2287例兒童肺炎支原體抗體的檢測(cè)和分析

徐 軍 (陜西省西鄉(xiāng)縣中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 西鄉(xiāng) 723500)

肺炎支原體(Mp)是兒童呼吸道感染的重要病原體之一，主要通過(guò)呼吸道飛沫傳播，潛伏期2～3周，發(fā)病率以青少年最高。其病理改變以間質(zhì)性肺炎為主，有時(shí)并發(fā)支氣管肺炎。臨床癥狀主要表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、咽喉痛、咳嗽等一般的呼吸道癥狀，也有個(gè)別死亡病例報(bào)道。一年四季均可發(fā)病，但多在秋冬季節(jié)［1］。為了解本地區(qū)兒童秋冬季肺炎支原體的感染情況，避免對(duì)患兒誤診和抗生素濫用，給患兒提供正確及時(shí)的治療方案，特對(duì)本地區(qū)2103年秋冬季三個(gè)月(10月～12月)的門(mén)診和病區(qū)共計(jì)2287例呼吸道感染兒童進(jìn)行肺炎支原體抗體血清學(xué)檢測(cè)，為臨床患兒的診斷和治療提供重要參考。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象:所有檢測(cè)標(biāo)本均來(lái)自于我院2013年10月～12月兒科門(mén)診和同期兒科病區(qū)呼吸道感染兒童，年齡在0～12歲范圍，采集標(biāo)本均為靜脈血并按照血清學(xué)檢測(cè)要求分離血清。檢測(cè)人數(shù)共計(jì)2287例，其中男性?xún)和?029例，女性?xún)和?258例。

1.2 應(yīng)用試劑:采用日本富士瑞必歐株式會(huì)社生產(chǎn)的商品名為賽樂(lè)迪亞-麥可II(SERODIA-MYCO II)試劑盒檢測(cè)被檢患兒標(biāo)本血清中所含的肺炎支原體特異性抗體檢測(cè)原理是用肺炎支原體(Mac株)抗原致敏的人工明膠粒子與標(biāo)本炎支原體特異性抗體發(fā)生肉眼可見(jiàn)的被動(dòng)凝集反應(yīng)。

1.3 檢測(cè)方法:①每次試驗(yàn)前30 min，用規(guī)定量的血清專(zhuān)用稀釋液溶解致敏粒子和未致敏粒子。②用試劑盒所附專(zhuān)用滴管(25 μl/每滴)向“U”型微量反應(yīng)板第1 孔中滴加100 μl，向第2～第8孔中各滴加25 μl血清稀釋液。③用微量移液管向第1孔中加入25 μl血清樣品，然后從第1～第8孔進(jìn)行對(duì)倍稀釋?zhuān)鋵?duì)應(yīng)的血清稀釋倍數(shù)為1∶5～1∶640。④用試劑盒提供的滴管向第2孔中加入25 μl未致敏粒子溶液，用另一支滴管向第3～第8孔中各滴加25 μl致敏粒子溶液，這時(shí)標(biāo)本血清的最終稀釋倍數(shù)為1∶20～1∶1280(對(duì)應(yīng)第2～第8孔)。⑤每次檢測(cè)時(shí)要求每份樣本和未致敏粒子的反應(yīng)為陰性。試劑盒中陽(yáng)性對(duì)照的抗體滴度為1:320，且陽(yáng)性對(duì)照的液體樣品已預(yù)先稀釋到1∶10。⑥完成加樣后的微量反應(yīng)板用平板混合器混勻30 s，不干膠封板加蓋，在室溫下(15℃ ～30℃)靜置3 h，然后判讀結(jié)果。按試劑盒說(shuō)明書(shū)要求將最終稀釋倍數(shù)≥1∶40與致敏粒子出現(xiàn)凝集判定結(jié)果為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:對(duì)整理搜集的相關(guān)數(shù)據(jù)結(jié)果使用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，并使用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)結(jié)果:0～2歲組和3～6歲、7～12歲兩組間差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，而3～6歲和7～12歲兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。具體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 各年齡組肺炎支原體抗體陽(yáng)性率比較

2.2 男性、女性?xún)和窝字гw抗體陽(yáng)性率比較:差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。男性、女性?xún)和窝字гw抗體陽(yáng)性率比較:男1029例，陽(yáng)性364例(35.37%)，女1258例，陽(yáng)性417例(33.15%)。

