血清心型脂肪酸在急性缺血性腦血管病鑒別診斷中的應(yīng)用

論著

血清心型脂肪酸在急性缺血性腦血管病鑒別診斷中的應(yīng)用

朱曉娟張?jiān)露疒w炎李玉蘭張會(huì)娣張國(guó)華

作者單位： 071000河北省保定市第一中心醫(yī)院(朱曉娟、張?jiān)露?、趙炎、李玉蘭、張會(huì)娣)；河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院(張國(guó)華)

E-mail:whxzlxw@163.com

【摘要】目的通過(guò)觀察H-FABP在急性腦梗死患者、短暫性腦缺血發(fā)作(TIA)患者和健康人群血清中血清心型脂肪酸結(jié)合蛋白(heart fatty acid binding protein，H-FABP)含量及區(qū)別表達(dá)，為臨床短暫性腦缺血發(fā)作和急性腦梗死的早期鑒別診斷做指導(dǎo)。方法隨機(jī)選取門診腦血管病住院患者130例，其中急性腦梗死(ACI)組80例，短暫腦缺血(TIA)組30例，正常對(duì)照組20例，所有實(shí)驗(yàn)對(duì)象于發(fā)病3、12及24 h抽取靜脈血，健康組于門診3、12及24 h抽取靜脈血，使用ELISE法檢測(cè)血清中H-FADP的含量。結(jié)果在腦梗死后3 h血漿H-FABP濃度開始升高，急性腦梗死后12 h血漿H-FABP濃度達(dá)高峰，急性腦梗死后24 h血漿H-FABP濃度顯著降低，在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)ACI組與TIA組之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，正常對(duì)照組與ACI比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，正常對(duì)照組與TIA組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。梗死面積越大，其血清H-ABP濃度越高，且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。ACI組H-FABP的敏感性為66.2%(53/80),TIA組H-FABP的敏感性為6.7%,2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論血清H-FABP可能成為早期評(píng)估TIA及急性腦梗死診斷及鑒別診斷的有效血清學(xué)標(biāo)記物。

【關(guān)鍵詞】心型脂肪酸結(jié)合蛋白；急性腦梗死；短暫性腦缺血發(fā)作

doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2015.20.021

通訊作者:張?jiān)露穑?71000河北省保定市第一中心醫(yī)院;

【中圖分類號(hào)】R 743

收稿日期：(2015-04-07)

短暫性腦缺血發(fā)作(transient ischemic attack,TIA)與急性腦梗死是臨床常見的急性缺血性腦血管病變。當(dāng)腦組織缺乏充足的血液灌注,發(fā)生循環(huán)障礙，腦組織出現(xiàn)缺血、缺氧、壞死,血腦屏障被破壞，導(dǎo)致腦細(xì)胞內(nèi)的一些生物化學(xué)因子及小分子蛋白外滲到體液及血液中，從而啟動(dòng)一系列病理生理學(xué)機(jī)制加劇了疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)存在于人體不同的組織和器官中,近年來(lái),人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注和研究心型脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)在急性心肌梗死診斷中的應(yīng)用[1,2]。許多研究發(fā)現(xiàn)在腦組織中H-FABP有一定數(shù)量的表達(dá)。細(xì)胞缺血缺氧損傷后能引起H-FABP的滲漏,使其血清的濃度顯著高于正常。本研究擬通過(guò)采用ELISA法對(duì)缺血性腦血管患者的血清中H-FABP的表達(dá)及含量進(jìn)行檢測(cè)。使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)其在TIA和急性腦梗死患者血清中的濃度進(jìn)行比較，從而在臨床上指導(dǎo)短暫性腦缺血發(fā)作和急性腦梗死的早期診斷。

1資料與方法

1.1一般資料選取2010年12月至2011年11月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院治療及門診就診的急性腦梗死、TIA患者以及健康查體者共130例，其中急性腦梗死為80例，TIA為30例,20例健康人作為正常對(duì)照組。40歲≤年齡<85歲。見表 1。

表1　一般資料

1.2納入標(biāo)準(zhǔn)(1)男性或女性，40歲≤年齡<85歲的急性缺血性腦卒中(發(fā)病≤3 h)及短暫性腦缺血發(fā)作(發(fā)病≤3 h)患者。(2)與1995年第四屆全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的《腦血管病診斷標(biāo)準(zhǔn)》中的腦梗死診斷要點(diǎn)相符合，并且被頭顱CT、MRI檢查證實(shí)為腦梗死。(3)符合美國(guó)心臟學(xué)會(huì)(AHA)/美國(guó)腦卒中協(xié)會(huì)(ASA)2009年在新的指南中，對(duì)TIA的臨床定義。(4)正常對(duì)照組為同期來(lái)我院門診的健康體檢者20例。40歲≤年齡<85歲。

