姜妍+王妍+金玲+韓淑英

摘 要：為了觀察蕎麥黃酮復(fù)合物對小鼠真菌性陰道炎的影響，本文采用了體外實驗MTT法評價蕎麥黃酮復(fù)合物對白色念珠菌的抑制作用以及體內(nèi)試驗鏡檢陰道上皮脫落細胞數(shù)目。與模型對照組相比，各治療組均可以使白色念珠菌減少且陰道上皮細胞脫落減少。蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量與中藥潔爾陰洗液療效相近似。由此得知，蕎麥黃酮復(fù)合物具有抑制白色念珠菌生長的能力，并且可以減少陰道上皮細胞的脫落。

關(guān)鍵詞：蕎麥黃酮復(fù)合物；抗菌活性；白色念珠菌性陰道炎

一、材料

雌性SPF級昆明小鼠（天津市山川紅實驗動物科技有限公司）；唐山市開灤醫(yī)院檢驗科提供白色念珠菌臨床新分離菌株；蕎麥黃酮復(fù)合物（課題組成員已獲得專利）采用正交試驗法以水加分離劑（殼聚糖）技術(shù)從蕎麥花葉提取的黃酮成分為主，配伍葛根、天花粉、麥冬、玄參和麻仁的水提物制成；顯微鏡（常州銳品精密儀器有限公司）、流式細胞儀（Sigma公司）。

二、方法

1.體外實驗。取12支10ml滅菌試管。每支試管加入1.0ml培養(yǎng)基和1.0ml藥液（蕎麥黃酮復(fù)合物，西藥對照氟康唑和中藥對照潔爾陰），分別采用試管二倍稀釋法，稀釋倍數(shù)為：1：2～1：512。第11管不加菌液作為空白對照，第12管作為陽性對照。

2.體內(nèi)實驗。將110只昆明雌性小鼠隨機挑出15只做空白對照組。剩余60只隔日皮下注射苯甲酸雌二醇注射液0.1ml·d-1使小鼠處于假發(fā)情狀態(tài)，6天后將密度為2.5×106cfu·mL-1的菌懸液20·L（即白色念珠菌孢子接種量為5×104cfu），灌注入小鼠陰道內(nèi)。在接種白色念珠菌孢子后第2與第5天對小鼠進行模型鑒定。將造模成功的50只小鼠進行隨機分組：模型對照組、西藥氟康唑組、中藥潔爾陰洗液對照組、蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量組、蕎麥黃酮復(fù)合物中劑量組及蕎麥黃酮復(fù)合物低劑量組。

三、指標檢測

1.體外實驗。采用MTT法，應(yīng)用流式細胞儀，檢測各實驗組白色念珠菌數(shù)目。

2.體內(nèi)試驗。于實驗結(jié)束時，用100ul PBS灌洗陰道5～6次，取10μl灌洗液置于清潔玻片上，鏡檢陰道上皮脫落細胞數(shù)。頸椎脫臼處死小鼠后，取陰道粘膜，Western-Blot法檢測各組IGFBP7蛋白含量。

四、統(tǒng)計分析方法

采用SPSSl6.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以表示。統(tǒng)計結(jié)果分別采用卡方檢驗和t檢驗進行數(shù)據(jù)處理，P<0.05作為顯著性界限。

五、結(jié)果

1.體外實驗結(jié)果。表1顯示，正常對照組無白色念珠菌。模型組含有大量白色念珠菌（P<0.01）。中、西陽性藥物及蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量組白色念珠菌數(shù)目明顯減少。蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量與中藥潔爾陰洗液對照組作用相近（P<0.01）。

