適于香菇菌棒生產(chǎn)接種的液體菌種培養(yǎng)基配方篩選

張振宇　王繼磊　呂凱　蘇建昌　韓建東　劉曉　杜興程　朱肖艷　姚強(qiáng)

摘要：選取6種常用的香菇液體菌種培養(yǎng)基，通過對菌絲生物量、菌棒培養(yǎng)狀況和出菇狀況的比較，篩選適合香菇菌棒的最佳液體菌種培養(yǎng)基配方。結(jié)果表明，配方③（玉米粉2%、馬鈴薯淀粉2%、酵母膏0.2%、麩皮1%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.1%）適于香菇菌棒的直接接種，其上接種的香菇菌棒整個生長周期僅為205天。

關(guān)鍵詞：香菇；液體菌種培養(yǎng)基；出菇；生長周期

中圖分類號：S646.1+2文獻(xiàn)標(biāo)識號：A文章編號：1001-4942（2014）12-0051-03

近年來，我國香菇市場增長穩(wěn)定，生產(chǎn)發(fā)展迅速，隨著香菇產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，對香菇生產(chǎn)工藝、 產(chǎn)量及品質(zhì)提出了更高的要求。傳統(tǒng)的香菇制種技術(shù)經(jīng)過較為繁瑣的母種、原種、栽培種三級培育， 最后才能擴(kuò)大到栽培袋的生產(chǎn)。勞動強(qiáng)度大、工藝繁瑣、污染率高、生長周期長、接種操作要求高等都大大制約了香菇的發(fā)展[1]。液體菌種技術(shù)的出現(xiàn)有效解決了以上難題，但由于種種原因，當(dāng)前液體菌種在香菇栽培中的應(yīng)用頗為有限。為此，本研究對香菇液體菌種培養(yǎng)基做了初步篩選，以期為香菇液體菌種的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1供試菌株

七河6號，由山東七河生物科技股份有限公司保藏。

1.2培養(yǎng)基配方

液體培養(yǎng)基配方共設(shè)6組： ①玉米粉2%，豆粉2%，磷酸二氫鉀0.1%，硫酸鎂0.1%[2]；②葡萄糖2%，黃豆粉4%，木屑4%[3]；③玉米粉2%，馬鈴薯淀粉2%，酵母膏0.2%，麩皮1%，磷酸二氫鉀0.1%，硫酸鎂0.1%；④麩皮10%，蔗糖1%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂0.15%；⑤玉米粉2%，蔗糖2%，蛋白胨0.5%；⑥麩皮100%、麥芽糖3%、硫酸鎂0.15%、磷酸二氫鉀0.1%[4]。

栽培培養(yǎng)基配方：木屑79%，麩皮20%，石膏1%，含水量55%～60%。

1.3液體菌種培養(yǎng)方法

將活化的七河6號母種接入斜面培養(yǎng)基，25℃培養(yǎng)13 d，待菌絲長滿斜面后再分別轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基搖瓶內(nèi)，每瓶接種5塊，每塊菌絲0.5 cm2，每個處理（配方） 重復(fù)10瓶。將培養(yǎng)瓶置于180 r/min、25℃的條件下振蕩培養(yǎng)7 d，待瓶內(nèi)產(chǎn)生許多細(xì)小而稠密的菌球時終止培養(yǎng)。

1.4液體菌種中香菇菌絲體生物量的測定[5]

每個處理取6瓶，終止培養(yǎng)后將發(fā)酵成熟的培養(yǎng)液用100目濾網(wǎng)過濾，收集各菌株的菌絲體和濾液。菌絲體用蒸餾水清洗2次，60℃烘干至恒重，用電子天平稱菌絲體干重計算生物量，發(fā)酵液pH 值用pH 計測定。

1.5液體菌種接種香菇菌棒培養(yǎng)特性比較[6]

試驗(yàn)采用的栽培袋規(guī)格為 55 cm×15 cm×0.054 cm，每袋裝干料 0.8 kg，每棒接4穴，每穴注射6 mL液體菌種，以常規(guī)固體接種菌棒作為對照，接種后置20～25℃培養(yǎng)，適當(dāng)通風(fēng)，CO2濃度控制在3 000 mg/L以下，每處理20 袋。培養(yǎng)階段，記錄菌棒的平均滿袋時間和平均成熟時間（以轉(zhuǎn)色面積超過90%為準(zhǔn)）。菌棒成熟后移入菇房脫袋出菇，并對出菇特性進(jìn)行對比。

2結(jié)果與分析

2.1不同培養(yǎng)基中香菇菌絲體生物量和發(fā)酵液pH 值

由表1可見，配方③培養(yǎng)條件下的菌絲體生物量最多，且菌球大小較為均勻，適合作為液體菌種培養(yǎng)基配方使用。而配方④和⑥中的菌絲體生物量較低，均不適于采用。在起始pH值都為6的情況下，發(fā)酵液終止pH值大小與菌絲體重量呈負(fù)相關(guān)，其中配方③終止pH值最低，為3.11，配方⑥終止pH值最高，為4.32。

