李智德，侯寶華

1.汕頭大學醫(yī)學院，廣東 汕頭 515000； 2.廣東省人民醫(yī)院(廣東省醫(yī)學科學院)普通外科

循環(huán)microRNA在胰腺疾病中作為分子標記物的研究進展

李智德1,2，侯寶華2

1.汕頭大學醫(yī)學院，廣東 汕頭 515000； 2.廣東省人民醫(yī)院(廣東省醫(yī)學科學院)普通外科

循環(huán)microRNA(miRNA)是近年來繼組織miRNA之后在血清中發(fā)現(xiàn)的非編碼小分子RNA，可以穩(wěn)定存在于血清中。研究表明在胰腺疾病中循環(huán)miRNA可出現(xiàn)表達異常，這些異常表達的循環(huán)miRNAs可能成為胰腺疾病診治和評估預后的分子標志物。循環(huán)miRNA有望成為胰腺疾病基因治療的新靶點，本文就循環(huán)miRNA在胰腺疾病中的研究進展作一概述。

胰腺疾?。谎h(huán)microRNA；標志物

胰腺疾病常見的有胰腺炎、胰腺腫瘤、胰腺損傷等，其中胰腺腫瘤在普外科中診治較為困難，在胰腺腫瘤中，良性腫瘤的預后較好，惡性腫瘤的預后較差，尤其是胰腺癌，被稱為“癌中之王”。傳統(tǒng)的淀粉酶、彩超、CT、MRI、PET等檢查對于常見胰腺疾病的診斷具有一定的局限性。隨著分子生物學的發(fā)展，胰腺疾病的基因診治逐漸成為熱點，繼組織microRNA(miRNA)成為胰腺疾病的標志物之后，近年來發(fā)現(xiàn)許多循環(huán)miRNA在胰腺疾病診治中發(fā)揮著越來越多的作用。

1 循環(huán)miRNA

循環(huán)miRNA大量存在于血液中，相關報道[1]證明循環(huán)miRNA在血液等體液中具有良好的穩(wěn)定性。而有報道[2]進一步證實，之所以循環(huán)miRNA具有穩(wěn)定性，是因為其耐受核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)降解，并對其機制提出了假設。血漿和血清的循環(huán)miRNA檢測結果具有一致性，說明從血漿和血清中的循環(huán)miRNA都可應用于臨床檢測[3]。目前研究[4]證實，循環(huán)miRNA可能成為胰腺癌新的腫瘤標志物，可能成為預測胰腺炎、胰腺癌、胰腺損傷、糖尿病等胰腺相關疾病預后的指標，具有一定的特異性和敏感性。

2 循環(huán)miRNA與胰腺腫瘤

2.1 循環(huán)miRNA與胰腺癌 胰腺惡性腫瘤中最常見的為胰腺癌，胰腺癌的早期診斷率低，多數(shù)發(fā)現(xiàn)時已為中晚期，急需早期診斷。有報道[5]證實，循環(huán)miR-155在胰腺導管腺癌患者血清中表達相比正常人明顯上升，作者對比了70例胰腺導管腺癌患者與40名健康人血清標本中miR-155的表達情況，結果提示，miR-155在胰腺導管腺癌患者血清的表達量是健康人的2.14倍；同時在荷瘤小鼠及細胞株的血清中再次證明其表達的差異性。同樣，相關報道[6]也證實了這一論點，同時提到，除了循環(huán)miR-155外，循環(huán)miR-21、miR-210在胰腺癌患者及胰腺癌小鼠模型中高表達，另外證實循環(huán)miR-18a、miR-203、miR-30b-5p、miR-31、miR-369-5p、miR-376a、miR-541在胰腺癌小鼠模型中高表達，而循環(huán)miR-375在胰腺癌小鼠模型中低表達，其中循環(huán)miR-203、miRNA-369-5p、miRNA-376a、miRNA-375是首次報道。這些腫瘤標志物還需進一步在胰腺癌患者那里得到驗證。

