利用，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，可在采供血機(jī)構(gòu)和醫(yī)院供血庫進(jìn)行推廣應(yīng)用，但冰凍亞型紅細(xì)胞的數(shù)量需進(jìn)一步擴(kuò)大和補(bǔ)充。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 向東.ABO亞型的檢測[J].中國輸血雜志，2010，23（8）：577-580.

[2] 喻瓊，吳國光，梁延連，等.一個(gè)中國漢族ABO血型B亞型家系中發(fā)現(xiàn)新的B等位基因[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2005，22（2）：129-133.

[3] 孫曉琳，關(guān)曉珍，于洋，等.36例ABO血型亞型檢測及血清學(xué)分析[J].中國輸血雜志，2012，14（3）：215-218.

[4] 王嶸，路林英，夏杰成，等.29例血型錯(cuò)誤的原因分析[J].北京醫(yī)學(xué)，2006，28（2）：120-121.

[5] 董興華，林正明，江建鋒，等.36例疑難配血原因分析及解決方案[J].中國輸血雜志，2012，25（5）：481-482.

[6] 杜紅梅，何天輝，趙民霞，等.48例非傳染性輸血反應(yīng)原因分析[J].中國輸血雜志，2013，26（1）：10-11.

[7] 郭文俊，吳端，楊惠，等.醫(yī)院血庫血型鑒定錯(cuò)誤原因分析[J].中國輸血雜志，2005，18（2）：187-188.

[8] 梁廷波.ABO血型或亞型不合引起的輸血反應(yīng)及救治[J].中國實(shí)用外科雜志，2007，27（2）：120-122.

[9] 李雪英，邱玉霞，竇茉莉.冰凍亞型紅細(xì)胞的保存及應(yīng)用[J].山東醫(yī)藥，2012，52（35）：90-91.

[10] 張雅莉，張貝，靳朝霞，等.冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞制備過程質(zhì)量控制方法[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2014，16（1）：68-70.

[11] 趙陽.冰凍紅細(xì)胞制備工藝的標(biāo)準(zhǔn)化和產(chǎn)品的質(zhì)量控制[J].中國輸血雜志，2010，23（10）：788-790.

[12] 馬慶.深低溫長期保存紅細(xì)胞的效果評(píng)價(jià)[J].中國輸血雜志，2012，25（9）：837-840.

[13] 劉景漢，蘭炯采.臨床輸血學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：256-257.

[14] 向東，劉曦，郭忠慧，等.上海地區(qū)中國人群中ABO亞型的研究[J].中國輸血雜志，2006，19（1）：25-26.

[15] 魏亞明，呂毅.基礎(chǔ)輸血學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：123-145.

