袁滿春++趙鋒+劉志偉++++++楊敏春

[摘要] 目的 探討慢性乙型肝炎患者不同的中醫(yī)辨證分型是否引起淋巴細(xì)胞亞群和淋巴細(xì)胞VCS（V volume C conductivity S scatter）相應(yīng)的變化。方法 對(duì)符合納入條件116病例分成三組，分別為肝郁脾虛型43例，濕熱中阻型38例，瘀血阻絡(luò)型35例，同時(shí)選健康體檢人員為健康對(duì)照組48例。對(duì)各組進(jìn)行ALT、WBC、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、MLV、MLV-SD、MLC、MLC-SD、MLS、MLS-SD的檢測(cè)，分析各組上述指標(biāo)間的相互關(guān)系。結(jié)果 與健康對(duì)照組比較，肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組的ALT、CD8+、MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLS-SD均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），WBC、CD4+、CD4+/CD8+、MLC、MLS均下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與濕熱中阻型比較，肝郁脾虛型的CD8+、MLV-SD、MLC-SD、MLS、MLS-SD差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），瘀血阻絡(luò)型ALT、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLS差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與瘀血阻絡(luò)型比較，ALT、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLC-SD、MLS、MLS-SD差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 慢性乙型肝炎患者證侯的變化，淋巴細(xì)胞的亞群表達(dá)及VCS參數(shù)的結(jié)果發(fā)生相應(yīng)的變化，表明三者間存在密切的關(guān)系，可為中醫(yī)辨證分型提供實(shí)驗(yàn)指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞] 中醫(yī)辨證分型；慢性乙型肝炎；T淋巴細(xì)胞亞群；VCS參數(shù)

[中圖分類號(hào)] R241 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）30-0058-03

我國(guó)是乙型肝炎高發(fā)區(qū)，目前全國(guó)約有9300萬(wàn)乙型肝炎病毒（HBV）攜帶者，慢性肝炎患者約有2000萬(wàn)[1]，由慢性乙肝（chronic hepatitis，CHB）引起的乙肝后肝硬化及肝癌嚴(yán)重危害人體健康。中醫(yī)藥治療一直是我國(guó)防治 CHB 的主要措施之一，其辨證論治的個(gè)體化與CHB 極具個(gè)體化的免疫發(fā)病機(jī)制非常契合[2]。中醫(yī)根據(jù)《病毒性肝炎中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)》[3]診斷標(biāo)準(zhǔn)，CHB分成肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型、肝腎陰虛型、脾腎陽(yáng)虛型等五型證侯，不同證候的患者給予相應(yīng)的中醫(yī)藥治療，能夠有效改善淋巴細(xì)胞免疫水平[4，5]。據(jù)報(bào)道，HBV感染后，體內(nèi)的白細(xì)胞尤其是淋巴細(xì)胞的VCS（V volume C conductivity S scatter）參數(shù)會(huì)發(fā)生改變[6]，而CHB患者的中醫(yī)辨證分型與T淋巴細(xì)胞亞群及VCS參數(shù)是否具有關(guān)聯(lián)性，本文通過(guò)探討CHB患者不同中醫(yī)辨證分型的T淋巴細(xì)胞亞群及VCS參數(shù)的變化，為中醫(yī)辨證分型提供實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，同時(shí)為病程進(jìn)展及轉(zhuǎn)歸提供潛在的實(shí)驗(yàn)室監(jiān)控指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年1月～2013年9月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院門診及病房116例CHB患者，CHB診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)《慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）》[7]中CHB診斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）乙肝病史0.5年以上；（2）HBsAg陽(yáng)性和（或）HBV-DNA陽(yáng)性。中醫(yī)證型判定參考《病毒性肝炎中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)》[3]，根據(jù)主要癥候積分由醫(yī)師進(jìn)行統(tǒng)一辨證分型。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合中西醫(yī)雙重診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡18～65歲，性別不限；③所有病例均為血清HBsAg陽(yáng)性、HBeAg陽(yáng)性、HBV-DNA陽(yáng)性、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT>50 IU/L）。排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除慢性重型肝炎及其他肝炎病毒重復(fù)感染者；②妊娠及哺乳期婦女。

