探討熒光光譜法在藥物分析中的應(yīng)用

彭婧超

（湖南省醫(yī)藥技工學(xué)校 湖南長沙 410208）

探討熒光光譜法在藥物分析中的應(yīng)用

彭婧超

（湖南省醫(yī)藥技工學(xué)校 湖南長沙 410208）

熒光光譜法是目前我國藥物分析的主要方法，在我國各科研機(jī)構(gòu)的應(yīng)用廣泛，具有一定的優(yōu)勢。熒光光譜法能夠從分子之間的相互作用中分析藥物的分子的相互作用，在藥物分析中具有非常廣闊的發(fā)展前景。熒光光譜法的主要原理，是根據(jù)不同物質(zhì)在光照下的不同反射顏色和強(qiáng)度為主，根據(jù)反射光分析物質(zhì)的原理。本文主要對熒光光譜的傳統(tǒng)分析方法、新型分析方法以及與其他方法之間的聯(lián)用三個(gè)部分進(jìn)行分析，總結(jié)熒光光譜法在藥物分析中的應(yīng)用，并做發(fā)展展望。

熒光光譜法 技術(shù)分析 未來展望

不同的物質(zhì)具有不同的光線反射特質(zhì)，其反射的顏色和強(qiáng)度都有所不同，而如果物質(zhì)受到紫外光的照射，也會(huì)發(fā)出不同強(qiáng)度和顏色的熒光，熒光光譜法由此產(chǎn)生，并在藥物分析、食品檢驗(yàn)等領(lǐng)域得到了充分的利用與發(fā)展。熒光光譜法的主要功能，是在不同的熒光反射下對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量，具有非常高的靈敏度，在臨床藥物研究與分析中能力突出。特別是對微量的藥物和痕量的藥物檢測時(shí)，能夠靈敏準(zhǔn)確的得到藥物的檢測結(jié)果，具有非常大的優(yōu)勢，熒光光譜法經(jīng)過長時(shí)間的實(shí)際應(yīng)用，已經(jīng)發(fā)展和創(chuàng)新了許多新的方法，具有十分成熟的檢驗(yàn)體系，與其他檢驗(yàn)方法也有一定的聯(lián)用。

1 常見的熒光光譜法

1.1 直接熒光法

許多藥物自身具有熒光成分，能夠直接通過熒光光譜法進(jìn)行分析和測定，例如在檢測木香花中的總黃酮含量時(shí)，就可以直接應(yīng)用激發(fā)波長為430nm、發(fā)射波長為497nm的紫外光進(jìn)行分析，直接熒光法能夠快速、方便的檢測例如總黃酮的含量和性質(zhì)，對植物以及植物制劑中的物質(zhì)定量十分方便。而一些物質(zhì)則可以借助溶液為對照品進(jìn)行直接熒光法的使用，例如在進(jìn)行中藥巴戟天中蒽醌含量的測定時(shí)，就需要以丙酮為溶劑，激發(fā)波長為425nm、發(fā)射波長為513nm進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果與總黃銅含量相同，具有非常便捷、迅速的特點(diǎn)。

1.2 熒光衍生物法

熒光衍生法主要適用于不具有熒光或熒光非常微弱的物質(zhì)，這種物質(zhì)能夠借助試劑生成具有熒光的衍生物，衍生物的熒光屬于特異性熒光。此類物質(zhì)在臨床上的應(yīng)用較多，如氨基糖苷類藥物，就屬于此類。氨基糖苷類藥物主要有慶大霉素、小諾霉素、阿米卡星、卡那霉素等。在氨基糖苷類藥物的檢測過程中，能夠利用2-巰基乙醇存在下，使用氨基與鄰苯二甲醛發(fā)生反應(yīng)，生成具有強(qiáng)熒光性物質(zhì)的原理，以此方法進(jìn)行水溶液中氨基糖苷類藥物的方法，熒光衍生物法與其他測量方法相比，具有重現(xiàn)性好、選擇性高、靈敏度高的優(yōu)勢，為熒光光譜法的提供了更廣闊的應(yīng)用范圍。

1.3 化學(xué)引導(dǎo)熒光法

化學(xué)引導(dǎo)熒光法的主要原理，是利用化學(xué)方法，將一些自身無法產(chǎn)生熒光的化合物變?yōu)榫哂袩晒獾幕衔铮摲椒ㄖ饕譃檠趸€原、水解、縮合反應(yīng)、配合反應(yīng)等。例如在維生素K3的檢驗(yàn)中，維生素K3能夠在酸性條件下，通過三氯化鈦還原成有熒光的甲萘酚?；瘜W(xué)引導(dǎo)法進(jìn)一步的提高了熒光光譜法的適用范圍，使不具有熒光的物質(zhì)也能通過熒光光譜法迅速的鑒別和定性定量。