循環(huán)miRNA可能成為腫瘤檢測的標志物、預后的預測指標。Ali等[7]證實了循環(huán)miR-21在胰腺癌患者中高表達，同時證明循環(huán)miR-21與患者生存期相關，高表達患者生存期短。有學者[8]從20個已知的人類循環(huán)miRNA中篩選出3個潛在的胰腺癌腫瘤標志物，分別是miR-642b、miR-885-5p、miRNA-22，它們的敏感性和特異性均為91%，對比CA199具有更高的敏感性，但特異性較CA199低。Morimura等[9]證實miR-18a在胰腺癌患者腫瘤組織中和血清中的表達分別高于正常胰腺組織和正常人血清，進一步對比循環(huán)miR-18a在胰腺癌患者術前和術后的表達，術后明顯低于術前，最終證明循環(huán)miR-18a有成為胰腺癌腫瘤標志物的潛能。循環(huán)miR-221同樣在胰腺癌患者血清中高表達，在術后明顯低于術前，而循環(huán)miR-375在胰腺癌患者血清中低表達[10]。作者進一步論證miR-221/miR-375的意義，miR-221/miR-375在胰腺癌患者中的比值明顯高于正常人。循環(huán)miR-221有望成為實用的腫瘤標志物，不僅可以預測敏感人群，同時可以預測患者術后預后情況。循環(huán)miR-155[11]對胰腺癌診斷和預后評估有重要價值，可視為個體化治療的重要依據(jù)，以提高胰腺癌的救治水平。研究[12-13]表明，循環(huán)miRNA給胰腺癌的診療帶來新的希望。不同的循環(huán)miRNA的比值可能成為新的腫瘤預測指標，可能具有更好的特異性和敏感性。

2.2 循環(huán)miRNA與胰腺其他腫瘤 循環(huán)miRNA可以鑒別胰腺導管內(nèi)乳頭狀黏液瘤(intraductal papillary mucinous neoplasm，IPMN)患者，可能成為IPMN的診斷腫瘤標志物。有報道[14]稱，循環(huán)miR-21在IPMN患者血清中的表達高于正常人，但與胰腺癌患者血清對比無明顯差異，證明循環(huán)miR-21可以鑒別IPMN患者與正常人，但還需要其他腫瘤指標進一步鑒別IPMN與其他胰腺腫瘤。循環(huán)miR-1290[15]在IPMN患者中的血清表達高于正常人，低于侵襲性胰腺腫瘤患者血清中的表達。中-重度不典型增生的IPMN患者血清miR-1290的表達高于輕度不典型增生的IPMN患者。有研究[16]表明，循環(huán)miR-223在良性IPMN和惡性IPMN之間存在差異，在IPMN與胰腺癌之間也存在差異，同時可能是預測惡性IPMN和胰腺癌的指標。循環(huán)miRNA可能在IPMN診治、鑒別診斷中起到越來越重要的作用。未來隨著研究的深入，循環(huán)miRNA可能為IPMN的診治及分級提供新的思路。

循環(huán)miRNA在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤(pancreatic neuroendocrine tumors，PNETs)的診治中起重要作用。國外學者[17]通過對比27例PNETs患者與15名志愿者的循環(huán)miRNA，其中13種循環(huán)miRNA在PNETs患者血清中高于志愿者，尤其是循環(huán)miR-193b，可能成為PNETs新的潛在的腫瘤標志物。另有研究[18]表明，循環(huán)miR-27b可以成為預測PNETs患者預后的腫瘤指標。循環(huán)miR-1290[15]在PNETs患者和胰腺癌患者之間存在差異，可用來鑒別二者?？傊?，循環(huán)miRNA有望在PNETs的診治和預后評估中起到重要作用。

循環(huán)miRNA在其他胰腺腫瘤中也起著鑒別診斷與評估預后等作用[19]，循環(huán)miRNA在部分胰腺腫瘤的作用研究仍處于空白，還需要進一步研究，但可以預言，循環(huán)miRNA在胰腺腫瘤診治的整個過程中將處于重要位置。

3 循環(huán)miRNA與非腫瘤胰腺疾病

3.1 循環(huán)miRNA與胰腺炎 Kong等[20]在小鼠胰腺損傷導致的胰腺炎模型上證實，循環(huán)miR-216a可能作為預測胰腺損傷的特異性指標。有學者[21]進一步證實這個結論，同樣在小鼠因外傷導致的胰腺炎模型，說明循環(huán)miR-216a和miR-216b可作為潛在的預測胰腺損傷引起胰腺炎的標志物。秦濤等[22]在大鼠急性胰腺炎模型上發(fā)現(xiàn)某些miRNA可能參與了胰腺炎腺泡凋亡過程的調(diào)節(jié)。作者在急性胰腺炎中篩選出凋亡相關的miRNA，上調(diào)的miRNA有5條，下調(diào)的miRNA有3條，為鑒定凋亡相關性miRNA建立了實驗基礎。張高峰等[23]進一步證實循環(huán)miRNA在胰腺炎患者診治中的作用。作者對比了胰腺炎患者和正常人的循環(huán)miR-146a、miR-10b、miR-21、miR-26a，證實miR-10b與miR-146a可能成為判斷急性重癥胰腺炎嚴重程度的預測指標；miR-10b可能成為急性胰腺炎是否行PCD干預的判定指標。另有報道[13]通過循環(huán)miRNA區(qū)別慢性胰腺炎患者與健康人、胰腺癌患者。循環(huán)miRNA可能成為胰腺炎檢測及預測預后的標志物和進一步判斷是否進行干預的判定指標。