1.2 方法

患者清晨空腹采集2 mL EDTA 抗凝血兩管，凝固血5mL一管。①1管EDTA抗凝血應(yīng)用全自動(dòng)血球分析儀Backman Coulter LH750（美國(guó)）電阻抗法檢測(cè)WBC和淋巴細(xì)胞VCS，記錄淋巴VCS參數(shù)包括淋巴細(xì)胞平均體積（MLV）、淋巴細(xì)胞體積分布寬度（MLV-SD）、淋巴細(xì)胞平均傳導(dǎo)率（MLC）、淋巴細(xì)胞傳導(dǎo)率分布寬度（MLC-SD）、淋巴細(xì)胞平均激光率（MLS）、淋巴細(xì)胞激光率分布寬度（MLS-SD）；②另1管EDTA抗凝血應(yīng)用流式細(xì)胞儀 BD FACS Calibur（美國(guó)BD公司）檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群，分別為CD4+、CD8+，并計(jì)算CD4+/CD8+。在測(cè)定管加20 mL Simultest IMK-Lymphocyte Kit試劑和50 μL EDTA抗凝全血，取FALCON管加對(duì)應(yīng)熒光抗體，再加標(biāo)本，旋渦振蕩數(shù)秒鐘。室溫避光放置15～30 min后加1×溶血素2 mL，旋渦振蕩數(shù)秒鐘再置避光室溫放置10～12 min，然后1000 rpm/min離心5 min，棄上清后加2 mL PBS，旋渦振蕩數(shù)秒鐘，重新1000 rpm/min離心5 min，最后棄上清后加0.5 ml PBS，上流式細(xì)胞儀檢測(cè)；③分離凝固血的血清，應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀Olympus AU2700（日本）經(jīng)速率法檢測(cè)ALT（上海豐匯醫(yī)學(xué)科技有限公司），經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝抗原抗體HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb指標(biāo)（北京萬(wàn)泰醫(yī)學(xué)科技有限公司）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用方差分析進(jìn)行多組間計(jì)量資料比較，兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CHB患者中醫(yī)辨證分型分布結(jié)果

116例CHB患者分成臨床中常見的肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組，其中肝郁脾虛組43例，男26例，女17例，年齡22～65歲，平均38.5歲；濕熱中阻組38例，男20例，女18例，年齡21～65歲，平均40.2歲；瘀血阻絡(luò)組35例，男21例，女14例，年齡25～76歲，平均40.3歲；同時(shí)取健康對(duì)照組48例，均為無(wú)器質(zhì)性病變的健康體檢人員，且近期均無(wú)明顯的炎癥感染，男25例，女23例，年齡22～65歲，平均38.3歲。各組間年齡和性別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。endprint

2.2不同證型證候WBC、ALT及結(jié)果比較

與健康對(duì)照組比較，肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組ALT明顯升高，WBC明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示，三組間WBC無(wú)明顯變化（P>0.05），瘀血阻絡(luò)型與肝郁脾虛型、濕熱中阻型比較，ALT差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.3不同證型淋巴細(xì)胞亞群結(jié)果比較

與健康對(duì)照組比較，肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組的CD4+、CD4+/CD8+表達(dá)明顯下降，而CD8+表達(dá)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示，肝郁脾虛型與濕熱中阻型相比，CD8+表達(dá)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而CD4+、CD4+/CD8+差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。瘀血阻絡(luò)型組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+與肝郁脾虛型及濕熱中阻型相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.4不同證型淋巴細(xì)胞的VCS參數(shù)比較

與健康對(duì)照組比較， 肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組的MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLS-S均明顯升高，而MLC、MLS則明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示，肝郁脾虛型與濕熱中阻型MLV-SD、MLC-SD、MLS、MLS-SD差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），瘀血阻絡(luò)型MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLS與濕熱中阻型比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），肝郁脾虛型MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLC-SD、MLS、MLS-SD與瘀血阻絡(luò)型比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