（收稿日期：2014-04-14 本文編輯：林利利）endprint

1.3.3.2 紅細(xì)胞融化洗滌后的保存 紅細(xì)胞融化洗滌后，如作為本站無償獻(xiàn)血者和醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定室內(nèi)質(zhì)控品時(shí)，用MAP紅細(xì)胞保存液作為保存介質(zhì)；作為醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定質(zhì)量測評(píng)、輸血技能比武及ABO血型鑒定技能培訓(xùn)的標(biāo)本時(shí)，用血漿作為保存介質(zhì)；作為單克隆抗血清等血型檢測試劑的質(zhì)量評(píng)估、進(jìn)貨驗(yàn)證的標(biāo)本時(shí)，MAP和血漿均可作為其保存介質(zhì)。在加入保存介質(zhì)的紅細(xì)胞中，按終濃度0.05 mg/ml的比例加入硫酸慶大霉素抑菌劑，混勻后分裝貼簽，2～6℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3.3 冰凍亞型紅細(xì)胞的使用及范圍 每次使用前，將紅細(xì)胞從2～6℃冰箱中取出，置于室溫平衡15～30 min，用完后立即放回2～6℃冰箱保存，每天置于室溫時(shí)間應(yīng)≤1 h。每次使用前必須檢查紅細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)溶血、顏色變化、細(xì)菌污染等，即放棄使用并更換新的紅細(xì)胞。紅細(xì)胞必須在規(guī)定的有效期內(nèi)使用。以MAP紅細(xì)胞保存液作為保存介質(zhì)時(shí)的有效期規(guī)定為40 d；以血漿作為保存介質(zhì)時(shí)的有效期規(guī)定為20 d。幾年來，從冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫中選擇合適的亞型標(biāo)本，在血站和醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定相關(guān)工作中得到了一定規(guī)模的應(yīng)用（表1）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用Modern 2000TMV5.0計(jì)算機(jī)管理軟件統(tǒng)計(jì)冰凍亞型紅細(xì)胞使用前（2006年1月～2009年12月）和使用后（2010年1月～2013年12月）無償獻(xiàn)血者人數(shù)（不計(jì)重復(fù)獻(xiàn)血者）；根據(jù)血型室實(shí)驗(yàn)記錄統(tǒng)計(jì)兩組無償獻(xiàn)血者對(duì)應(yīng)的ABO亞型檢出例數(shù)（不計(jì)重復(fù)檢測者），并計(jì)算ABO亞型檢出率；采用χ2檢驗(yàn)比較兩組ABO亞型檢出率的差異性，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 冰凍亞型紅細(xì)胞在血站的應(yīng)用效果

冰凍亞型紅細(xì)胞在血站ABO血型鑒定相關(guān)工作中應(yīng)用后，無償獻(xiàn)血者ABO亞型檢出率顯著提高（表2）。

2.2 冰凍亞型紅細(xì)胞在醫(yī)院供血庫中的應(yīng)用效果

冰凍亞型紅細(xì)胞在醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定相關(guān)工作中應(yīng)用后，從患者中檢出的疑似亞型標(biāo)本例數(shù)明顯增加，經(jīng)本站血型室協(xié)助確認(rèn)為亞型的標(biāo)本例數(shù)也相應(yīng)增加（表3）。

3 討論

ABO亞型的血清學(xué)特征是紅細(xì)胞A、B抗原呈不同程度減弱，所以極易漏檢和誤判而導(dǎo)致輸血不良反應(yīng)。在日常工作中，若獻(xiàn)血者的血液被確定為亞型，其血液一般不能作為正常血液供應(yīng)臨床，常常進(jìn)行報(bào)廢處理；如果獻(xiàn)血者的亞型因漏檢和誤判而誤輸給臨床患者，則可引起嚴(yán)重的輸血不良反應(yīng)。若臨床患者的血型被確定為亞型，則必須按以下原則選擇血液進(jìn)行輸注[13]，即輸注紅細(xì)胞時(shí)，盡量選擇O型；輸注血漿或冷沉淀時(shí)，選擇AB型或亞型對(duì)應(yīng)的正常血型；輸注血小板時(shí)，選擇亞型對(duì)應(yīng)的正常血型，否則，因患者的亞型漏檢和誤判而輸錯(cuò)血液時(shí)，同樣可引起嚴(yán)重的輸血不良反應(yīng)?？梢?，正確鑒定ABO亞型的重要性。

筆者通過認(rèn)真分析ABO亞型漏檢誤判的各種原因，利用其抗原減弱的特點(diǎn)，將其作為弱陽性參考品應(yīng)用于單克隆抗血清等血型檢測試劑的質(zhì)量評(píng)估及進(jìn)貨驗(yàn)證；作為弱陽性質(zhì)控品用于本站無償獻(xiàn)血者及醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定的室內(nèi)質(zhì)控；作為弱陽性標(biāo)本用于對(duì)醫(yī)院供血庫進(jìn)行ABO血型鑒定質(zhì)量測評(píng)、輸血技能比武及ABO血型鑒定技能培訓(xùn)等工作中，取得良好效果。本研究結(jié)果顯示，ABO亞型紅細(xì)胞在血站和醫(yī)院供血庫的相關(guān)工作中進(jìn)行應(yīng)用后，有效提高了無償獻(xiàn)血者及臨床患者的ABO亞型檢出率，促進(jìn)了臨床輸血的安全性和有效性。

