免疫組織化學(xué)在肺小細(xì)胞癌診斷中的應(yīng)用

汪美華，凌揚，周林艷

(蘇州大學(xué)附屬常州腫瘤醫(yī)院，江蘇 常州 213001)

[摘要]目的目的 探討免疫組織化學(xué)在肺小細(xì)胞癌(SCLC)診斷中的作用。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法對肺腫瘤穿刺和支氣管鏡活檢標(biāo)本疑似SCLC的72例標(biāo)本檢測TTF1、NapsinA、CK5/6、P63、CD56、Syn、CgA、CD45、Ki67的蛋白表達(dá)，分析SCLC的病理形態(tài)特征與免疫表型。結(jié)果SCLC易出現(xiàn)“人工擠壓現(xiàn)象”；結(jié)合免疫組織化學(xué)染色結(jié)果，72例疑似SCLC者最后診斷為SCLC 65例，低分化鱗癌5例，非典型類癌2例。結(jié)論免疫組織化學(xué)在SCLC的診斷與鑒別診斷中具有十分重要的作用。

[關(guān)鍵詞]肺腫瘤；小細(xì)胞癌；免疫組織化學(xué)；診斷

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2015.02.020

[中圖分類號]R734.2；R730.4

作者簡介：汪美華(1971-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事腫瘤病理學(xué)研究工作。E-mail:962770314@qq.com

收稿日期：(2014-12-13)

Application of Immunohistochemistry in the Diagnosis of Small Cell Lung Carcinoma

Wang Meihua,Ling Yang,Zhou Linyan

(ChangzhouTumorHospitalAffiliatedtoSuzhouUniversity,Changzhou213001,China)

Abstract[]ObjectiveTo investigate the role of immunohistochemistry in the diagnosis of small cell lung carcinoma (SCLC).MethodsThe protein expressions of TTF1,NapsinA,CK5/6,P63,CD56,Syn,CgA,CD45 and Ki67 in the 72 cases of percutaneous lung biopsy of bronchoscopic biopsy specimens suspected as SCLC were examined by immunohistological method,and the pathological characteristics and immunophenotype were analyzed.ResultsArtificial pressure could be observed in most of SCLC; Of the 72 patients suspected as SCLC,65 patients were small cell lung carcinoma,5 patients poorly differentiated squamous cell carcinoma and 2 patients atypical carcinoid.ConclusionImmunohistochemistry is a great role in the diagnosis and differential diagnosis of SCLC.

[Key words]lung neoplasms; small cell carcinoma; immunohistochemistry; diagnosis

肺小細(xì)胞癌(small cell lung carcinoma，SCLC)惡性程度高，生長迅速，轉(zhuǎn)移早，預(yù)后較差，5 a生存率僅為1%～2%[1]。由于SCLC的組織學(xué)和生物學(xué)特性，通過支氣管鏡和穿刺活檢取得的標(biāo)本極易出現(xiàn)“人工擠壓現(xiàn)象”，可能導(dǎo)致病理診斷上的偏差。作者回顧性

分析了72例疑似SCLC患者的臨床病理資料，聯(lián)合觀察石蠟切片與免疫組織化學(xué)表型，探討SCLC的病理診斷依據(jù)。

1資料與方法

1.1臨床資料收集蘇州大學(xué)附屬常州腫瘤醫(yī)院病理科2004年3月至2014年3月疑似SCLC標(biāo)本72例，其中肺穿刺活檢標(biāo)本11例，支氣管鏡活檢標(biāo)本61例?；颊咧形荒挲g60(43～77)歲；男50例，女22例。