人體感染HBV后免疫紊亂，表現(xiàn)出不同的免疫狀態(tài)與中醫(yī)證候有一定的相關(guān)性。根據(jù)現(xiàn)代免疫學(xué)理論，機(jī)體免疫功能低下或不健全情況下感染了HBV，表現(xiàn)為免疫系統(tǒng)對(duì) HBV不能識(shí)別，不能發(fā)生對(duì)病毒的免疫清除，雖可不發(fā)病，但又不能清除病毒，使病毒與機(jī)體處于共存狀態(tài)，形成“免疫耐受”，臨床上可表現(xiàn)出亞健康狀態(tài)，如常有疲勞、脘脅不適、食欲不振、緊張或失眠及舌脈象的改變等，相對(duì)應(yīng)于“肝郁脾虛”。隨著機(jī)體對(duì) HBV的識(shí)別能力逐漸增強(qiáng)，發(fā)生免疫應(yīng)答形成“免疫清除”或“免疫損傷”，可表現(xiàn)為CHB活動(dòng)狀態(tài)，如兩脅脹痛、黃疸、納差、尿黃及舌苔黃或膩、脈弦滑等，相對(duì)應(yīng)于“濕熱中阻”。如果機(jī)體免疫應(yīng)答無(wú)力，對(duì)病毒不能完全清除，形成病毒殘留，可表現(xiàn)為亞健康狀態(tài)并出現(xiàn)相應(yīng)證候，也有少部分患者出現(xiàn)慢性炎癥遷延、肝纖維化甚至肝硬化，形成“免疫不全”，如有頭暈、乏力、腰膝酸軟、脅肋隱痛、舌質(zhì)暗紅、脈細(xì)澀等，對(duì)應(yīng)于“瘀血阻絡(luò)型”。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CHB患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化與辨證分型有關(guān)，主要表現(xiàn)為CD4+和CD8+及CD4+/CD8+的T淋巴細(xì)胞亞群異常。從研究結(jié)果來(lái)看，CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞亞群在CHB患者確實(shí)存在異常變化，肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型各組與健康對(duì)照組比較，CD4+減少，CD8+升高，CD4+/CD8+比值降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中，瘀血阻絡(luò)型變化最明顯。本研究結(jié)果與CHB患者以肝郁脾虛及濕熱中阻為主，隨著病程延長(zhǎng)及病情加重，主導(dǎo)證型由氣分至血分，以血瘀血熱為主證特點(diǎn)的觀點(diǎn)基本相符[8]。從臨床觀察看，一般情況，肝郁脾虛型、濕熱中阻型處于疾病的穩(wěn)定期，瘀血阻絡(luò)型處于疾病的進(jìn)展期或活動(dòng)期[9]，本研究顯示隨著病情進(jìn)展及活動(dòng)，CD4+逐漸下降，CD8+逐漸上升；隨著病情緩解，CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞趨向正常。在此病理過(guò)程中，白細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞數(shù)量的減少及凋亡細(xì)胞增加，淋巴細(xì)胞形態(tài)，內(nèi)部結(jié)構(gòu)等發(fā)生變化。本研究結(jié)果顯示，CHB患者肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型各組的淋巴細(xì)胞VCS的各項(xiàng)指標(biāo)與健康對(duì)照組比較，均存在明顯差異，而三種不同證候組之間的VCS亦有差異，表明隨著CHB從穩(wěn)定期到發(fā)展期，淋巴細(xì)胞VCS變化明顯，這與CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞結(jié)果變化相一致。VCS中的V（volume）是細(xì)胞體積反應(yīng)細(xì)胞體積大小，C（conductivity）是傳導(dǎo)性有助于鑒別體積雖然相同，但內(nèi)部結(jié)構(gòu)性質(zhì)不同的細(xì)胞，如細(xì)胞核、漿的比例，細(xì)胞內(nèi)顆粒的大小和密度，S（scatter）是散射性，反映細(xì)胞內(nèi)部顆粒特性、細(xì)胞核復(fù)雜性[10]。本研究結(jié)果表明，CHB患者淋巴細(xì)胞體積變大，淋巴細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)性質(zhì)如細(xì)胞核、漿的比例發(fā)生變化，淋巴細(xì)胞內(nèi)顆粒的大小和密度發(fā)生變化，這些參數(shù)的變化又會(huì)促進(jìn)淋巴細(xì)胞亞群的變化。可見，T淋巴細(xì)胞與VCS參數(shù)相互影響相互作用，在不同的證侯各指標(biāo)變化又有所區(qū)別。