表1蕎麥黃酮復(fù)合物對白色念珠菌數(shù)的影響

■

1p<0.05vs正常，2p<0.01vs 正常，3p<0.05vs 模型，4p<0.01vs模型

2.體內(nèi)實驗結(jié)果。各組小鼠陰道灌洗液脫落上皮細胞檢查結(jié)果：見表2。

表2 蕎麥黃酮復(fù)合物對陰道上皮脫落細胞數(shù)的影響

■

注：統(tǒng)計方法采用卡方檢驗。χ2=24.263，ν=6，P<0.005，差異有顯著性意義，可以認為七組藥物對小鼠陰道上皮脫落細胞抑制有差別。

六、討論

目前的研究表明，白念珠菌為該病的主要致病菌，妊娠、口服避孕藥物、糖尿病、使用抗生素以及免疫抑制劑導(dǎo)致的菌群失調(diào)與該病關(guān)系十分密切。迄今為止，臨床對本病的治療重點還是西醫(yī)抗真菌藥物直接殺滅病原菌，如氟康唑、制霉菌素等。藥物的毒副作用和菌株的耐藥性成為一個潛在的問題。隨著對本病認識的深入以及醫(yī)學(xué)微生態(tài)學(xué)的研究，出現(xiàn)了新的替代療法：沖洗療法、乳酸桿菌、硼酸及大蒜素治療等。但是，由于藥物帶來的副作用或者使用的不便利性，一直沒有廣泛應(yīng)用于臨床。近年來，我國醫(yī)學(xué)不斷發(fā)展，中藥制劑新劑型不斷涌現(xiàn)，許多學(xué)者應(yīng)用念珠菌動物模型，對中藥制劑的安全性及有效性進行了研究。本次試驗體內(nèi)試驗證實蕎麥黃酮復(fù)合物具有逆轉(zhuǎn)陰道上皮細胞脫落的作用，并且體外實驗證明其可以抑制白色念珠菌生長。而在藥物的副作用及遠期療效方面的研究不夠深入。在以后的工作中，還可以篩選劑型穩(wěn)定、效高、價廉、副作用少、順應(yīng)性好的藥物進行廣泛、多層次研究，以更好地服務(wù)于患者。

摘 要：為了觀察蕎麥黃酮復(fù)合物對小鼠真菌性陰道炎的影響，本文采用了體外實驗MTT法評價蕎麥黃酮復(fù)合物對白色念珠菌的抑制作用以及體內(nèi)試驗鏡檢陰道上皮脫落細胞數(shù)目。與模型對照組相比，各治療組均可以使白色念珠菌減少且陰道上皮細胞脫落減少。蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量與中藥潔爾陰洗液療效相近似。由此得知，蕎麥黃酮復(fù)合物具有抑制白色念珠菌生長的能力，并且可以減少陰道上皮細胞的脫落。

關(guān)鍵詞：蕎麥黃酮復(fù)合物；抗菌活性；白色念珠菌性陰道炎

一、材料

雌性SPF級昆明小鼠（天津市山川紅實驗動物科技有限公司）；唐山市開灤醫(yī)院檢驗科提供白色念珠菌臨床新分離菌株；蕎麥黃酮復(fù)合物（課題組成員已獲得專利）采用正交試驗法以水加分離劑（殼聚糖）技術(shù)從蕎麥花葉提取的黃酮成分為主，配伍葛根、天花粉、麥冬、玄參和麻仁的水提物制成；顯微鏡（常州銳品精密儀器有限公司）、流式細胞儀（Sigma公司）。

二、方法

1.體外實驗。取12支10ml滅菌試管。每支試管加入1.0ml培養(yǎng)基和1.0ml藥液（蕎麥黃酮復(fù)合物，西藥對照氟康唑和中藥對照潔爾陰），分別采用試管二倍稀釋法，稀釋倍數(shù)為：1：2～1：512。第11管不加菌液作為空白對照，第12管作為陽性對照。

2.體內(nèi)實驗。將110只昆明雌性小鼠隨機挑出15只做空白對照組。剩余60只隔日皮下注射苯甲酸雌二醇注射液0.1ml·d-1使小鼠處于假發(fā)情狀態(tài)，6天后將密度為2.5×106cfu·mL-1的菌懸液20·L（即白色念珠菌孢子接種量為5×104cfu），灌注入小鼠陰道內(nèi)。在接種白色念珠菌孢子后第2與第5天對小鼠進行模型鑒定。將造模成功的50只小鼠進行隨機分組：模型對照組、西藥氟康唑組、中藥潔爾陰洗液對照組、蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量組、蕎麥黃酮復(fù)合物中劑量組及蕎麥黃酮復(fù)合物低劑量組。

三、指標檢測

1.體外實驗。采用MTT法，應(yīng)用流式細胞儀，檢測各實驗組白色念珠菌數(shù)目。

2.體內(nèi)試驗。于實驗結(jié)束時，用100ul PBS灌洗陰道5～6次，取10μl灌洗液置于清潔玻片上，鏡檢陰道上皮脫落細胞數(shù)。頸椎脫臼處死小鼠后，取陰道粘膜，Western-Blot法檢測各組IGFBP7蛋白含量。