1.3排除標(biāo)準(zhǔn)(1)不符合以上入組標(biāo)準(zhǔn)組。(2)腦栓塞及血液系統(tǒng)、自身免疫性疾病導(dǎo)致的腦梗死患者。(3)重度炎性反應(yīng)性疾病繼發(fā)感染，伴有其他主要器官功能衰竭的患者，接受類固醇激素、免疫抑制劑或其他抗炎癥性藥物治療的患者。(4)所有患者均排除腫瘤、肝臟病變，近期無(wú)重大外傷、手術(shù)史。

1.4方法所有試驗(yàn)對(duì)象均進(jìn)行頭顱CT及血管彩超，或頭MRI、MRA、DWI、血糖、血脂、CRP、心電圖等相關(guān)檢查。

1.4.1標(biāo)本采集與處理：急性腦梗死組、TIA組分別于發(fā)病3、12、24 h采集肘靜脈血5 ml(正常對(duì)照組在門診同樣時(shí)間抽血)，分別留置于EDTA抗凝管中，混合10～20 min，于標(biāo)本采集完成后30 min內(nèi)在2～8℃的條件下離心15 min(2 500 r/min)，離心結(jié)束后抽取上清液，置于Ep管中。

1.4.2檢測(cè)方法:Elecsys2010全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀(Roche公司)，人H-FABP檢測(cè)試劑盒(上海朗頓生物制劑有限公司)，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法，檢測(cè)時(shí)間90 min。具體操作步驟詳見說(shuō)明。

2結(jié)果

2.13組血清中H-FABP濃度比較在腦梗死后3 h血漿H-FABP濃度開始升高，12 h達(dá)高峰，24 h有所降低：急性腦梗死組與TIA組之間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；正常對(duì)照組與急性腦梗死組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而與TIA組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；本結(jié)果所選擇病例均排除了患者再次發(fā)生腦梗死。見表2。

表23組血清中H-FABP濃度比較

組別3h12h24hTIA組(n=30)3.25±1.194.88±1.241.35±0.79正常對(duì)照組(n=20)1.68±0.551.43±0.242.16±1.19急性腦梗死組(n=80)12.60±4.77*#14.47±4.34*#11.14±3.86*#

注：與TIA組比較，*P<0.05；與正常對(duì)照組比較，#P<0.05

2.2不同梗死灶大小、時(shí)間與H-FABP濃度在發(fā)病3 h、12 h、24 h時(shí),梗死面積越大，其血清H-ABP濃度越高，且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)；12 h時(shí)各梗死組血清H-FABP濃度顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。見表3。

表3　不同梗死灶大小、時(shí)間與H-FABP濃度關(guān)系　 ±s

注：與正常對(duì)照組比較，*P<0.01

2.3TIA組與急性腦梗死組發(fā)病12小時(shí)H-FABP敏感性的檢測(cè)以正常對(duì)照組均值的95%可信區(qū)間確定為正常,高于其上限即為增高。H-FABP的濃度上限為2.5296 ng/ml,據(jù)此TIA組H-FABP的敏感性為6.7%，急性腦梗死組H-FABP的敏感性為66.2%(53/80)，2組H-FABP的敏感性比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

3討論

目前，缺血性腦血管病的診斷依賴于病史、體檢、頭顱CT、核磁共振成像。尤其是急性腦梗死治療有明顯的治療時(shí)間窗,故早期診斷(尤指發(fā)病后 6～8 h內(nèi))非常之重要。目前急性腦梗死的診斷主要依據(jù)神經(jīng)系統(tǒng)查體及影像學(xué)檢查,但大多數(shù)患者的影像學(xué)改變出現(xiàn)較晚，甚至于病后10～ 24 h才能顯示病灶。因此，多年來(lái)許多學(xué)者一直致力于尋找高敏感性及強(qiáng)特異性的新型血清生化標(biāo)志物。H-FABP作為可簡(jiǎn)單快速測(cè)定的血清學(xué)指標(biāo)，最初是由Ockner等學(xué)者在研究脂肪酸腸吸收時(shí)發(fā)現(xiàn)的，在體內(nèi)的主要作用是通過(guò)與脂肪酸的結(jié)合，進(jìn)而來(lái)調(diào)節(jié)脂肪酸在細(xì)胞內(nèi)的代謝。H-FABP主要存在于心肌細(xì)胞的胞質(zhì)中，為心肌的收縮來(lái)提供能量[3]。William等[4]研究，H-FABP在腦細(xì)胞受損后2～3 h內(nèi)開始釋放入血,6～8 h 達(dá)高峰,24 h 降為正常。國(guó)外Wunderlich等[5]研究發(fā)現(xiàn)H-FABP的濃度在腦梗死早期也相應(yīng)升高,并指出血漿H-FABP含量在腦缺血的早期評(píng)估,揭示其嚴(yán)重程度等方面具有重要的臨床實(shí)用價(jià)值,可作為急性腦梗死早期診斷生物學(xué)指標(biāo)。在本實(shí)驗(yàn)中，我們對(duì)TIA及腦梗死患者發(fā)病的3、12、24 h 3個(gè)時(shí)間段的血清H-FABP進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)它在發(fā)病后3 h內(nèi)開始釋放入血,12 h達(dá)高峰,24 h 開始下降，與上述研究的實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本一致。因此，我們可以認(rèn)為，H-FABP對(duì)于缺血性腦血管病早期診斷有特異性。