中醫(yī)辨證論治是中醫(yī)治療CHB的主要方法，中醫(yī)藥調(diào)控免疫是治療CHB的優(yōu)勢(shì)環(huán)節(jié)[11]。中醫(yī)證型是運(yùn)用傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)理論，對(duì)臨床望、聞、問(wèn)、切四診所得資料，進(jìn)行歸納分析，辨證施治的依據(jù)，而慢性乙肝的中醫(yī)辨證分型與CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞及VCS參數(shù)有著密切的關(guān)系，因此，這些參數(shù)能為監(jiān)測(cè)乙肝疾病的發(fā)展提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，同時(shí)，為指導(dǎo)臨床治療方案，促進(jìn)患者的康復(fù)，提供新的思路。

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[11] 高月求. 中醫(yī)藥調(diào)控免疫是治療慢性乙型肝炎優(yōu)勢(shì)環(huán)節(jié)[J]. 中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，2010，20（3）：129-130.

（收稿日期：2014-05-15）endprint

2.2不同證型證候WBC、ALT及結(jié)果比較

與健康對(duì)照組比較，肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組ALT明顯升高，WBC明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示，三組間WBC無(wú)明顯變化（P>0.05），瘀血阻絡(luò)型與肝郁脾虛型、濕熱中阻型比較，ALT差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.3不同證型淋巴細(xì)胞亞群結(jié)果比較

與健康對(duì)照組比較，肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組的CD4+、CD4+/CD8+表達(dá)明顯下降，而CD8+表達(dá)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示，肝郁脾虛型與濕熱中阻型相比，CD8+表達(dá)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而CD4+、CD4+/CD8+差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。瘀血阻絡(luò)型組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+與肝郁脾虛型及濕熱中阻型相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.4不同證型淋巴細(xì)胞的VCS參數(shù)比較

與健康對(duì)照組比較， 肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組的MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLS-S均明顯升高，而MLC、MLS則明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示，肝郁脾虛型與濕熱中阻型MLV-SD、MLC-SD、MLS、MLS-SD差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），瘀血阻絡(luò)型MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLS與濕熱中阻型比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），肝郁脾虛型MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLC-SD、MLS、MLS-SD與瘀血阻絡(luò)型比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