但ABO亞型在人群中只有約1.50/萬[14]的比例，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于RhD陰性在人群中0.3%～0.5%[15]的比例。所以，筆者將其進(jìn)行冰凍保存并建立了冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫，使日常工作中被確定為ABO亞型且需要報(bào)廢的血液和標(biāo)本得到了充分有效的利用，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，可在采供血機(jī)構(gòu)和醫(yī)院供血庫進(jìn)行推廣應(yīng)用，但冰凍亞型紅細(xì)胞的數(shù)量需進(jìn)一步擴(kuò)大和補(bǔ)充。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 向東.ABO亞型的檢測[J].中國輸血雜志，2010，23（8）：577-580.

[2] 喻瓊，吳國光，梁延連，等.一個(gè)中國漢族ABO血型B亞型家系中發(fā)現(xiàn)新的B等位基因[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2005，22（2）：129-133.

[3] 孫曉琳，關(guān)曉珍，于洋，等.36例ABO血型亞型檢測及血清學(xué)分析[J].中國輸血雜志，2012，14（3）：215-218.

[4] 王嶸，路林英，夏杰成，等.29例血型錯(cuò)誤的原因分析[J].北京醫(yī)學(xué)，2006，28（2）：120-121.

[5] 董興華，林正明，江建鋒，等.36例疑難配血原因分析及解決方案[J].中國輸血雜志，2012，25（5）：481-482.

[6] 杜紅梅，何天輝，趙民霞，等.48例非傳染性輸血反應(yīng)原因分析[J].中國輸血雜志，2013，26（1）：10-11.

[7] 郭文俊，吳端，楊惠，等.醫(yī)院血庫血型鑒定錯(cuò)誤原因分析[J].中國輸血雜志，2005，18（2）：187-188.

[8] 梁廷波.ABO血型或亞型不合引起的輸血反應(yīng)及救治[J].中國實(shí)用外科雜志，2007，27（2）：120-122.

[9] 李雪英，邱玉霞，竇茉莉.冰凍亞型紅細(xì)胞的保存及應(yīng)用[J].山東醫(yī)藥，2012，52（35）：90-91.

[10] 張雅莉，張貝，靳朝霞，等.冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞制備過程質(zhì)量控制方法[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2014，16（1）：68-70.

[11] 趙陽.冰凍紅細(xì)胞制備工藝的標(biāo)準(zhǔn)化和產(chǎn)品的質(zhì)量控制[J].中國輸血雜志，2010，23（10）：788-790.

[12] 馬慶.深低溫長期保存紅細(xì)胞的效果評(píng)價(jià)[J].中國輸血雜志，2012，25（9）：837-840.

[13] 劉景漢，蘭炯采.臨床輸血學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：256-257.

[14] 向東，劉曦，郭忠慧，等.上海地區(qū)中國人群中ABO亞型的研究[J].中國輸血雜志，2006，19（1）：25-26.

[15] 魏亞明，呂毅.基礎(chǔ)輸血學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：123-145.

