凍融胚胎移植妊娠結(jié)局的影響因素分析

王偉周，魏德莉，沈玉良，吳迪，王藹明

(中國人民解放軍海軍總醫(yī)院，北京　100048)

凍融胚胎移植妊娠結(jié)局的影響因素分析

王偉周#，魏德莉#，沈玉良，吳迪，王藹明*

(中國人民解放軍海軍總醫(yī)院，北京100048)

【摘要】目的探討患者年齡、子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案、移植胚胎數(shù)、胚胎的發(fā)育潛能和胚胎完整性對(duì)凍融胚胎移植(FET)妊娠結(jié)局的影響。方法選擇2012 年2 月至2014 年12月在海軍總醫(yī)院生殖中心接受FET治療的1 346 例患者，1 346個(gè)FET周期。按年齡<30歲、30～<35歲、35～<40歲、≥40歲分為A、B、C、D四組；根據(jù)移植前不同子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案分為：自然周期(N組)、人工周期(H組)和促排周期(S組)；根據(jù)移植胚胎數(shù)2、3枚分為E、F兩組；根據(jù)解凍胚胎繼續(xù)培養(yǎng)后卵裂球是否分裂生長，每個(gè) FET 周期所移植胚胎中進(jìn)一步卵裂的胚胎個(gè)數(shù)n，并據(jù)此分為 I(n=0)，II(n=1)，III(n=2或3)三組；根據(jù)復(fù)蘇后移植胚胎卵裂球的完整性分為兩組：完整組和受損組。分別比較各組的妊娠結(jié)局。結(jié)果年齡方面，A組、B組、C組的妊娠率和著床率均高于D組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；自然周期、人工周期及促排周期3種子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案，妊娠率和種植率三組間兩兩比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；移植2枚或3枚胚胎，對(duì)妊娠結(jié)局(妊娠率45.56% vs. 45.02%)影響不大(P >0.05)，但兩組著床率(26.07% vs. 17.40%)有顯著性差異(P<0.05)；胚胎解凍后繼續(xù)培養(yǎng)，隨著進(jìn)一步卵裂胚胎數(shù)目的增加，妊娠率(分別為25.27%、39.29%、52.37%)和著床率(分別為10.74%、19.79%、29.16%)均有逐漸升高的趨勢，且三組的妊娠率和著床率兩兩比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；胚胎完整組的妊娠率略高于胚胎受損組(45.08% vs.40.15%)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P >0.05)，而相比較，胚胎完整組著床率顯著高于胚胎受損組(24.65% vs. 18.85%，P<0.05)。結(jié)論移植前不同的子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案對(duì)妊娠結(jié)局無顯著影響；移植2枚或3枚胚胎對(duì)妊娠結(jié)局影響不大；年齡和卵裂球的完整性是影響FET成功的重要因素；凍融胚胎提前解凍并培養(yǎng)后，選擇進(jìn)一步卵裂的胚胎進(jìn)行移植有助于提高妊娠率和著床率。

【關(guān)鍵詞】凍融胚胎移植；年齡；卵裂球生長；妊娠率；著床率

Methods： A total of 1 346 cases of FET cycles were divided into series of groups based on different factors：Factor 1：age (≤29，30-34，35-39 and ≥40 years groups，i.e. group A，B，C，D)；Factor 2：endometrial preparation protocols [natural cycle (group N)，artificial cycle (group H) and super ovulation cycle (group S)]；Factor 3：transferred embryos number (2，3，i.e. group E，F(xiàn))；Factor 4：number of merogenic embryos (0，1，≥2，i.e. group I，II，III)；Factor 5：integrity of the blastomeres of transfer embryo after thawed，intact group (all the transferred embryos with fully intact blastomeres) and damaged group (the transferred embryos with less than 50% damaged blastomeres).