人體感染HBV后免疫紊亂，表現(xiàn)出不同的免疫狀態(tài)與中醫(yī)證候有一定的相關(guān)性。根據(jù)現(xiàn)代免疫學(xué)理論，機(jī)體免疫功能低下或不健全情況下感染了HBV，表現(xiàn)為免疫系統(tǒng)對(duì) HBV不能識(shí)別，不能發(fā)生對(duì)病毒的免疫清除，雖可不發(fā)病，但又不能清除病毒，使病毒與機(jī)體處于共存狀態(tài)，形成“免疫耐受”，臨床上可表現(xiàn)出亞健康狀態(tài)，如常有疲勞、脘脅不適、食欲不振、緊張或失眠及舌脈象的改變等，相對(duì)應(yīng)于“肝郁脾虛”。隨著機(jī)體對(duì) HBV的識(shí)別能力逐漸增強(qiáng)，發(fā)生免疫應(yīng)答形成“免疫清除”或“免疫損傷”，可表現(xiàn)為CHB活動(dòng)狀態(tài)，如兩脅脹痛、黃疸、納差、尿黃及舌苔黃或膩、脈弦滑等，相對(duì)應(yīng)于“濕熱中阻”。如果機(jī)體免疫應(yīng)答無(wú)力，對(duì)病毒不能完全清除，形成病毒殘留，可表現(xiàn)為亞健康狀態(tài)并出現(xiàn)相應(yīng)證候，也有少部分患者出現(xiàn)慢性炎癥遷延、肝纖維化甚至肝硬化，形成“免疫不全”，如有頭暈、乏力、腰膝酸軟、脅肋隱痛、舌質(zhì)暗紅、脈細(xì)澀等，對(duì)應(yīng)于“瘀血阻絡(luò)型”。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CHB患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化與辨證分型有關(guān)，主要表現(xiàn)為CD4+和CD8+及CD4+/CD8+的T淋巴細(xì)胞亞群異常。從研究結(jié)果來(lái)看，CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞亞群在CHB患者確實(shí)存在異常變化，肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型各組與健康對(duì)照組比較，CD4+減少，CD8+升高，CD4+/CD8+比值降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中，瘀血阻絡(luò)型變化最明顯。本研究結(jié)果與CHB患者以肝郁脾虛及濕熱中阻為主，隨著病程延長(zhǎng)及病情加重，主導(dǎo)證型由氣分至血分，以血瘀血熱為主證特點(diǎn)的觀點(diǎn)基本相符[8]。從臨床觀察看，一般情況，肝郁脾虛型、濕熱中阻型處于疾病的穩(wěn)定期，瘀血阻絡(luò)型處于疾病的進(jìn)展期或活動(dòng)期[9]，本研究顯示隨著病情進(jìn)展及活動(dòng)，CD4+逐漸下降，CD8+逐漸上升；隨著病情緩解，CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞趨向正常。在此病理過(guò)程中，白細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞數(shù)量的減少及凋亡細(xì)胞增加，淋巴細(xì)胞形態(tài)，內(nèi)部結(jié)構(gòu)等發(fā)生變化。本研究結(jié)果顯示，CHB患者肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型各組的淋巴細(xì)胞VCS的各項(xiàng)指標(biāo)與健康對(duì)照組比較，均存在明顯差異，而三種不同證候組之間的VCS亦有差異，表明隨著CHB從穩(wěn)定期到發(fā)展期，淋巴細(xì)胞VCS變化明顯，這與CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞結(jié)果變化相一致。VCS中的V（volume）是細(xì)胞體積反應(yīng)細(xì)胞體積大小，C（conductivity）是傳導(dǎo)性有助于鑒別體積雖然相同，但內(nèi)部結(jié)構(gòu)性質(zhì)不同的細(xì)胞，如細(xì)胞核、漿的比例，細(xì)胞內(nèi)顆粒的大小和密度，S（scatter）是散射性，反映細(xì)胞內(nèi)部顆粒特性、細(xì)胞核復(fù)雜性[10]。本研究結(jié)果表明，CHB患者淋巴細(xì)胞體積變大，淋巴細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)性質(zhì)如細(xì)胞核、漿的比例發(fā)生變化，淋巴細(xì)胞內(nèi)顆粒的大小和密度發(fā)生變化，這些參數(shù)的變化又會(huì)促進(jìn)淋巴細(xì)胞亞群的變化?？梢姡琓淋巴細(xì)胞與VCS參數(shù)相互影響相互作用，在不同的證侯各指標(biāo)變化又有所區(qū)別。

中醫(yī)辨證論治是中醫(yī)治療CHB的主要方法，中醫(yī)藥調(diào)控免疫是治療CHB的優(yōu)勢(shì)環(huán)節(jié)[11]。中醫(yī)證型是運(yùn)用傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)理論，對(duì)臨床望、聞、問(wèn)、切四診所得資料，進(jìn)行歸納分析，辨證施治的依據(jù)，而慢性乙肝的中醫(yī)辨證分型與CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞及VCS參數(shù)有著密切的關(guān)系，因此，這些參數(shù)能為監(jiān)測(cè)乙肝疾病的發(fā)展提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，同時(shí)，為指導(dǎo)臨床治療方案，促進(jìn)患者的康復(fù)，提供新的思路。

[參考文獻(xiàn)]

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[8] 于豐彥，周福生，廖榮鑫，等. HBeAg陽(yáng)性與陰性慢性乙型肝炎患者中醫(yī)辨證及其相關(guān)指標(biāo)的比較[J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，18（1）：8-10.

