江蘇省揚州地區(qū)適齡婦女生殖道B群鏈球菌感染情況

吳德群，陳 劍

(江蘇省揚州市婦幼保健院 檢驗科，江蘇 揚州，225002)

B群鏈球菌(GBS)又稱為無乳鏈球菌，是一種寄生于妊娠期婦女下消化道及泌尿生殖道的細菌，新生兒可直接自母體，或分娩時由母體生殖道寄殖菌上行感染，是圍產(chǎn)期母子嚴重感染性疾病的主要致病菌[1]。GBS感染的新生兒出生后可導致嚴重的并發(fā)癥，死亡率極高，所以GBS感染一直是國際圍產(chǎn)醫(yī)學領域研究的熱點問題。通過適齡婦女陰道及直腸GBS檢驗，可以監(jiān)測妊娠前后婦女GBS感染情況，對預防與及時治療提供方便。揚州市婦幼保健院近年來開展了適齡婦女的GBS檢測，本文對揚州市2013年全年婦女GBS感染情況進行調(diào)研，分析不同年齡階段、不同季節(jié)、受孕與否的適齡婦女GBS感染情況，以利于今后該地區(qū)的預防和治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以2013年1—12月在本院門診或住院治療的3303例適齡婦女為研究對象，年齡17～38歲,平均28.4歲。根據(jù)研究對象不同年齡階段、是否懷孕情況及檢測時間不同進行分組，其中年齡分為<20歲、20～25歲、26～30歲、31～35歲及>35歲5組；懷孕情況分為非妊娠及圍產(chǎn)期2組；檢測時間分為春(2～4月)、夏(5～7月)、秋(8～10月)、冬(11～1月)4組，分別對不同年齡、懷孕情況及檢測時間生殖道B族鏈球菌感染陽性率差異進行分析。

1.2 研究方法

1.2.1 樣本采集：具體方法參照2002年CDC推薦的取材方法[2]：先擦去外陰分泌物，將2根無菌棉拭子放入陰道1/3處，采取陰道分泌物；再將此棉拭子插入肛門，在肛門括約肌上約2～5 cm處取直腸分泌物，使棉拭子上兼有陰道與直腸分泌物。將棉拭子放入無菌套管中，密閉送檢。

1.2.2 檢測方法：采用實時熒光PCR檢測法進行定性檢測[3]: 在棉拭子管中加入1 mL滅菌清洗液，高速震蕩2 min制成樣本懸浮液；取出全部樣品放入1.5 mL離心管中，13 000 r/min離心5 min后棄上清，加入1 mL滅菌清洗液震蕩重懸，10 000 r/min離心5 min后棄上清，加入50 μL清洗液重懸。樣品管內(nèi)加入1管提取固形物，高速震蕩5 min。制備陰、陽性對照樣本，將待檢樣本、陰性、陽性對照瞬時離心后，加入10 μL內(nèi)參照，95 ℃干浴2 min，立即冰浴2～5 min后13 000 r/min離心1 min，上清液用于PCR檢測。B族鏈球菌核酸(熒光PCR法)檢測試劑盒由泰普生物科學(中國)有限公司提供。檢測設備為ABI5000熒光PCR儀。

1.2.3 結果判定：利用儀器相互配套軟件進行自動分析，得到各樣品Ct值。當樣品Ct值≤23，且有較好的對數(shù)增長曲線，內(nèi)參照Ct≤30時判定為陽性。

2 結 果

2.1 不同年齡組婦女生殖道GBS感染率比較

揚州市不同年齡組婦女生殖道GBS感染率比較見表1。

表1 各年齡組生殖道GBS感染率比較

表1結果表明：不同的年齡階段婦女生殖道GBS感染存在顯著差異，其中31～35歲GBS感染情況最為嚴重，感染率達到6.72%，21～25歲感染情況最輕，感染率為3.16%。<20歲、21～25歲、26～30歲及>35歲年齡組婦女GBS 感染率沒有顯著差異，而與31～35歲年齡組之間存在極顯著差異，表明揚州地區(qū)適齡婦女GBS感染情況可能與年齡結構存在一定的關系。

2.2 不同懷孕情況婦女生殖道GBS感染率比較

揚州市適齡婦女不同懷孕情況生殖道GBS感染率比較見表2。

表2 不同懷孕情況生殖道GBS感染率比較

表2結果顯示：圍產(chǎn)期婦女GBS感染率略高于非妊娠婦女，但是不同懷孕情況適齡婦女生殖道GBS感染并不存在顯著差異,表明懷孕與否對揚州地區(qū)適齡婦女生殖道GBS感染沒有影響。

2.3 不同檢測季節(jié)生殖道GBS感染

2013年不同檢測時間揚州市適齡婦女生殖道GBS感染率比較見表3。

表3 2013年不同檢測時間生殖道GBS感染率比較

表3結果表明: 2013年揚州市3033例適齡婦女生殖道GBS檢測中，春季(2～4月)陽性檢出率最低，為0.48%，與其他季節(jié)檢測出陽性檢出率存在極顯著差異，而其他各季節(jié)之間沒有顯著差異。

3 討 論

GBS屬β溶血性鏈球菌的一種，為革蘭陽性球菌，根據(jù)細胞壁具特異性的S物質，分為Ⅰa、Ⅰb、Ⅰc、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等至少7個血清型。所有血清型中，a、Ⅲ及Ⅴ型最常見，占所有分離菌株的60%以上，其中Ⅰa型多見于育齡婦女。大量研究報道表明，GBS主要通過產(chǎn)道上行擴散感染子宮與胎膜，易造成胎兒在子宮內(nèi)感染，嚴重者可導致胎兒窒息死亡，所以說主要與妊娠期婦女及新生兒感染有密切關系，已經(jīng)成為圍產(chǎn)期感染的重要致病菌之一[4]。近年來中國多個大中醫(yī)院已將GBS檢測列入婦女圍產(chǎn)期篩查的重要內(nèi)容，提高對其感染的預防與治療，可極大地避免造成的不良后果。