2 新型熒光分析法

2.1 導(dǎo)數(shù)熒光分析法

導(dǎo)數(shù)熒光分析法的主要原理，是通過熒光的強(qiáng)度對波長的導(dǎo)數(shù)為縱坐標(biāo)進(jìn)行發(fā)射光譜的記錄。當(dāng)波長導(dǎo)數(shù)為dF/dλ時(shí)，所使用的方法為一階導(dǎo)數(shù)熒光光譜法，而波長導(dǎo)數(shù)為d2F/d2λ時(shí)，則稱為二階導(dǎo)數(shù)熒光光譜法。通過這種方法能夠獲得其他高階導(dǎo)數(shù)熒光光譜結(jié)果，這種利用導(dǎo)數(shù)熒光的分析法，就成為導(dǎo)數(shù)熒光分析法。導(dǎo)數(shù)熒光分析法具有強(qiáng)力的抗干擾能力，在多混合物無法分離或直接測定的物質(zhì)分析當(dāng)中應(yīng)用效果顯著，在已有藥物中的維生素B、氧氟沙星對映體、環(huán)丙沙星等藥物的測量中廣泛應(yīng)用。

2.2 同步熒光分析法

同步熒光法的主要適用范圍，在化合物的激發(fā)波長與發(fā)射波長差距較大時(shí)使用，同步熒光法能夠有效的降低散射峰的干擾。在測量時(shí)同時(shí)進(jìn)行激發(fā)和發(fā)射光譜的掃描并做微分處理，從而得到較為準(zhǔn)確的測量結(jié)果，在臨床上，同步熒光法往往與倒數(shù)熒光法聯(lián)用，取得較高的臨床應(yīng)用效果。例如在檢驗(yàn)?zāi)驑又泻哿孔笱醴承且约奥迕郎承鞘?，能夠取得非常精?zhǔn)的效果。

3 與其他藥物分析技術(shù)的聯(lián)用

熒光聯(lián)用技術(shù)是指，在所有熒光光譜分析法當(dāng)中進(jìn)行不同熒光分析法的聯(lián)用，聯(lián)用技術(shù)能夠有效的提升分析的效率與效果。在臨床上應(yīng)用較為廣泛的聯(lián)用技術(shù)有色譜-熒光檢測技術(shù)和流動(dòng)注射-熒光檢測技術(shù)。多種技術(shù)聯(lián)用，能夠使藥物分析的方法更加自動(dòng)化、智能化。也成為藥物分析的發(fā)展方向。

3.1 薄層色譜-熒光聯(lián)用

薄層色譜法是指，在實(shí)驗(yàn)品中對已經(jīng)分離出的被測部分進(jìn)行再次的熒光分析，提高熒光分析的準(zhǔn)去程度，該方法適用于微量分析，在臨床上主要應(yīng)用于黃連或香連丸中鹽酸小檗堿的含量測定，效果十分明顯。

3.2 凝膠色譜-熒光聯(lián)用

凝膠色譜-熒光法是指，在試驗(yàn)品中已經(jīng)分離出的被測部分進(jìn)行再次的分析，臨床上對膠體態(tài)鋁和溶解態(tài)鋁的分離效果與研究效果顯著，通過使用8-羥基喹啉和鉻藍(lán)黑R等兩種不同的衍生試劑進(jìn)行分析，能夠從飲用水中分析單核鋁、無機(jī)單核鋁的含量，而結(jié)合硝酸消解，則可以測定飲用水中的總鋁和溶膠態(tài)鋁和膠體態(tài)鋁。

3.3 高效液相色譜-熒光聯(lián)用

高校液相色譜法操作方法和流程較為簡單，不需要衍生化和光照，在分離時(shí)能夠強(qiáng)力的分離雜志，對結(jié)果的干擾小，在復(fù)合維生素的檢測中優(yōu)勢明顯，復(fù)合維生素保健品當(dāng)中核黃素含量的HPLC-熒光檢測法就是其中一種，高效液相色譜法的線性比較好，選擇性較高，且實(shí)驗(yàn)精密度高、時(shí)間短，準(zhǔn)確率高，在臨床上受到藥物分析工作人員的一致喜愛，臨床上還用該方法進(jìn)行人血漿中坎地沙坦的檢測。

4 結(jié)語

醫(yī)學(xué)的發(fā)展離不開藥學(xué)科學(xué)的發(fā)展，藥物的成分、使用效果以及不良反應(yīng)等都越來越受到臨床以及患者的關(guān)注，根據(jù)藥物的反射原理與特質(zhì)，熒光光譜法應(yīng)用而生，熒光光譜法是檢測方法便捷、精準(zhǔn)度高、操作簡單的檢驗(yàn)方法，在臨床上的應(yīng)用廣泛，隨著熒光光譜法與計(jì)算機(jī)技術(shù)的結(jié)合，未來熒光光譜法的發(fā)展前景廣闊能夠得到更多的發(fā)展空間，與更多的檢測方法聯(lián)用，為藥學(xué)檢驗(yàn)做出貢獻(xiàn)。

［1］ 潘祖亭，關(guān)洪亮，原華平，李微，陳果.熒光光譜法在藥物分析中的應(yīng)用［J］.吉首大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2005（03）：27-34.

［2］ 陳智嫻.同步熒光分析法在藥物分析中的應(yīng)用研究［J］.海峽藥學(xué)，2011（09）：53-56.

TQ460.7

A

1674-2060（2016）02-0204-01