[9] 王恩成，唐琳，王健，等. 慢性乙型肝炎中醫(yī)證候聚類分析研究[J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志志，2014，34（1）：39-41.

[10] 郭希超，楊大干，俞延迎，等. 白細(xì)胞VCS參數(shù)在血液細(xì)菌感染中的應(yīng)用研究[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008， 31（12）：1330-1334.

[11] 高月求. 中醫(yī)藥調(diào)控免疫是治療慢性乙型肝炎優(yōu)勢(shì)環(huán)節(jié)[J]. 中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，2010，20（3）：129-130.

（收稿日期：2014-05-15）endprint

2.2不同證型證候WBC、ALT及結(jié)果比較

與健康對(duì)照組比較，肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組ALT明顯升高，WBC明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示，三組間WBC無(wú)明顯變化（P>0.05），瘀血阻絡(luò)型與肝郁脾虛型、濕熱中阻型比較，ALT差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.3不同證型淋巴細(xì)胞亞群結(jié)果比較

與健康對(duì)照組比較，肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組的CD4+、CD4+/CD8+表達(dá)明顯下降，而CD8+表達(dá)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示，肝郁脾虛型與濕熱中阻型相比，CD8+表達(dá)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而CD4+、CD4+/CD8+差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。瘀血阻絡(luò)型組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+與肝郁脾虛型及濕熱中阻型相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.4不同證型淋巴細(xì)胞的VCS參數(shù)比較

與健康對(duì)照組比較， 肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組的MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLS-S均明顯升高，而MLC、MLS則明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型三組進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示，肝郁脾虛型與濕熱中阻型MLV-SD、MLC-SD、MLS、MLS-SD差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），瘀血阻絡(luò)型MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLS與濕熱中阻型比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），肝郁脾虛型MLV、MLV-SD、MLC-SD、MLC-SD、MLS、MLS-SD與瘀血阻絡(luò)型比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