3 討論

肺炎支原體感染在我國(guó)各地廣泛存在，是引起急性呼吸道感染的常見(jiàn)病原體。肺炎支原體除能引起呼吸系統(tǒng)病變外，還能引起心肌炎、肝炎、血小板減少性紫癜［2］等呼吸系統(tǒng)以外的疾病，如果反復(fù)發(fā)作還能誘發(fā)兒童營(yíng)養(yǎng)缺乏癥，嚴(yán)重影響患兒的生長(zhǎng)發(fā)育［3］，因此，必須引起臨床重視和給予患者積極有效的治療，保護(hù)兒童的生命健康。

肺炎支原體是引起肺炎最常見(jiàn)的病原體之一，多發(fā)于兒童和嬰兒，肺炎支原體也是較常見(jiàn)的病原微生物。檢測(cè)肺炎支原體抗體對(duì)診斷肺炎支原體感染有重要的臨床意義。由于肺炎支原體感染后臨床癥狀不明顯，甚至無(wú)臨床癥狀，導(dǎo)致與細(xì)菌、病毒等其他微生物感染鑒定的困難性［4］。目前，肺炎支原體感染的診斷方法主要有分離培養(yǎng)、血清學(xué)試驗(yàn)和聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)等，其中分離培養(yǎng)方法特異性高，但對(duì)培養(yǎng)基和標(biāo)本要求高，耗時(shí)較長(zhǎng)，難以普及;PCR檢測(cè)方法有很好的靈敏度和特異性，但成本高，對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件和操作人員要求高，且檢測(cè)結(jié)果容易出現(xiàn)假陽(yáng)性，不適于常規(guī)開(kāi)展［5］;血清學(xué)試驗(yàn)即患者血清肺炎支原體抗體檢測(cè)操作簡(jiǎn)便，結(jié)果報(bào)告較快，特異性強(qiáng)，適合各級(jí)醫(yī)院檢驗(yàn)科使用。

本文通過(guò)采用SERODIA-MYCO II肺炎支原體診斷試劑盒對(duì)本地秋冬季共計(jì)2287例呼吸道感染兒童血清中肺炎支原體抗體的檢測(cè)，知道了本時(shí)期呼吸道感染兒童中肺炎支原體的陽(yáng)性感染率為34.15%，其中年齡在3～12歲范圍的兒童感染率更高，達(dá)到47%左右，此結(jié)果與其他檢驗(yàn)界同行的研究結(jié)果較一致，支原體肺炎的發(fā)病與室內(nèi)活動(dòng)增加及密切接觸有重要的關(guān)系，所以導(dǎo)致肺炎支原體在呼吸道感染的患者中陽(yáng)性率隨著年齡的增長(zhǎng)也隨之升高的顯著現(xiàn)象［6］。此種情況應(yīng)當(dāng)引起臨床兒科的重視，避免濫用抗生素和延誤患兒的診斷治療，但本調(diào)查顯示男性和女性?xún)和姆窝字гw陽(yáng)性感染率結(jié)果相近(P＞0.05)，這與其他同行的報(bào)道結(jié)果有所不同［7］，可能與不同地域、氣候、兒童營(yíng)養(yǎng)狀況、性別的免疫學(xué)差異等因素有關(guān)，有待進(jìn)一步的研究探討。同時(shí)在此提醒臨床兒科醫(yī)師由于本檢測(cè)試驗(yàn)僅用于檢測(cè)患兒肺炎支原體抗體，而非直接檢測(cè)肺炎支原體，因而陽(yáng)性結(jié)果不能確診為肺炎支原體近期感染，臨床兒科醫(yī)師應(yīng)結(jié)合患兒癥狀進(jìn)行綜合分析診斷。

［1］ 吳躍平，趙瑞珍.小兒肺炎支原體感染IgM抗體檢測(cè)分析［J］.國(guó)際醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2006，(7):656.

［2］ 單 玲，李春懷，王 玥，等.伴肺炎支原體抗體陽(yáng)性的兒童原發(fā)性血小板減少性紫癜100例臨床觀察［J］.吉林醫(yī)學(xué)，2009，30(24):3137.

［3］ 于海潮.小兒肺炎支原體肺炎52例臨床分析［J］.吉林醫(yī)學(xué)，2013，34(7):1301.

［4］ 嚴(yán)莉莉.呼吸道感染患兒肺炎支原體檢測(cè)結(jié)果分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，(9):75.

［5］ 顧 敏，劉佳強(qiáng)，蔣最明.血清肺炎支原體效價(jià)測(cè)定的臨床應(yīng)用［J］.國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2009，16:88.

［6］ 黃 偉.小兒肺炎支原體抗體檢測(cè)結(jié)果分析［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2011，9(34):376.

［7］ 卓衛(wèi)民.小兒肺炎支原體抗體檢測(cè)結(jié)果及相關(guān)分析［J］.中外醫(yī)療，2012，(18):163.