3.2 循環(huán)miRNA與糖尿病 糖尿病屬于內(nèi)分泌疾病，主要與胰腺調(diào)控血糖的內(nèi)分泌功能受損有關。相關研究[24]表明，循環(huán)miR-152、miR-181a等12個miRNAs在1型糖尿病患兒和對照組比較時有差異，呈高表達。循環(huán)miR-21、miR-210[25]在1型糖尿病患者血清中明顯高于對照組，可能成為預示新發(fā)1型糖尿病的指標。同樣有研究[26]證實循環(huán)miR-126a可能成為2型糖尿病診斷和治療的生物標志物。Zhao等[27]證明，循環(huán)miR-29a、miR-132、miR-222在妊娠期糖尿病患者血清中高表達，且與對照組差異有統(tǒng)計學意義，這3種循環(huán)miRNAs有望在未來妊娠期糖尿病的診斷中起作用。循環(huán)miR-25、miR-27a等12種循環(huán)miRNAs與糖尿病腎病有關，且其中一些循環(huán)miRNAs與腎臟微血管的損傷有關[28]。另外，對于新發(fā)的糖尿病患者，要注意排除胰腺癌的可能性，國內(nèi)已有學者[29]研究循環(huán)miRNA對于這種特殊類型的糖尿病也具有一定的診治和預測預后的意義。大量研究[30-31]證實了循環(huán)miRNA在糖尿病診治中的價值。綜上所述，循環(huán)miRNA在1型、2型、妊娠期糖尿病、糖尿病腎病及胰腺癌導致的糖尿病的診斷、治療等方面起到一定作用。

3.3 循環(huán)miRNA與其他胰腺疾病 目前暫無循環(huán)miRNA與胰腺假性囊腫、胰腺囊腫等其他疾病的研究，未來可能隨著循環(huán)miRNA研究的深入，發(fā)現(xiàn)循環(huán)miRNA可能在其他胰腺疾病診治中發(fā)揮作用。

4 展望

隨著循環(huán)miRNA研究的深入及在檢測方面新技術和新科技的發(fā)展，循環(huán)miRNA可能成為胰腺疾病快速篩查及檢驗的新檢測物。循環(huán)miRNA與胰腺疾病的發(fā)生、進展、治療、預后等存在緊密聯(lián)系，但仍有部分作用機制不明確，同時在臨床中運用還需進一步研究。循環(huán)miRNA作為胰腺疾病檢測的潛在標志物，具有微創(chuàng)、易獲得等優(yōu)點，其在胰腺相關疾病診治過程中具有重要作用。相信隨著新生物技術的研究浪潮，循環(huán)miRNA仍是研究的熱點之一，并在胰腺疾病，尤其是胰腺癌診治中發(fā)揮越來越大的作用。總之，循環(huán)miRNA將成為胰腺疾病的診斷、生物治療、疾病預后等方面的突破口、創(chuàng)新點、新手段，有重大意義。

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(責任編輯：馬 軍)

Advances in circulating microRNA as biomarkers in pancreatic disease

LI Zhide1,2, HOU Baohua2

1.Shantou University Medical College, Shantou 515000; 2.Department of General Surgery, People’s Hospital of Guangdong Province (Academy of Medical Science of Guangdong Province), China

In recent years, circulating microRNA(miRNA), another small non-coding RNAs discovered after tissue-specific miRNA, were found in blood plasma with stable existence. Studies have shown that circulating miRNAs will express abnormally in pancreatic disease. The detected aberrantly expressing miRNAs may be used as biomarkers of pancreatic disease in diagnosis, treatment and assessment of prognosis. Circulating miRNAs were expected to become a new target of gene therapy for pancreatic disease. We present a comprehensive review of recent advances of circulating miRNAs as biomarkers in pancreatic disease.

Pancreatic disease; Circulating microRNA; Biomarkers

李智德，碩士，研究方向：肝膽胰腫瘤、肝膽外科。E-mail：lizhide6276659@126.com

侯寶華，博士，碩士生導師，主任醫(yī)師，研究方向：肝膽胰腫瘤的外科綜合治療及胰腺術后早期復發(fā)相關性基因的研究。E-mail：hbh1000@126.com

10.3969/j.issn.1006-5709.2016.05.028

R737.9

A

1006-5709(2016)05-0594-03

2015-07-12