人體感染HBV后免疫紊亂，表現(xiàn)出不同的免疫狀態(tài)與中醫(yī)證候有一定的相關(guān)性。根據(jù)現(xiàn)代免疫學(xué)理論，機(jī)體免疫功能低下或不健全情況下感染了HBV，表現(xiàn)為免疫系統(tǒng)對(duì) HBV不能識(shí)別，不能發(fā)生對(duì)病毒的免疫清除，雖可不發(fā)病，但又不能清除病毒，使病毒與機(jī)體處于共存狀態(tài)，形成“免疫耐受”，臨床上可表現(xiàn)出亞健康狀態(tài)，如常有疲勞、脘脅不適、食欲不振、緊張或失眠及舌脈象的改變等，相對(duì)應(yīng)于“肝郁脾虛”。隨著機(jī)體對(duì) HBV的識(shí)別能力逐漸增強(qiáng)，發(fā)生免疫應(yīng)答形成“免疫清除”或“免疫損傷”，可表現(xiàn)為CHB活動(dòng)狀態(tài)，如兩脅脹痛、黃疸、納差、尿黃及舌苔黃或膩、脈弦滑等，相對(duì)應(yīng)于“濕熱中阻”。如果機(jī)體免疫應(yīng)答無(wú)力，對(duì)病毒不能完全清除，形成病毒殘留，可表現(xiàn)為亞健康狀態(tài)并出現(xiàn)相應(yīng)證候，也有少部分患者出現(xiàn)慢性炎癥遷延、肝纖維化甚至肝硬化，形成“免疫不全”，如有頭暈、乏力、腰膝酸軟、脅肋隱痛、舌質(zhì)暗紅、脈細(xì)澀等，對(duì)應(yīng)于“瘀血阻絡(luò)型”。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CHB患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化與辨證分型有關(guān)，主要表現(xiàn)為CD4+和CD8+及CD4+/CD8+的T淋巴細(xì)胞亞群異常。從研究結(jié)果來(lái)看，CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞亞群在CHB患者確實(shí)存在異常變化，肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型各組與健康對(duì)照組比較，CD4+減少，CD8+升高，CD4+/CD8+比值降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中，瘀血阻絡(luò)型變化最明顯。本研究結(jié)果與CHB患者以肝郁脾虛及濕熱中阻為主，隨著病程延長(zhǎng)及病情加重，主導(dǎo)證型由氣分至血分，以血瘀血熱為主證特點(diǎn)的觀點(diǎn)基本相符[8]。從臨床觀察看，一般情況，肝郁脾虛型、濕熱中阻型處于疾病的穩(wěn)定期，瘀血阻絡(luò)型處于疾病的進(jìn)展期或活動(dòng)期[9]，本研究顯示隨著病情進(jìn)展及活動(dòng)，CD4+逐漸下降，CD8+逐漸上升；隨著病情緩解，CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞趨向正常。在此病理過(guò)程中，白細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞數(shù)量的減少及凋亡細(xì)胞增加，淋巴細(xì)胞形態(tài)，內(nèi)部結(jié)構(gòu)等發(fā)生變化。本研究結(jié)果顯示，CHB患者肝郁脾虛型、濕熱中阻型、瘀血阻絡(luò)型各組的淋巴細(xì)胞VCS的各項(xiàng)指標(biāo)與健康對(duì)照組比較，均存在明顯差異，而三種不同證候組之間的VCS亦有差異，表明隨著CHB從穩(wěn)定期到發(fā)展期，淋巴細(xì)胞VCS變化明顯，這與CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞結(jié)果變化相一致。VCS中的V（volume）是細(xì)胞體積反應(yīng)細(xì)胞體積大小，C（conductivity）是傳導(dǎo)性有助于鑒別體積雖然相同，但內(nèi)部結(jié)構(gòu)性質(zhì)不同的細(xì)胞，如細(xì)胞核、漿的比例，細(xì)胞內(nèi)顆粒的大小和密度，S（scatter）是散射性，反映細(xì)胞內(nèi)部顆粒特性、細(xì)胞核復(fù)雜性[10]。本研究結(jié)果表明，CHB患者淋巴細(xì)胞體積變大，淋巴細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)性質(zhì)如細(xì)胞核、漿的比例發(fā)生變化，淋巴細(xì)胞內(nèi)顆粒的大小和密度發(fā)生變化，這些參數(shù)的變化又會(huì)促進(jìn)淋巴細(xì)胞亞群的變化?？梢?，T淋巴細(xì)胞與VCS參數(shù)相互影響相互作用，在不同的證侯各指標(biāo)變化又有所區(qū)別。

中醫(yī)辨證論治是中醫(yī)治療CHB的主要方法，中醫(yī)藥調(diào)控免疫是治療CHB的優(yōu)勢(shì)環(huán)節(jié)[11]。中醫(yī)證型是運(yùn)用傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)理論，對(duì)臨床望、聞、問(wèn)、切四診所得資料，進(jìn)行歸納分析，辨證施治的依據(jù)，而慢性乙肝的中醫(yī)辨證分型與CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞及VCS參數(shù)有著密切的關(guān)系，因此，這些參數(shù)能為監(jiān)測(cè)乙肝疾病的發(fā)展提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，同時(shí)，為指導(dǎo)臨床治療方案，促進(jìn)患者的康復(fù)，提供新的思路。

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[7] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì). 慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）[J]. 中華流行病學(xué)雜志，2011，32（4）：405-415.

[8] 于豐彥，周福生，廖榮鑫，等. HBeAg陽(yáng)性與陰性慢性乙型肝炎患者中醫(yī)辨證及其相關(guān)指標(biāo)的比較[J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，18（1）：8-10.

[9] 王恩成，唐琳，王健，等. 慢性乙型肝炎中醫(yī)證候聚類分析研究[J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志志，2014，34（1）：39-41.

[10] 郭希超，楊大干，俞延迎，等. 白細(xì)胞VCS參數(shù)在血液細(xì)菌感染中的應(yīng)用研究[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008， 31（12）：1330-1334.

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