四、統(tǒng)計分析方法

采用SPSSl6.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以表示。統(tǒng)計結(jié)果分別采用卡方檢驗和t檢驗進行數(shù)據(jù)處理，P<0.05作為顯著性界限。

五、結(jié)果

1.體外實驗結(jié)果。表1顯示，正常對照組無白色念珠菌。模型組含有大量白色念珠菌（P<0.01）。中、西陽性藥物及蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量組白色念珠菌數(shù)目明顯減少。蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量與中藥潔爾陰洗液對照組作用相近（P<0.01）。

表1蕎麥黃酮復(fù)合物對白色念珠菌數(shù)的影響

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1p<0.05vs正常，2p<0.01vs 正常，3p<0.05vs 模型，4p<0.01vs模型

2.體內(nèi)實驗結(jié)果。各組小鼠陰道灌洗液脫落上皮細胞檢查結(jié)果：見表2。

表2 蕎麥黃酮復(fù)合物對陰道上皮脫落細胞數(shù)的影響

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注：統(tǒng)計方法采用卡方檢驗。χ2=24.263，ν=6，P<0.005，差異有顯著性意義，可以認為七組藥物對小鼠陰道上皮脫落細胞抑制有差別。

六、討論

目前的研究表明，白念珠菌為該病的主要致病菌，妊娠、口服避孕藥物、糖尿病、使用抗生素以及免疫抑制劑導(dǎo)致的菌群失調(diào)與該病關(guān)系十分密切。迄今為止，臨床對本病的治療重點還是西醫(yī)抗真菌藥物直接殺滅病原菌，如氟康唑、制霉菌素等。藥物的毒副作用和菌株的耐藥性成為一個潛在的問題。隨著對本病認識的深入以及醫(yī)學(xué)微生態(tài)學(xué)的研究，出現(xiàn)了新的替代療法：沖洗療法、乳酸桿菌、硼酸及大蒜素治療等。但是，由于藥物帶來的副作用或者使用的不便利性，一直沒有廣泛應(yīng)用于臨床。近年來，我國醫(yī)學(xué)不斷發(fā)展，中藥制劑新劑型不斷涌現(xiàn)，許多學(xué)者應(yīng)用念珠菌動物模型，對中藥制劑的安全性及有效性進行了研究。本次試驗體內(nèi)試驗證實蕎麥黃酮復(fù)合物具有逆轉(zhuǎn)陰道上皮細胞脫落的作用，并且體外實驗證明其可以抑制白色念珠菌生長。而在藥物的副作用及遠期療效方面的研究不夠深入。在以后的工作中，還可以篩選劑型穩(wěn)定、效高、價廉、副作用少、順應(yīng)性好的藥物進行廣泛、多層次研究，以更好地服務(wù)于患者。

摘 要：為了觀察蕎麥黃酮復(fù)合物對小鼠真菌性陰道炎的影響，本文采用了體外實驗MTT法評價蕎麥黃酮復(fù)合物對白色念珠菌的抑制作用以及體內(nèi)試驗鏡檢陰道上皮脫落細胞數(shù)目。與模型對照組相比，各治療組均可以使白色念珠菌減少且陰道上皮細胞脫落減少。蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量與中藥潔爾陰洗液療效相近似。由此得知，蕎麥黃酮復(fù)合物具有抑制白色念珠菌生長的能力，并且可以減少陰道上皮細胞的脫落。

關(guān)鍵詞：蕎麥黃酮復(fù)合物；抗菌活性；白色念珠菌性陰道炎

一、材料

雌性SPF級昆明小鼠（天津市山川紅實驗動物科技有限公司）；唐山市開灤醫(yī)院檢驗科提供白色念珠菌臨床新分離菌株；蕎麥黃酮復(fù)合物（課題組成員已獲得專利）采用正交試驗法以水加分離劑（殼聚糖）技術(shù)從蕎麥花葉提取的黃酮成分為主，配伍葛根、天花粉、麥冬、玄參和麻仁的水提物制成；顯微鏡（常州銳品精密儀器有限公司）、流式細胞儀（Sigma公司）。

