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標(biāo)準(zhǔn)化脂蛋白（a）檢測(cè)輔助心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

隨著人們生活方式改變及人口老齡化加劇，我國(guó)心血管疾?。–VD）患病率呈“井噴式”上升。其中冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病，簡(jiǎn)稱(chēng)冠心?。–HD），是一種最常見(jiàn)、危害最大的心血管疾病。心血管疾病的“危險(xiǎn)因素”可分為不可改變的因素、可改變的危險(xiǎn)因素以及新發(fā)現(xiàn)的危險(xiǎn)因素三大類(lèi)。近年來(lái)，脂蛋白（a）［Lp（a）］作為一種新發(fā)現(xiàn)的危險(xiǎn)因素，受到了越來(lái)越多關(guān)注。日前，在上海舉辦的羅氏診斷全國(guó)生化學(xué)術(shù)交流暨糖化血紅蛋白一致性會(huì)議上，與會(huì)專(zhuān)家圍繞Lp（a）這一危險(xiǎn)因素，深入探討當(dāng)前研究進(jìn)展，旨在提高臨床醫(yī)生對(duì)Lp（a）的系統(tǒng)性認(rèn)識(shí)以及其在臨床心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及預(yù)測(cè)方面的價(jià)值。

1　Lp（a）：心血管疾病的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素及預(yù)測(cè)指標(biāo)

自1963年K?re Berg在人血漿中發(fā)現(xiàn)Lp（a）以來(lái)，至今臨床上已檢測(cè)出53種Lp（a），其中分子較小的Lp（a）較容易導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化。Lp（a）的病理作用已被廣泛認(rèn)知，主要表現(xiàn)在致血栓形成和致動(dòng)脈粥樣硬化兩方面。Lp（a）能抑制纖溶系統(tǒng)，增加凝血酶活性，同時(shí)具有潛在的抑制組織因子的功能，可促進(jìn)凝血，促使血栓形成。

Lp（a）導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的主要機(jī)制包括：促進(jìn)黏附分子表達(dá)，誘導(dǎo)人血管內(nèi)皮產(chǎn)生單核細(xì)胞趨化因子；氧化的Lp（a）誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活躍地?cái)z取Lp（a），增加巨噬細(xì)胞白細(xì)胞介素8（IL-8）的產(chǎn)生，促進(jìn)斑塊炎癥反應(yīng)；抑制活化腫瘤生長(zhǎng)因子β（TGFβ）的產(chǎn)生，導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞增殖和遷移，比低密度脂蛋白（LDL）優(yōu)先攜帶具促炎癥性質(zhì)的氧化磷脂機(jī)制。美國(guó)國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃（NCEP）的成人治療小組III（ATPIII）發(fā)布的指南中，將Lp（a）歸為“新發(fā)現(xiàn)的”脂類(lèi)危險(xiǎn)因素。

美國(guó)臨床內(nèi)分泌醫(yī)師協(xié)會(huì)（AACE）指南推薦的Reynolds危險(xiǎn)評(píng)分，加入Lp（a）等新發(fā)現(xiàn)的危險(xiǎn)因素后重新劃分了危險(xiǎn)級(jí)別比例，發(fā)現(xiàn)在Framingham危險(xiǎn)評(píng)分里被歸為中等危險(xiǎn)的患者中，約50%應(yīng)進(jìn)行重新劃分。Lp（a）水平增高有助于預(yù)測(cè)15年CVD結(jié)局，且能改善CVD風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)水平。這些結(jié)果提示Lp（a）水平可以用于社區(qū)人群，特別是中危人群的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)。

一項(xiàng)總覆蓋36項(xiàng)試驗(yàn)、126 634例研究對(duì)象的前瞻性研究顯示，Lp（a）的濃度與傳統(tǒng)心血管病風(fēng)險(xiǎn)因子間關(guān)聯(lián)不明顯，但與冠心病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)呈正相關(guān)。在對(duì)收縮壓、吸煙、糖尿病史、體質(zhì)指數(shù)等多因素進(jìn)行了調(diào)整后，分析發(fā)現(xiàn)Lp（a）濃度與冠心病風(fēng)險(xiǎn)呈連續(xù)性相關(guān)，且鮮少受其他因素影響，說(shuō)明Lp（a）是冠心病的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。