1.2方法72例疑似SCLC活檢標(biāo)本均常規(guī)固定于質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%多聚甲醛，然后經(jīng)脫水制成石蠟切片，并通過光鏡觀察其形態(tài)。72例活檢標(biāo)本均進(jìn)行免疫組織化學(xué)標(biāo)志物檢測，抗體選取TTF1、NapsinA、CK5/6、P63、CD56、Syn、CgA、CD45、Ki67，均為單克隆抗體；對Ki67表達(dá)指數(shù)<80%的病例加做PAX-5。操作按S-P免疫組織化學(xué)試劑盒說明書進(jìn)行，DAB顯色。上述抗體及試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。免疫組織化學(xué)結(jié)果判定：NapsinA、CK5/6、CD56、Syn、CgA、CD45表達(dá)部位為細(xì)胞膜、細(xì)胞漿；TTF1、P63、Ki67、PAX-5表達(dá)部位為細(xì)胞核。所有切片均經(jīng)2位有經(jīng)驗的病理科醫(yī)生分別閱片后確定。

2結(jié)果

72例疑似SCLC標(biāo)本，經(jīng)結(jié)合免疫組織化學(xué)染色結(jié)果，最后診斷為SCLC 65例，肺低分化鱗形細(xì)胞癌5例，非典型類癌2例。鏡下病理形態(tài)：72例疑似SCLC中，有63例出現(xiàn)“人工擠壓現(xiàn)象”，腫瘤細(xì)胞體積小，呈圓形、橢圓形，核染色質(zhì)細(xì)顆粒狀，核仁不明顯或無核仁，核分裂相多見。65例SCLC的免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：TTF1陽性率96.92%(63/65)，NapsinA 0.00%(0/65)，CK5/6 4.62%(3/65)，P63 10.77%(7/65)，CD56 98.46%(64/65)，Syn 70.77%(46/65)，CgA 61.54%(40/65),CD4 50.00%(0/65)，Ki67陽性率在80%以上者占98.46%(64/65)。

5例肺低分化鱗形細(xì)胞癌的免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：TTF1陽性率0.00%(0/5)，NapsinA 0.00%(0/5),CK5/6 100.00%(5/5),P63 80.00%(4/5)，CD56 0.00%(0/5)，Syn 0.00%(0/5)，CgA 0.00%(0/5)，CD45 0.00%(0/5)，Ki67陽性率在80%以上者占100.00%(5/5)。2例非典型類癌的免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：TTF1 0.00%(0/2)，NapsinA 50.00%(1/2)，CK5/6 50.00%(1/2)，P63 0.00%(0/2)，CD56 50.00%(1/2)，Syn 100.00%(2/2),CgA 100.00%(2/2),CD45 0.00%(0/2)，Ki67陽性率在80%以上者占0.00%[0/2，其中1例10%+，1例30%+，加做PAX-5陽性率0.00%(0/2)]。

3討論

SCLC的治療方法與其他類型的肺腫瘤有根本性差異，其對放、化療極其敏感，手術(shù)已不再是首選方案；而手術(shù)及分子靶向治療對非小細(xì)胞肺癌能提供治愈的機會和提高生存率[2]，因此，治療前取得明確的病理診斷就顯得十分必要。因疑似SCLC活檢標(biāo)本在石蠟切片時腫瘤組織擠壓較重，細(xì)胞形態(tài)不清，難以做出明確診斷[3]。本組72例疑似SCLC標(biāo)本中，63例出現(xiàn)“人工擠壓現(xiàn)象”，分析其原因：可能是SCLC細(xì)胞間的黏附力強、活檢時機械擠壓所致。雖然“人工擠壓現(xiàn)象”在病理診斷時常作為SCLC的主要依據(jù)之一，但“人工擠壓現(xiàn)象”導(dǎo)致細(xì)胞變形，形態(tài)不清；另外因活檢標(biāo)本取材少，有診斷價值的細(xì)胞成分更少，極易與低分化鱗癌、非典型類癌在石蠟切片診斷時出現(xiàn)混淆。

