崔鉉 金健 吳承翰

抗生素軟膏控制菌檢驗方法的探討

崔鉉 金健 吳承翰

在進(jìn)行實驗之前首先需要備好試藥、儀器、培養(yǎng)基以及供試品等實驗材料,其后采用離心沉淀法與薄膜過濾法相結(jié)合進(jìn)行實驗檢測,觀察探討抗生素軟膏控制菌檢驗方法。采用離心沉淀法于薄膜過濾法相結(jié)合檢驗抗生素軟膏具有顯著臨床效果,且檢驗方法的操作過程簡單,具有可行性。

抗生素軟膏作為一種用于外涂的抑菌性抗生素,包括了不同批次抗生素眼膏和抗生素軟膏,相關(guān)醫(yī)學(xué)研究早已證實,應(yīng)用抗生素軟膏的主要目的在于抑菌、抗感染治療,同時考慮到抗生素藥物的安全性這一關(guān)鍵因素,抗生素在臨床中得到廣泛應(yīng)用［1］。目前,我國關(guān)于抗生素軟膏的應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)是進(jìn)行微生物檢驗,單由于檢驗過程中受到抑菌成分影響可能出現(xiàn)不成功的幾率,因此,抗生素軟膏微生物檢驗中控制菌檢驗存在一定難度［2］。針對抗生素軟膏控制菌檢驗的方法予以探討分析,現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 儀器：EAS電子計重稱(北京市菲姆斯科技有限開發(fā)公司生產(chǎn)),最大稱重值為200 g,分度值0.1 g,敏感度以及計算的精確度均較高；LD4-2離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠生產(chǎn)),可用容量4ml×100ml,12ml×10ml,最大轉(zhuǎn)速4000 rpm；負(fù)壓濾器(上海浦江醫(yī)療器械廠生產(chǎn))；隔膜真空泵(天津市南開騰達(dá)過濾器件廠生產(chǎn)),孔徑大小為0.45 μm。試藥：選擇司盤-80、吐溫-80,單硬脂酸甘油、十四烷酸異丙酯等。菌種：銅綠假單胞菌［CMCC(B)10104］、金黃色葡萄球菌［CMCC(B)26003］,上述菌種均由中國藥品生物制品檢定。供試品：選擇國家藥監(jiān)局制定制劑；8批紅霉素軟膏、1批四環(huán)素軟膏、1批金霉素眼膏、1批四環(huán)素眼膏、3批紅霉素眼膏以及1批鹽酸金霉素眼膏等。培養(yǎng)基：藥液培養(yǎng)實驗選用膽鹽乳糖、肉湯作為培養(yǎng)基。

1.2 方法 檢驗方法：選擇離心沉淀法聯(lián)合薄膜過濾法。①選擇EAS電子計重稱,分稱出單硬脂酸甘油酯3 g及司盤-80、吐溫-80各5 g,試劑稱好置入燒杯、滅菌30min,滅菌溫度115℃。準(zhǔn)備前先熱溶解試劑,隨后將燒杯置于45℃水浴環(huán)境中。稱取供試品5 g,置入熱溶解燒杯乳化劑中,后加入45℃水浴環(huán)境內(nèi),搖晃,取濃度為0.9%的氯化鈉溶液80ml,溫度45℃,混合后混入氯化鈉制作供試液,比例為1∶20。②預(yù)備離心管,按照1∶10的比例混合供試液,加離心管并將兩種病菌置入,金黃色葡萄球菌［CMCC(B)26003］、銅綠假單胞菌［CMCC(B)10104］,離心5min、3000 r/min,接收離心后采集0.2ml的下層菌液量,并將其融入10ml 0.1%吐溫氯化鈉溶液內(nèi),均勻搖晃后予以再次離心處理,3000 r/min、時間5min,取底層集菌液置于100ml濃度為0.1%吐溫氯化鈉溶液中,均勻搖晃取薄膜過濾器,孔徑0.45 μm。③進(jìn)行濾膜沖洗,利用1000ml 0.1%吐溫氯化鈉溶液進(jìn)行沖洗,隨后將培養(yǎng)基備好后分別取培養(yǎng)液,置于不同的培養(yǎng)基平板表面,設(shè)置溫度為37℃,時間為18～24 h；觀察結(jié)果。

