李 璟，段素云，王金秋，李 志，陳伊剛

（1.北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院畜牧獸醫(yī)系，北京 102442；2.北京市房山區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，北京 102488）

Li Jing1,Duan Suyun1,Wang Jinqiu1,Li Zhi1,Chen Yigang2

（1.Agricultural vocational col lege of Beij ing,Beij ing 102442；2.Beij ing fangshan dist rict animal heal th supervision, Bei j ing 102488)

口服鹽酸特比萘芬對幼犬腎臟損傷的病理組織學(xué)觀察

李 璟1，段素云1，王金秋1，李 志1，陳伊剛2

（1.北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院畜牧獸醫(yī)系，北京 102442；2.北京市房山區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，北京 102488）

6月齡以下幼犬皮膚保護屏障不健全，皮膚真菌病發(fā)病率高，鹽酸特比萘芬抗菌作用力強，在小動物臨床上廣泛應(yīng)用于治療淺表真菌病。為了探究口服鹽酸特比萘酚對幼犬腎功能的影響，本文通過對20只2月齡左右健康幼犬，按照對照組(0 mg/kg·d）、低劑量組(5 mg/kg·d）、推薦劑量組(10 mg/kg·d）、中劑量組(20 mg/kg·d）和高劑量組(40 mg/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d，在投喂第21天采取腎臟活組織，H.E.染色，進行腎臟病理切片鏡檢，觀察鹽酸特比萘芬對幼犬腎組織病理學(xué)損傷。結(jié)果顯示，各個劑量的鹽酸特比萘芬均能造成幼犬腎臟實質(zhì)性損傷，且越高劑量的鹽酸特比萘芬對腎臟的損傷越高。

鹽酸特比萘酚；病理組織學(xué)；幼犬

Li Jing1,Duan Suyun1,Wang Jinqiu1,Li Zhi1,Chen Yigang2

（1.Agricultural vocational col lege of Beij ing,Beij ing 102442；2.Beij ing fangshan dist rict animal heal th supervision, Bei j ing 102488)

鹽酸特比萘芬是小動物臨床治療犬皮膚真菌病的常用藥，該藥可以抑制真菌的麥角鯊烯環(huán)氧化酶，達到抑制和殺滅真菌的作用[1]。該藥口服吸收率可達約70%～80%，血漿蛋白結(jié)合率高達99%，有親角質(zhì)性和親脂性，可迅速彌散至皮膚角質(zhì)層[2]。該藥主要在肝臟代謝，經(jīng)過腎臟排泄，少部分經(jīng)過膽汁、糞便排泄，肝、腎功能不全者對特比萘芬的清除率可能降低，從而導(dǎo)致血藥濃度升高，出現(xiàn)肝、腎損傷[3]。腎臟是生成尿液、調(diào)節(jié)和維持體內(nèi)電解質(zhì)平衡、保持機體內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定的主要器官，幼犬的腎功能水平在8周齡時接近成年水平[4-5]。本試驗分別按照按照空白劑量組和4個不同劑量組連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d，通過組織病理學(xué)觀察探究該藥的腎毒性，旨在為小動物臨床用藥提供參考。

1 試驗材料

1.1 試驗動物 從北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院動物中心選取2月齡左右幼犬20只，公犬10只，母犬10只，平均體重1.5 kg，隔離飼養(yǎng)21 d，進行體檢，選擇健康的幼犬進行使用，并隨機分成5組。

1.2 試驗藥品 天津市保靈動物保健品有限公司真菌滅（復(fù)方鹽酸特比萘芬片），每片含鹽酸特比萘芬100 mg，推薦劑量10 mg/（kg·d）。

1.3 試驗儀器 山東醫(yī)療機械廠LX-75切片機，半自動包埋機，自動烤片機，麥克奧迪光學(xué)顯微鏡。

1.4 其他材料 優(yōu)級純甲醛、二甲苯、中性樹膠、蘇木精-伊紅染色液、明膠、石蠟等，由北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院教學(xué)動物醫(yī)院提供。

2 試驗方法

2.1 試驗動物準備與飼養(yǎng) 飼喂皇家小型犬幼犬奶糕犬糧，自由飲用純凈水。

2.2 試驗動物分組及步驟 正常飼喂21 d后，選取健康檢查合格，無投藥史的幼犬作為試驗動物。20條幼犬按照對照組（0 mg/kg·d）、低劑量組（5 mg/kg·d）、推薦劑量組（10 mg/kg·d）、中劑量組(20 mg/kg·d）和高劑量組（40 mg/kg·d）被隨機分成5組，每組4只，根據(jù)劑量分別口服鹽酸特比萘芬21 d。

2.3 樣品采集及保存方法 在給藥第21天每組選取4條試驗幼犬，全身麻醉，打開腹腔，采取腎臟活體組織，并應(yīng)用10%的甲醛溶液浸泡1周。

2.4 標本處理 標本經(jīng)常規(guī)組織處理，石蠟包埋，2μm切片，H.E.染色，顯微鏡下觀察，采集數(shù)碼圖像。

3 結(jié)果觀察

3.1 低劑量組（5 mg/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片 見圖1和圖2。

由圖1和圖2可以看出，腎臟組織中出現(xiàn)大量的壞死，腎小管上皮排列不完整，上皮大量脫落，腎小管管腔堵塞，細胞結(jié)構(gòu)不清晰。

3.2 推薦量組（10 mg/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片 見圖3和圖4。

圖1 低劑量組（5 mg/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片（H.E.100×）Fig.1 Low dose group(5 mg/kg·d)kidney biopsy(H.E.100 x)