（收稿日期：2014-04-14 本文編輯：林利利）endprint

1.3.3.2 紅細(xì)胞融化洗滌后的保存 紅細(xì)胞融化洗滌后，如作為本站無償獻(xiàn)血者和醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定室內(nèi)質(zhì)控品時(shí)，用MAP紅細(xì)胞保存液作為保存介質(zhì)；作為醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定質(zhì)量測評(píng)、輸血技能比武及ABO血型鑒定技能培訓(xùn)的標(biāo)本時(shí)，用血漿作為保存介質(zhì)；作為單克隆抗血清等血型檢測試劑的質(zhì)量評(píng)估、進(jìn)貨驗(yàn)證的標(biāo)本時(shí)，MAP和血漿均可作為其保存介質(zhì)。在加入保存介質(zhì)的紅細(xì)胞中，按終濃度0.05 mg/ml的比例加入硫酸慶大霉素抑菌劑，混勻后分裝貼簽，2～6℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3.3 冰凍亞型紅細(xì)胞的使用及范圍 每次使用前，將紅細(xì)胞從2～6℃冰箱中取出，置于室溫平衡15～30 min，用完后立即放回2～6℃冰箱保存，每天置于室溫時(shí)間應(yīng)≤1 h。每次使用前必須檢查紅細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)溶血、顏色變化、細(xì)菌污染等，即放棄使用并更換新的紅細(xì)胞。紅細(xì)胞必須在規(guī)定的有效期內(nèi)使用。以MAP紅細(xì)胞保存液作為保存介質(zhì)時(shí)的有效期規(guī)定為40 d；以血漿作為保存介質(zhì)時(shí)的有效期規(guī)定為20 d。幾年來，從冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫中選擇合適的亞型標(biāo)本，在血站和醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定相關(guān)工作中得到了一定規(guī)模的應(yīng)用（表1）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用Modern 2000TMV5.0計(jì)算機(jī)管理軟件統(tǒng)計(jì)冰凍亞型紅細(xì)胞使用前（2006年1月～2009年12月）和使用后（2010年1月～2013年12月）無償獻(xiàn)血者人數(shù)（不計(jì)重復(fù)獻(xiàn)血者）；根據(jù)血型室實(shí)驗(yàn)記錄統(tǒng)計(jì)兩組無償獻(xiàn)血者對(duì)應(yīng)的ABO亞型檢出例數(shù)（不計(jì)重復(fù)檢測者），并計(jì)算ABO亞型檢出率；采用χ2檢驗(yàn)比較兩組ABO亞型檢出率的差異性，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 冰凍亞型紅細(xì)胞在血站的應(yīng)用效果

冰凍亞型紅細(xì)胞在血站ABO血型鑒定相關(guān)工作中應(yīng)用后，無償獻(xiàn)血者ABO亞型檢出率顯著提高（表2）。

2.2 冰凍亞型紅細(xì)胞在醫(yī)院供血庫中的應(yīng)用效果

冰凍亞型紅細(xì)胞在醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定相關(guān)工作中應(yīng)用后，從患者中檢出的疑似亞型標(biāo)本例數(shù)明顯增加，經(jīng)本站血型室協(xié)助確認(rèn)為亞型的標(biāo)本例數(shù)也相應(yīng)增加（表3）。

3 討論

ABO亞型的血清學(xué)特征是紅細(xì)胞A、B抗原呈不同程度減弱，所以極易漏檢和誤判而導(dǎo)致輸血不良反應(yīng)。在日常工作中，若獻(xiàn)血者的血液被確定為亞型，其血液一般不能作為正常血液供應(yīng)臨床，常常進(jìn)行報(bào)廢處理；如果獻(xiàn)血者的亞型因漏檢和誤判而誤輸給臨床患者，則可引起嚴(yán)重的輸血不良反應(yīng)。若臨床患者的血型被確定為亞型，則必須按以下原則選擇血液進(jìn)行輸注[13]，即輸注紅細(xì)胞時(shí)，盡量選擇O型；輸注血漿或冷沉淀時(shí)，選擇AB型或亞型對(duì)應(yīng)的正常血型；輸注血小板時(shí)，選擇亞型對(duì)應(yīng)的正常血型，否則，因患者的亞型漏檢和誤判而輸錯(cuò)血液時(shí)，同樣可引起嚴(yán)重的輸血不良反應(yīng)?？梢?，正確鑒定ABO亞型的重要性。