2 結(jié)果

選擇離心沉淀法與薄膜過濾法檢驗抗生素軟膏的方法可取得明顯的效果,其中供試液呈現(xiàn)為均勻的乳白色,可以很好的排除抑菌成分,促使金黃色葡萄球菌及銅綠假單胞菌陽性管內(nèi)清晰可見菌落的生殖狀態(tài)。

3 討論

抗生素軟膏主要包括軟膏及眼膏兩種類型,其屬于一種可用于外涂的抑菌抗生素,臨床醫(yī)學(xué)研究證實,本品可在皮膚感染、眼部發(fā)炎等問題中取得良好效果,不僅具有較強(qiáng)的敏感性而且具有較強(qiáng)的抑菌作用,并可在革蘭陽性球菌中發(fā)揮殺菌作用［3］。本品的藥用機(jī)理,可抑制細(xì)菌中異亮氨酸TRNA合成酶,組織蛋白質(zhì)與敏感菌RNA無法結(jié)合,以發(fā)揮抑菌再生作用,盡管安全高、毒害性小但仍可發(fā)生不良事件?？股剀浉嘀兄饕l(fā)揮污染作用控制菌為銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌,上述兩種控制菌的生存環(huán)境較常見,如皮膚、土壤、空氣、水等,其中銅綠假單胞菌生存于潮濕環(huán)境,故為確?？股剀浉嗟陌踩允褂眯枰?重視檢驗銅綠假單胞菌以及金黃色葡萄球菌。

常規(guī)檢驗中由于抗生素軟膏自身抑菌的成分對控制菌檢驗效果造成影響,即不成功檢驗幾率具有一定存在率,因此本研究結(jié)合離心沉淀法與薄膜過濾法兩種檢驗方式,檢驗結(jié)果證實,采用上述方法進(jìn)行檢驗可對金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌陽性管內(nèi)菌落生殖狀態(tài)予以明確地觀察,并在一定程度上有效排出抑菌成分。上述研究結(jié)果顯示,結(jié)合離心沉淀法、薄膜過濾法檢驗效果具有一定的可行性。離心沉淀法主要是利用離心機(jī)的離心作用可通過高速旋轉(zhuǎn)作用下離心供試品以及乳化劑,借助于吐溫氯化鈉溶液分離抑菌成分,并將其置于上層懸浮、污染物置于下層沉淀液。隨后再選擇薄膜過濾法過濾,選擇吐溫氯化鈉溶液徹底清洗濾膜,隨后將離心液放置在濾膜中予以過濾可達(dá)到有效排出抑菌成分的目的［4,5］。

綜上所述,采用離心沉淀法于薄膜過濾法相結(jié)合檢驗抗生素軟膏具有顯著地臨床效果,且上述檢驗方法的操作過程簡單,具有可行性。

［1］梁曉霞,李錚錚,趙延云,等.軟膏劑中藥物加入方法分析.山西醫(yī)藥雜志(下半月刊),2011,14(11):182-183.

［2］華玉鈴,賀祝英,張建玲,等.中藥軟膏劑制備方法的研究進(jìn)展.貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2008,30(2):66-69.

［3］何群,唐松云,賀文君,等.軟膏劑用于肛門術(shù)后止痛的研究進(jìn)展.中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育,2011,4(20):53-54.

［4］黃彬.抗生素軟膏控制菌檢驗方法的探討.世界臨床醫(yī)學(xué),2015,9(11):129-130.

［5］宋福嶺.黃酮類化合物和抗生素類藥物的高效液相色譜檢測技術(shù)研究.黑龍江科技信息,2013,15(7):621-623.

】 抗生素軟膏；細(xì)菌檢驗；方法；探討

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.10.219

2016-03-07］

133000 延邊州食品藥品檢驗所

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