二、方法

1.體外實驗。取12支10ml滅菌試管。每支試管加入1.0ml培養(yǎng)基和1.0ml藥液（蕎麥黃酮復(fù)合物，西藥對照氟康唑和中藥對照潔爾陰），分別采用試管二倍稀釋法，稀釋倍數(shù)為：1：2～1：512。第11管不加菌液作為空白對照，第12管作為陽性對照。

2.體內(nèi)實驗。將110只昆明雌性小鼠隨機挑出15只做空白對照組。剩余60只隔日皮下注射苯甲酸雌二醇注射液0.1ml·d-1使小鼠處于假發(fā)情狀態(tài)，6天后將密度為2.5×106cfu·mL-1的菌懸液20·L（即白色念珠菌孢子接種量為5×104cfu），灌注入小鼠陰道內(nèi)。在接種白色念珠菌孢子后第2與第5天對小鼠進行模型鑒定。將造模成功的50只小鼠進行隨機分組：模型對照組、西藥氟康唑組、中藥潔爾陰洗液對照組、蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量組、蕎麥黃酮復(fù)合物中劑量組及蕎麥黃酮復(fù)合物低劑量組。

三、指標檢測

1.體外實驗。采用MTT法，應(yīng)用流式細胞儀，檢測各實驗組白色念珠菌數(shù)目。

2.體內(nèi)試驗。于實驗結(jié)束時，用100ul PBS灌洗陰道5～6次，取10μl灌洗液置于清潔玻片上，鏡檢陰道上皮脫落細胞數(shù)。頸椎脫臼處死小鼠后，取陰道粘膜，Western-Blot法檢測各組IGFBP7蛋白含量。

四、統(tǒng)計分析方法

采用SPSSl6.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以表示。統(tǒng)計結(jié)果分別采用卡方檢驗和t檢驗進行數(shù)據(jù)處理，P<0.05作為顯著性界限。

五、結(jié)果

1.體外實驗結(jié)果。表1顯示，正常對照組無白色念珠菌。模型組含有大量白色念珠菌（P<0.01）。中、西陽性藥物及蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量組白色念珠菌數(shù)目明顯減少。蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量與中藥潔爾陰洗液對照組作用相近（P<0.01）。

表1蕎麥黃酮復(fù)合物對白色念珠菌數(shù)的影響

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1p<0.05vs正常，2p<0.01vs 正常，3p<0.05vs 模型，4p<0.01vs模型

2.體內(nèi)實驗結(jié)果。各組小鼠陰道灌洗液脫落上皮細胞檢查結(jié)果：見表2。

表2 蕎麥黃酮復(fù)合物對陰道上皮脫落細胞數(shù)的影響

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注：統(tǒng)計方法采用卡方檢驗。χ2=24.263，ν=6，P<0.005，差異有顯著性意義，可以認為七組藥物對小鼠陰道上皮脫落細胞抑制有差別。

六、討論

目前的研究表明，白念珠菌為該病的主要致病菌，妊娠、口服避孕藥物、糖尿病、使用抗生素以及免疫抑制劑導(dǎo)致的菌群失調(diào)與該病關(guān)系十分密切。迄今為止，臨床對本病的治療重點還是西醫(yī)抗真菌藥物直接殺滅病原菌，如氟康唑、制霉菌素等。藥物的毒副作用和菌株的耐藥性成為一個潛在的問題。隨著對本病認識的深入以及醫(yī)學(xué)微生態(tài)學(xué)的研究，出現(xiàn)了新的替代療法：沖洗療法、乳酸桿菌、硼酸及大蒜素治療等。但是，由于藥物帶來的副作用或者使用的不便利性，一直沒有廣泛應(yīng)用于臨床。近年來，我國醫(yī)學(xué)不斷發(fā)展，中藥制劑新劑型不斷涌現(xiàn)，許多學(xué)者應(yīng)用念珠菌動物模型，對中藥制劑的安全性及有效性進行了研究。本次試驗體內(nèi)試驗證實蕎麥黃酮復(fù)合物具有逆轉(zhuǎn)陰道上皮細胞脫落的作用，并且體外實驗證明其可以抑制白色念珠菌生長。而在藥物的副作用及遠期療效方面的研究不夠深入。在以后的工作中，還可以篩選劑型穩(wěn)定、效高、價廉、副作用少、順應(yīng)性好的藥物進行廣泛、多層次研究，以更好地服務(wù)于患者。