圖2 低劑量組（5 mg/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片 （H.E.400×）Fig.2 Low dose group(5 mg/kg·d)kidney biopsy(H.E.400 x)

圖3 推薦劑量組（10 m g/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片（H.E.100×）Fig.3 Recomm ended dose group(10 mg/kg·d)kidney biopsy(H.E.100 x)

圖4 推薦劑量組（10 m g/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片（H.E.400×）Fig.4 Recommended dose group 10 mg/kg·d)kidney biopsy(H.E.400 x)

由圖3和圖4可以看出，腎小管的排列相對整齊,腎小球結(jié)構(gòu)不完整。3.3 中劑量組（20 mg/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片 見圖5和圖6。

圖5 中劑量組（20 m g/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片（H.E.100×）Fig.5 Dose groups(20 mg/kg·d)kidney biopsy(H.E.100 x)

圖6 中劑量組（20 mg/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片（H.E.400×）Fig.6 Dose groups(20 m g/kg·d)kidney biopsy(H.E.400 x)

由圖5和圖6可以看出，腎小管管腔中有大量的粉紅色均質(zhì)的物質(zhì)。

3.4 高劑量組(40 mg/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片 見圖7和圖8。

由圖7和圖8可以看出，腎臟可見組織邊緣完整，腎小球結(jié)構(gòu)疏松，腎囊腔擴大，腎小管管腔變窄，部分區(qū)域內(nèi)出現(xiàn)大量的紅細胞浸潤，腎小管上皮排列不完整，大量脫落，腎小管管腔堵塞，細胞結(jié)構(gòu)不清晰。

圖7 高劑量組(40 mg/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片（H.E.100×）Fig.7 High dose group(40 m g/kg·d)kidney biopsy(H.E.100 x)

圖8 高劑量組（40 mg/kg·d）連續(xù)口服鹽酸特比萘芬21 d腎臟切片（H.E.400×）Fig.8 High dose group(40 mg/kg·d)kidney biopsy(H.E.400 x)

4 結(jié)論

4.1 高劑量組犬的21 d腎臟組織的病理變化均是最明顯、最嚴重的，低劑量組、推薦劑量組和中劑量組也有不同程度的腎損害。

4.2 幼齡犬的腎臟功能雖然在8周齡時接近成年水平，但口服鹽酸特比萘芬仍會對腎臟損傷較大，臨床用藥時應(yīng)謹慎選擇。

[1]金藝鵬，林德貴.鹽酸特比萘芬對犬貓皮膚真菌病的療效觀察[J].中國獸醫(yī)雜志，2003，39（6）：21.

[2]蕭月興，何鳳霞，陳莎.鹽酸特比萘芬的臨床應(yīng)用及不良反應(yīng)研究進展[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2011，49（32）：27-28，43.

[3]王慶華，喬志軍，金藝鵬，等.口服鹽酸特比萘芬對貓肝腎損傷的病理組織學(xué)觀察[J].中國獸醫(yī)雜志，2010，46（11）：19-24.

[4]丁明星，林德貴.犬貓皮膚真菌病研究進展：發(fā)病情況及臨床特點[J].中國動物保健，2004，8：31-32.

[5]張洛，陳新，劉利鋒，等.犬口服鹽酸特比萘芬片的生物利用度研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（5）：27-28.

The toxic effects of terbinafine hydrochloride by oralon Kidney of puppy

The puppy skin protective bar rier under 6 months is not ful l ly developed,which had high rates of fungal skin disease.Terbinaf ine hydrochloride had good ef fects on antibacterial actions,and was widely used to t reat super ficial mycosis in cl inical.To explore the inf luence of oral ly administration of terbinaf ine hydrochloride on the kidney of puppies,20 heal thy puppies around 2 months were divided into 5 groups:the cont rol group (0 mg/kg·d),low dosage group(5 mg/ kg·d),recommendation dosage group(10 mg/kg·d),middle dosage group(20 mg/kg·d)and high dosage group(40 mg/kg·d).The rats were continuous administered with terbinaf ine hydrochloride oral ly for 21 days,the kidneys were col lected at the end of the 35 day,stained with H.E,the pathological changes were observed under the microscope.The resul ts showed that al l dosages in this experiment could cause injury to the kidney,and the higher concentration,the more serious injury in the kidney.

Terbinaf ine hydrochloride;Puppy;Histopathology

S858.293

1672-9692(2015)07-0040-05

2015-05-15

李璟（1983-），男，北京房山人，大學(xué)本科，獸醫(yī)師，主要從事小動物臨床診療工作。

北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院院級項目——口服鹽酸特比萘酚對幼犬肝腎影響的研究（項目編號：XY-YF-13-26）