李璐奕 汪暉 熊婕 王建 袁芳
解酒保肝劑對(duì)小鼠酒精中毒的影響
李璐奕 汪暉 熊婕 王建 袁芳
目的觀察解酒保肝劑對(duì)小鼠醉酒實(shí)驗(yàn)、血清乙醇濃度和肝組織丙二醛含量的影響。方法50只小鼠隨機(jī)分為給藥組和對(duì)照組, 每組25只。給藥組小鼠給予解酒保肝劑灌胃, 對(duì)照組給予雙蒸餾水灌胃。記錄小鼠翻正反射消失及恢復(fù)時(shí)間, 取肝勻漿, 檢測(cè)肝臟丙二醛(MDA)含量, 用頂空氣相色譜法檢測(cè)血酒精濃度。結(jié)果與對(duì)照組比較, 給藥組翻正反射消失時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P<0.01), 翻正反射時(shí)間明顯縮短(P<0.05), 肝MDA含量顯著降低(P<0.05), 血酒精含量顯著降低(P<0.01)。結(jié)論解酒保肝劑具有良好的解酒作用。
解酒保肝劑;翻正反射;丙二醛含量
本實(shí)驗(yàn)參照典籍及中醫(yī)處方理論, 用枳椇子、葛根、五味子三味中藥制成解酒保肝劑、并觀察其對(duì)小鼠醉酒實(shí)驗(yàn)、血清乙醇濃度和肝、胃組織丙二醛(MDA)含量的影響。
枳椇子和葛根屬衛(wèi)生部(現(xiàn)衛(wèi)計(jì)委)批準(zhǔn)的藥食兩用的天然藥物, 具有較好的解酒效果。五味子屬衛(wèi)生部批準(zhǔn)的可用于保健食品的藥物, 具有良好的保肝功能[1-3]。從中醫(yī)處方理論上說(shuō), 三者結(jié)合具有清熱利濕、化瘀解毒、肝胃并治、行斂相兼, 從多環(huán)節(jié)共同發(fā)揮解酒保肝的功效, 達(dá)到了綜合的藥理效應(yīng)。該組方的主要藥理作用體現(xiàn)在:①以枳椇子為主, 通過(guò)增強(qiáng)ADH活性, 減少酒精經(jīng)胃腸吸收和促進(jìn)酒精經(jīng)肝臟生理途徑代謝;②以葛根為主, 抑制血中乙醇、乙醛濃度的升高, 改善乙醇引起的代謝損傷;③以五味子為主, 通過(guò)增加肝臟抗氧化酶活性, 增強(qiáng)肝臟的解毒護(hù)肝作用。
1.1 材料 雄性昆明小鼠SPF級(jí), 體重18~22 g, 許可證號(hào):SCXK(鄂)2005~2008, 由湖北省疾病預(yù)防中心提供。解酒保肝劑(枳椇子、葛根、五味子, 由武漢龍?zhí)┧帢I(yè)有限公司提供)、MDA檢驗(yàn)試劑盒(南京建成生物工程研究所)、化學(xué)試劑皆為分析純、島津UV-1601;低溫高速離心機(jī):日立CF-15R;電子雪花制冰機(jī):AF-10型, SCOTSMAN, 意大利;臺(tái)式高速離心機(jī):TGL-16G型, 上海醫(yī)用分析儀器廠;電動(dòng)玻璃勻漿機(jī):DY89-Ⅰ型, 寧波新芝儀器研究所;臺(tái)式水浴恒溫振蕩器:SHZ-88型, 江蘇太倉(cāng)市實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠。
1.2 方法
1.2.1 醉酒實(shí)驗(yàn) 上述分組情況:將50只雄性昆明小鼠隨機(jī)分為給藥組和對(duì)照組, 每組25只。以普通飼料適應(yīng)性飼養(yǎng)3~5 d后, 給藥組分別以0.2 ml/10g的提取物灌胃, 對(duì)照組以0.2 ml/10 g的雙蒸餾水灌胃,1次/d, 連續(xù)7 d, 最后1 d灌胃后30~60 min, 兩組均灌以醉酒劑量的乙醇,10 min后觀察其步態(tài)失穩(wěn)情況, 記錄小鼠翻正反射消失及恢復(fù)時(shí)間。
1.2.2 肝組織丙二醛(MDA)含量和血酒精濃度的測(cè)定 在灌酒后5~10 h后處死動(dòng)物, 取血清、肝組織, 分別制成肝勻漿,檢測(cè)肝臟MDA含量, 用頂空氣相色譜法檢測(cè)血酒精濃度。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 動(dòng)物翻正反射消失及恢復(fù)時(shí)間 醉酒實(shí)驗(yàn)中, 與對(duì)照組相比, 服用解酒保肝劑的給藥組的小鼠從飲酒到翻正反射消失時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P<0.01), 翻正反射恢復(fù)時(shí)間明顯縮短(P<0.05), 見(jiàn)表1。
2.2 肝損傷影響(MDA) 與對(duì)照組相比, 給藥組的肝MDA含量有顯著性的降低(P<0.05), 說(shuō)明其對(duì)酒精性肝損傷有保護(hù)作用。見(jiàn)表2。
表1 兩組小鼠醉酒實(shí)驗(yàn)結(jié)果(±s, min)
表1 兩組小鼠醉酒實(shí)驗(yàn)結(jié)果(±s, min)
注:與對(duì)照組相比,aP<0.01,bP<0.05
組別 例數(shù) 翻正反射消失時(shí)間 翻正反射恢復(fù)時(shí)間對(duì)照組 25 38.5±15.6 315.2±144.1給藥組 25 98.4±48.9a 201.4±98.5b
表2 MDA含量結(jié)果(±s, nmol/mg)
表2 MDA含量結(jié)果(±s, nmol/mg)
注:與對(duì)照組相比,aP<0.05
組別 例數(shù) 肝組織MDA含量對(duì)照組 25 3.5±0.6給藥組 25 2.1±0.5a
2.3 血酒精濃度的測(cè)定 與對(duì)照組相比, 給藥組的血酒精含量有顯著的降低(P<0.01), 說(shuō)明其能有效降低酒后血中的酒精含量, 有解酒作用。見(jiàn)表3。
表3 血酒精含量結(jié)果(±s, mg/ml)
表3 血酒精含量結(jié)果(±s, mg/ml)
注:與對(duì)照組相比,aP<0.01
組別 例數(shù) 血酒精含量對(duì)照組 25 3.8±0.7給藥組 25 2.0±0.5a
經(jīng)藥效學(xué)研究, 觀察動(dòng)物醉酒后的翻正反射消失和恢復(fù)時(shí)間的變化說(shuō)明解酒保肝劑具有良好的減緩醉酒和加快醒酒作用;MDA含量的變化說(shuō)明其對(duì)抗肝臟的膜脂質(zhì)過(guò)氧化作用,對(duì)酒精性肝損傷有明顯的保護(hù)作用;血酒精濃度的變化說(shuō)明其能有效降低小鼠血酒精濃度, 從而達(dá)到解酒的作用。
[1]中國(guó)藥典委員會(huì). 中國(guó)藥典(一部).北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010.
[2]王薇. 營(yíng)養(yǎng)保健食品的發(fā)展與管理. 食品科技,1995(1):42-43.
[3]黃永平, 周世文. 解酒保肝口服液對(duì)小鼠酒精中毒的影響. 中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志,2002(11):672-673.
10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.02.163
2014-10-29]
201299 上海市浦東新區(qū)人民醫(yī)院(李璐奕 王建袁芳);武漢大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院(汪暉 熊婕)