本組72例疑似SCLC，通過聯(lián)合觀察石蠟切片與免疫組織化學(xué)表型，最后診斷為SCLC 65例，肺低分化鱗形細(xì)胞癌5例，非典型類癌2例。SCLC免疫組化主要表達(dá)TTF1、CD56、Syn、CgA、Ki67，這與Beasley[4]的報道基本一致。而肺低分化鱗形細(xì)胞癌主要表達(dá)CK5/6、P63及Ki67；非典型類癌主要表達(dá)Syn、CgA及Ki67。Syn是最常用于診斷神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的特異性標(biāo)志物[5]，本組65例SCLC病例中Syn的陽性率為70.77%，低于文獻(xiàn)[6]報道的93.0%；CD56陽性率高達(dá)98.46%，其在SCLC中的表達(dá)遠(yuǎn)高于其他神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物，是SCLC最穩(wěn)定表達(dá)的蛋白標(biāo)志物[7-8]。5例肺低分化鱗形細(xì)胞癌免疫表型顯示：CK5/6陽性率100.00%，P63陽性率80.00%；而CD56、Syn、CgA、TTF1均為陰性。作者認(rèn)為聯(lián)合檢測TTF1、NapsinA、CK5/6、P63、CD56、Syn、CgA可鑒別SCLC與肺低分化鱗形細(xì)胞癌。本組資料顯示非典型類癌與SCLC有相似的免疫組化表型，而Ki67增殖指數(shù)常遠(yuǎn)低于SCLC，與文獻(xiàn)[9]報道相似。因此，作者支持Aslan等[10]的觀點：檢測Ki67增殖指數(shù)可能有助于SCLC與非典型類癌的鑒別診斷。因PAX-5在SCLC中陽性表達(dá)，而在非典型類癌中陰性或弱陽性表達(dá)，其也被應(yīng)用于兩者的鑒別診斷[11]。

SCLC在治療前就應(yīng)明確病理診斷，而SCLC的活檢標(biāo)本常因“人工擠壓現(xiàn)象”出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞形態(tài)不清，難以確診。聯(lián)合檢測多種蛋白表達(dá)對SCLC的診斷與鑒別診斷有非常重要的應(yīng)用價值。

參考文獻(xiàn)：

[1]Singh S,Parulekar W,Murray N,et al.Influence of sex on toxicity and treatment outcome in small-cell lung cancer[J].J Clin Oncol，2005，23(4):850-856.

[2]Li Z,Dacic S,Pantanowitz L,et al.Correlation of cytomorphology and molecular findings in EGFR+,KRAS+,and ALK+ lung carcinomas[J].Am J Clin Pathol，2014，141(3):420-428.

[3]中華醫(yī)學(xué)會.臨床技術(shù)操作規(guī)范：病理學(xué)分冊[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2007:8.

[4]Beasley MB.Immunohistochemistry of pulmonary and pleural neoplasia[J].Arch Pathol Lab Med，2008，132(7):1062-1072.

[5]何昊瑋，鄭軍華，高建平，等.腎上腺皮質(zhì)腫瘤神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)特性的初步研究[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2007，28(10)：1072-1074.

[6]萬輝，戴一菲.免疫組化在肺小細(xì)胞癌活檢診斷中的重要性[J].中國醫(yī)藥科學(xué)，2014，4(4)：151-156.

[7]den Bakker MA,Willemsen S,Grünberg K,et al.Small cell carcinoma of the lung and large cell neuroendocrine carcinoma interobserver variability[J].Histopathology， 2010,56(3):356-363.

[8]Salcido CD,Larochelle A,Taylor BJ,et al.Molecular characterisation of side population cells with cancer stem cell-like characteristics in small-cell lung cancer[J].Br J Cancer，2010，102(11):1636-1644.

[9]Wirth LJ,Carter MR,J?nne PA,et al.Outcome of patients with pulmonary carcinoid tumors receiving chemotherapy or chemoradiotherapy[J].Lung Cancer，2004，44(2):213-320.

[10]Aslan DL,Gulbahce HE,Pambuccian SE,et al.Ki-67 immunoreactivity in the differential diagnosis of pulmonary neuroendocrine neoplasms in specimens with extensive crush artifact[J].Am J Clin Pathol， 2005，123(6):874-878.

[11]Sica G,Vazquez MF,Altorki N,et al.PAX-5 expression in pulmonary neuroendocrine neoplasms: its usefulness in surgical and fine-needle aspiration biopsy specimens[J].Am J Clin Pathol， 2008,129(4):556-562.