GBS檢測方法最先主要通過對婦女直腸、生殖道拭子或尿液進行細菌培養(yǎng)方法，臨床實驗表明，普通培養(yǎng)在檢測GBS定植上假陰性率可高達50%，選擇性培養(yǎng)基又存在著檢測時間較長的問題[2，5]。各種GBS血清學檢測方法，如乳膠凝集、酶聯(lián)免疫吸附、協(xié)同凝集及對流免疫等，雖可以快速獲得檢測結果，但結果準確性不高，近年來臨床應用已大為減少。熒光PCR檢測技術利用熒光標記探針，檢測臨床標本中GBS的特定基因(CAMP)，從而判斷GBS 的存在，不僅特異性高、靈敏性好，而且檢測周期短，操作簡便，已在國內(nèi)各大中醫(yī)院推廣使用[3]。本研究所使用的檢測方法就是選用熒光PCR檢測技術，保證調(diào)查工作的準確性。

本次研究結果顯示：揚州地區(qū)2013年婦女陰道GBS感染率為4.12%，與紹興市4.6%[6]相仿，遠低于北京市7.5%～15%[7-9]、沈陽市11.2%[10]、佛山市13.7%[11]及桂林市7.5%[12]，而美國孕婦GBS定植率更是高達40%～50%。是否不同地區(qū)存在著GBS感染的特異性，尚需要更多地區(qū)GBS感染率調(diào)查數(shù)據(jù)才能分析研究。美國哈佛大學Michael Wessels教授[1]認為，如果妊娠婦女GBS定植率很低(<5%)，由于成本效益的問題，常規(guī)復查的價值不大。從揚州市2013年數(shù)據(jù)看似乎在揚州市對GBS定植篩查的意義不明顯，但可看到31～35歲年齡區(qū)GBS感染率仍超過6%，因此仍有必要對適齡孕婦GBS常規(guī)篩查。

本次研究結果顯示：不同年齡組GBS感染情況存在顯著差異(P<0.05)，揚州地區(qū)婦女31～35歲GBS感染的可能性最高，且與其他年齡組存在著顯著差異(P<0.05)。除去<20歲年齡組因樣本數(shù)較少(n=54)、感染人數(shù)也很少(2人)、

數(shù)據(jù)無統(tǒng)計學意義外，GBS 感染情況隨著年齡增長而增加，直至35歲后出現(xiàn)明顯回落。這一結果初步表明：揚州地區(qū)婦女31～35歲年齡段可能更易受GBS感染，因此更應注意對此類疾病的預防。

本研究結果顯示：揚州市非妊娠及圍產(chǎn)期婦女GBS感染率沒有顯著差異，與陳恒等[11]在佛山對不同懷孕情況各500例調(diào)研結果一致，充分說明GBS感染率高低與婦女是否懷孕無明顯關聯(lián)，婦女懷孕不是引起GBS感染的原因。而一般GBS帶菌者多無特殊臨床表現(xiàn)，只有分娩或生殖道手術進入生殖道上段或盆腔才會引起各類盆腔炎癥。為防止GBS感染對新生兒的影響，適齡婦女應在懷孕前作GBS定植篩查。

[1] Michacl Wessels，曹云，蔣佩如. 圍生期新生兒B族鏈球菌感染[J].中國循證兒科雜志，2011，6(4): 241.

[2] 許基平,王頻佳. B群鏈球菌快速檢測方法研究進展[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2011，8(19): 2380.

[3] 江凌曉，黎春，姜長宏，等. 應用實時熒光PCR技術快速檢測B群鏈球菌[J]. 廣東醫(yī)學，2011，32(5): 575.

[4] 陳恒，江立千，萬芳，等. 圍產(chǎn)期B群鏈球菌感染及相關研究[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2013，34(18): 2370.

[5] 朱敏，范建霞，程利南. 圍產(chǎn)期B族鏈球菌感染的研究進展[J]. 中華婦產(chǎn)科雜志,2005,40(2): 137.

[6] 應群華，嚴文衛(wèi)，丁金龍. 圍產(chǎn)期生殖道菌群檢測和B群鏈球菌篩查[J].中國微生態(tài)學雜志，2006，18(6): 491.

[7] 孫芾，林宏，于俊峰，等. 孕婦B型鏈球菌感染率及藥物敏感性分析[J].江西醫(yī)學檢驗，2005，23(3): 193.

[8] 張景華，袁林，楊永弘，等. 600名健康妊娠婦女及其所娩新生兒B族鏈球菌帶菌情況的研究[J]. 中華流行病學雜志，1995，16(1): 26.

[9] 孟凡，黃醒華，王維. 妊娠早、期生殖道B族鏈球菌帶菌情況研究[J].北京醫(yī)學，2004，26(4): 101.

[10] 湯潔，馬向薇，張寧. 孕婦生殖道B族鏈球菌及其他病原微生物感染情況調(diào)查[J]. 中國微生態(tài)學雜志，2010，22(10): 942.

[11] 陳恒，江立千，萬芳，等. 圍產(chǎn)期B群鏈球菌感染及相關研究[J]. 國際檢驗醫(yī)學雜志，2013，34(18): 2370.

[12] 何國才，白清，李高，等. 桂林地區(qū)孕晚期孕婦B族鏈球菌檢測及藥敏分析[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2013，34(15): 2006.