筆者通過認(rèn)真分析ABO亞型漏檢誤判的各種原因，利用其抗原減弱的特點(diǎn)，將其作為弱陽性參考品應(yīng)用于單克隆抗血清等血型檢測試劑的質(zhì)量評(píng)估及進(jìn)貨驗(yàn)證；作為弱陽性質(zhì)控品用于本站無償獻(xiàn)血者及醫(yī)院供血庫ABO血型鑒定的室內(nèi)質(zhì)控；作為弱陽性標(biāo)本用于對(duì)醫(yī)院供血庫進(jìn)行ABO血型鑒定質(zhì)量測評(píng)、輸血技能比武及ABO血型鑒定技能培訓(xùn)等工作中，取得良好效果。本研究結(jié)果顯示，ABO亞型紅細(xì)胞在血站和醫(yī)院供血庫的相關(guān)工作中進(jìn)行應(yīng)用后，有效提高了無償獻(xiàn)血者及臨床患者的ABO亞型檢出率，促進(jìn)了臨床輸血的安全性和有效性。

但ABO亞型在人群中只有約1.50/萬[14]的比例，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于RhD陰性在人群中0.3%～0.5%[15]的比例。所以，筆者將其進(jìn)行冰凍保存并建立了冰凍亞型紅細(xì)胞信息庫，使日常工作中被確定為ABO亞型且需要報(bào)廢的血液和標(biāo)本得到了充分有效的利用，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，可在采供血機(jī)構(gòu)和醫(yī)院供血庫進(jìn)行推廣應(yīng)用，但冰凍亞型紅細(xì)胞的數(shù)量需進(jìn)一步擴(kuò)大和補(bǔ)充。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 向東.ABO亞型的檢測[J].中國輸血雜志，2010，23（8）：577-580.

[2] 喻瓊，吳國光，梁延連，等.一個(gè)中國漢族ABO血型B亞型家系中發(fā)現(xiàn)新的B等位基因[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2005，22（2）：129-133.

[3] 孫曉琳，關(guān)曉珍，于洋，等.36例ABO血型亞型檢測及血清學(xué)分析[J].中國輸血雜志，2012，14（3）：215-218.

[4] 王嶸，路林英，夏杰成，等.29例血型錯(cuò)誤的原因分析[J].北京醫(yī)學(xué)，2006，28（2）：120-121.

[5] 董興華，林正明，江建鋒，等.36例疑難配血原因分析及解決方案[J].中國輸血雜志，2012，25（5）：481-482.

[6] 杜紅梅，何天輝，趙民霞，等.48例非傳染性輸血反應(yīng)原因分析[J].中國輸血雜志，2013，26（1）：10-11.

[7] 郭文俊，吳端，楊惠，等.醫(yī)院血庫血型鑒定錯(cuò)誤原因分析[J].中國輸血雜志，2005，18（2）：187-188.

[8] 梁廷波.ABO血型或亞型不合引起的輸血反應(yīng)及救治[J].中國實(shí)用外科雜志，2007，27（2）：120-122.

[9] 李雪英，邱玉霞，竇茉莉.冰凍亞型紅細(xì)胞的保存及應(yīng)用[J].山東醫(yī)藥，2012，52（35）：90-91.

[10] 張雅莉，張貝，靳朝霞，等.冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞制備過程質(zhì)量控制方法[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2014，16（1）：68-70.

[11] 趙陽.冰凍紅細(xì)胞制備工藝的標(biāo)準(zhǔn)化和產(chǎn)品的質(zhì)量控制[J].中國輸血雜志，2010，23（10）：788-790.

[12] 馬慶.深低溫長期保存紅細(xì)胞的效果評(píng)價(jià)[J].中國輸血雜志，2012，25（9）：837-840.

[13] 劉景漢，蘭炯采.臨床輸血學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：256-257.

[14] 向東，劉曦，郭忠慧，等.上海地區(qū)中國人群中ABO亞型的研究[J].中國輸血雜志，2006，19（1）：25-26.

[15] 魏亞明，呂毅.基礎(chǔ)輸血學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：123-145.

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