H-FABP在不同程度的腦梗死患者中，其濃度不同，梗死程度越重，其值越高[6]。孫楊等[7]選擇 65例 ACI患者,急性腦梗死組入院24 h、第 7天的血清 H-FABP均明顯高于對(duì)照組 (P<0.01);此時(shí)間點(diǎn)大梗死灶、中梗死灶、小梗死灶3組間的血清 H-FABP差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)。結(jié)果顯示腦梗死病灶大小與血清 H -FABP水平有密切關(guān)系,且與CI程度和預(yù)后有關(guān)。出血早期血清H-ABP水平越低其神經(jīng)功能恢復(fù)越好，臨床預(yù)后越好。本試驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)，在發(fā)病3 h、12 h、24 h時(shí),梗死面積越大，其血清H-ABP濃度越高，在發(fā)病12 h的大梗死灶，其血漿H-FABP濃度為(18.45±4.41)，且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)；且12 h時(shí)各梗死組血清H-FABP濃度顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，與上述研究結(jié)果近似，可能與大面積梗死時(shí)的細(xì)胞損傷數(shù)量有關(guān)，故我們推測(cè)其可以作為腦梗死早期判斷腦損傷面積較為合適的、且價(jià)值的檢測(cè)指標(biāo)。

目前，血清S-100β蛋白用來(lái)作為判斷急梗死神經(jīng)功能缺損程度的有效血清學(xué)指標(biāo)[8]，而Pelsers等[9]在研究微小的腦損傷時(shí)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出H-FABP和B-FABP比目前使用的腦損傷標(biāo)志物S100蛋白B(S100B) 具有更高的敏感性。國(guó)內(nèi)張黎軍等[10]研究對(duì)100例急性腦梗死患者在發(fā)病后1 d、7 d、14 d，進(jìn)行血清B-FABP動(dòng)態(tài)檢測(cè),發(fā)現(xiàn)在病程早期均有不同程度增高,尤以發(fā)病后24 h內(nèi)增高最明顯(P<0.01)，其中早期異常靈敏性達(dá)68%。在本試驗(yàn)中，我們對(duì)80例腦梗死患者血清H-FABP濃度檢測(cè)，其24 h時(shí)的敏感性達(dá)到了66.2%，結(jié)果與之前試驗(yàn)研究近似，微差別可能是由于取樣時(shí)間差異所致。本結(jié)果推測(cè)血漿H-FABP含量在腦缺血的早期評(píng)估,在腦梗死早期診斷中有重要意義，可作為急性腦梗死早期診斷的生物學(xué)指標(biāo)，同時(shí)，還可用來(lái)鑒別診斷腦梗死與TIA。

雖然，在本試驗(yàn)中，我們檢測(cè)到H-FABP是靈敏性較高的缺血測(cè)定指標(biāo)，在腦梗死早期即可測(cè)定，可作為腦梗死的早期診斷，并推測(cè)其可有效改善患者預(yù)后、減少病死率和致殘率，其敏感性、特異性均明顯優(yōu)于影像學(xué)。但由于H-FABP其在人體組織中分布較為廣泛，如當(dāng)腦梗死患者同時(shí)合并心臟疾病時(shí)，其敏感性及特異性均較差，所以，在作為評(píng)價(jià)H-FABP的臨床應(yīng)用價(jià)值時(shí)，我們不僅考慮它的來(lái)源和釋放時(shí)間，還要考慮患者在合并心臟及腎臟等其他疾病時(shí)，綜合考慮患者的一般情況后，對(duì)疾病作出診斷及鑒別診斷。

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