2.2不同培養(yǎng)基菌種接種香菇菌棒后菌絲生長情況

從表2可以看出，在菌棒不經(jīng)刺孔的情況下，傳統(tǒng)固體接種自然滿袋天數(shù)為55天，成熟需120天，而液體菌種中最快的配方③僅需43天即可滿袋，98天即可成熟，整個培養(yǎng)周期大大縮短。配方⑥平均滿袋天數(shù)和成熟時間最長，可能是由于實(shí)際接種生物量太少，長勢較弱，而且不能迅速長滿。

2.3不同培養(yǎng)基菌種接種香菇菌棒的出菇特征

菌棒成熟轉(zhuǎn)入出菇棚后一般經(jīng)5～7天現(xiàn)蕾，因此試驗(yàn)中頭潮菇現(xiàn)蕾前后順序與成熟時沒有發(fā)生變化，由表3可以看出出菇周期最短的為配方②和③，均為107天，較對照縮短了13天，而且利用這兩種液體菌種接種香菇菌棒的生物轉(zhuǎn)化率也較高，分別達(dá)到98.38%和97.44%，均高于對照的96.56%。由此可以看出，配方②和③較適于作為香菇液體菌種生產(chǎn)培養(yǎng)基；配方③整個發(fā)菌出菇周期為205天，較對照縮短了35天，配方②生長周期為215天，但生物轉(zhuǎn)化率最高。

3討論

本研究獲得了較為理想的接種香菇菌棒的液體菌種配方，基本可以取代傳統(tǒng)的菌種接種方式。但在試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，液體菌種接種的香菇棒出菇時畸形菇稍多，整體品質(zhì)與傳統(tǒng)接種方法有差異，其機(jī)理有待進(jìn)一步研究?？傮w來說，液體菌種接種具有明顯的優(yōu)勢，周期大大縮短，產(chǎn)量甚至超過了傳統(tǒng)接種方法[7]，液體菌種較傳統(tǒng)的固體菌種具有用種量少、發(fā)菌快等優(yōu)點(diǎn)[8]。因此液體菌種應(yīng)用于香菇規(guī)?；a(chǎn)具有很好的前景。目前的液體菌種應(yīng)用得到廣泛認(rèn)可，在韓國 99%的金針菇工廠化生產(chǎn)企業(yè)采用液體菌種生產(chǎn)，大部分杏鮑菇工廠化生產(chǎn)企業(yè)也已采用液體菌種[9]。李賀等[10]認(rèn)為在推進(jìn)食用菌產(chǎn)業(yè)工廠化的進(jìn)程當(dāng)中，液體菌種代替固體菌種并廣泛應(yīng)用已經(jīng)成為必然趨勢，也只有通過大范圍地使用液體菌種，才能實(shí)現(xiàn)我國食用菌產(chǎn)業(yè)從散戶規(guī)模生產(chǎn)到工廠化、 智能化、 標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)的飛躍。

參考文獻(xiàn)：

[1]趙洪新，華秀英，王升厚，等.香菇液體菌種的研究[J]. 中國食用菌， 2003， 22（6）：40-42.

[2]郭樹凡， 張慧麗. 香菇液體菌種發(fā)酵條件的研究[J].中國食用菌，2005，24（1）：38-40.

[3]沈維鐸，姚志偉，楊群. 香菇液體培養(yǎng)的工藝優(yōu)化[J]. 武漢生物工程學(xué)院學(xué)報，2012（2）：86-89.

[4]秦秀麗. 香菇菌種液體培養(yǎng)基的優(yōu)化[J].特產(chǎn)研究，2008，30（4）：49-50.

[5]樂濤，陳鳳曾，姬松山. 六個香菇菌株液體菌種袋料栽培比較試驗(yàn)[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005（10）：81-82.

[6]王利火，沈家驤，杜近義，等.應(yīng)用液體菌種栽培香菇的研究[J].中國食用菌，1985（6）：5-7.

[7]邊銀丙.食用菌工廠化生產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)及其研發(fā)方向[J].食藥用菌， 2013，21（3）：139-43.

[8]閆靜，周祖法，王偉科，等.秀珍菇不同菌株液體菌種比較研究[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報，2007，19（2）：127-129.

[9]張引芳.食用菌工廠化生產(chǎn)中液體菌種的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].菌物學(xué)報，2007，26（增刊）：393-397.

[10]李賀，王相剛，李艷芳，等.食用菌液體菌種生產(chǎn)研究進(jìn)展[J].園藝與種苗，2012（6）：123-125.