此外，哥本哈根一項(xiàng)對(duì)9 330個(gè)樣本量進(jìn)行了為期10年隨訪的心臟流行病學(xué)研究（CCHS）顯示，心肌梗死（MI）患病風(fēng)險(xiǎn)隨Lp（a）濃度的升高而增加，說(shuō)明高水平Lp（a）是MI的重要危險(xiǎn)因素。研究也表明，升高的Lp（a）與心血管疾病危險(xiǎn)之間存在明確的相關(guān)，這種相關(guān)不依賴LDL或非HDL膽固醇以及其他CVD危險(xiǎn)因素的水平而存在。

2　Lp（a）檢測(cè)方法與標(biāo)準(zhǔn)化

目前Lp（a）檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室多以免疫學(xué)方法為主，常用的檢測(cè)方法主要包括免疫透射比濁法（ITA）、免疫散射比濁法（INA）、熒光試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等。

專(zhuān)家指出，Lp（a）檢測(cè)存在方法多樣、參考品與待測(cè)樣品Lp（a）分子異質(zhì)性問(wèn)題，不當(dāng)?shù)腖p（a）檢測(cè)方法可造成檢測(cè)結(jié)果假陰性或假陽(yáng)性，導(dǎo)致高?；虻臀；颊叩募膊″e(cuò)誤分層。因此，Lp（a）檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化具有重要臨床價(jià)值，可輔助確定疾病的醫(yī)學(xué)決定水平（MDL），確立可靠的Lp（a）與疾病之間的關(guān)系，進(jìn)而建立推行Lp（a）治療的目標(biāo)值。

目前，Lp（a）標(biāo)準(zhǔn)化的難點(diǎn)是apo（a）大小的多態(tài)性。抗原決定簇、抗體反應(yīng)性、與不同部位的親和性、方法學(xué)以及檢測(cè)系統(tǒng)不同都是影響Lp（a）結(jié)果準(zhǔn)確性的因素。其標(biāo)準(zhǔn)化的關(guān)鍵是要求檢測(cè)方法使用的抗體與校準(zhǔn)品和標(biāo)本中的每個(gè)Lp（a）顆粒具有相同的免疫反應(yīng)性。

美國(guó)西雅圖的華盛頓大學(xué)西北脂類(lèi)研究實(shí)驗(yàn)室使用抗apo（a）的K49的表面決定簇的單克隆抗體，形成了直接結(jié)合的雙單克隆抗體酶聯(lián)免疫測(cè)定方法（a-40 ELISA），檢測(cè)血漿中的Lp（a）。結(jié)果說(shuō)明該方法準(zhǔn)確度不受apo（a）的多態(tài)性的影響，且任何單克隆抗體都不會(huì)與apo（a）分子多變部分的決定簇反應(yīng)。

羅氏Tina-quant？Lipoprotein（a）Gen.2是首個(gè)遵循EAS指南進(jìn)行了nmol/L標(biāo)準(zhǔn)化的產(chǎn)品，溯源至IFCC/ WHO SRM2B及參考ELISA方法，采用顆粒增強(qiáng)免疫比濁法，其檢測(cè)的是Lp（a）的顆粒濃度而非分子質(zhì)量，這種方法可準(zhǔn)確地檢測(cè)Lp（a）的微粒個(gè)數(shù)，不受多態(tài)性多少的影響，能夠帶來(lái)真正準(zhǔn)確的Lp（a）水平檢測(cè)值，幫助臨床醫(yī)生真確判斷CVD風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。新一代試劑適用于羅氏診斷所有生化平臺(tái)，檢測(cè)結(jié)果一致性更加優(yōu)秀，已于2014年9月在中國(guó)正式上市。