Results： In the age groups，the average pregnancy rate (APR) and implantation rate (IR) of group A，B and C were all significant higher than those of group D (P<0.01). There were no significant differences in APR and IR among natural cycle (group N)，hormonally manipulated artificial programmed cycle (group H) and hormonally manipulate stimulated cycle (group S)(P>0.05). There was no difference in pregnancy (45.56% vs. 45.02%)when two embryos or three embryos were transferred，however，implantation rate of group E was significantly higher than group F(26.07% vs. 17.40%)(P<0.05). Our results also indicated that the blastomere growth was a significant factor on success of transfer. The more the number of merogenic embryos was，the higher pregnancy rate(25.27%，39.29% and 52.37%，respectively) and implantation rate (10.74%，19.79% and 29.16%，respectively)were. The significant differences were found among group I，II and II(P<0.01). Furthermore，the damage embryos group had a slight lower pregnancy rate(40.15% vs. 45.08%，P>0.05)and a significantly lower implantation rate(18.85% vs. 24.65%，P<0.05)compared with the intact embryos group.

Conclusions： The transplantation endometrial preparation protocols have no significant effect on the success of frozen-thawed embryos. The numbers of transferred embryos have little effect on the outcome of pregnancy. Age and blastomere integrity are significant influencing factors on pregnancy outcome in FET cycles. Selection of the cryopreserved embryos with further cleavage after frozen-thawed increases pregnancy rate and implantation rate.

(JReprodMed2016，25(6)：517-521)

凍融胚胎移植(FET)技術(shù)目前已成為IVF-ET的常規(guī)治療方案，該技術(shù)可以減少卵巢過度刺激綜合征(OHSS)，降低多胎妊娠率、促排卵次數(shù)及患者費(fèi)用，提高IVF的累積妊娠率[1]。自1983年世界上首例凍融胚胎成功妊娠報(bào)道以來[2]，F(xiàn)ET技術(shù)已廣泛應(yīng)用于臨床。然而，從目前發(fā)表的文章中發(fā)現(xiàn)，與新鮮周期胚胎移植相比，F(xiàn)ET的臨床妊娠率偏低。因此，有必要對(duì)FET的影響因素作進(jìn)一步研究，以提高FET的臨床妊娠率。本研究回顧性分析海軍總醫(yī)院生殖中心1 346例FET患者的臨床資料，探討患者年齡、子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案、移植胚胎數(shù)、胚胎的發(fā)育潛能和胚胎完整性對(duì)FET妊娠結(jié)局的影響。

資料與方法

一、臨床資料及分組

選擇2012 年2 月至2014 年12月在海軍總醫(yī)院生殖中心接受FET治療的1 346 例患者，年齡21～45 歲。新鮮周期胚胎，經(jīng)患者夫婦同意將其予以凍存。根據(jù)形態(tài)學(xué)參數(shù)，卵裂期胚胎分為以下四級(jí)：Ⅰ級(jí)：卵裂球≥8個(gè)，卵裂球均勻、細(xì)胞質(zhì)均一、無空泡，碎片≤5%；Ⅱ級(jí)：卵裂球≥6個(gè)，卵裂球均勻或略不均勻，細(xì)胞質(zhì)均一、無空泡，碎片占5%～15%；Ⅲ級(jí)：卵裂球≥6個(gè)，同時(shí)卵裂球明顯不均勻，細(xì)胞質(zhì)中有少量空泡，碎片15%～30%；Ⅳ級(jí)：卵裂球≤6個(gè)，卵裂球明顯不均勻、細(xì)胞質(zhì)不均一、或有大量空泡，碎片占30%～50%。其中Ⅰ級(jí)和Ⅱ級(jí)為優(yōu)質(zhì)胚胎；Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)為可移植/可凍融胚胎。

分組：患者按年齡分為A(<30歲)、B(30～<35歲)、C(35～<40歲)、D(≥40歲)四組；根據(jù)FET內(nèi)膜準(zhǔn)備方案分為：自然周期(N組)、人工周期(H組)和促排周期(S組)；根據(jù)移植胚胎數(shù)目分為 E(2枚)、F(3枚)兩組；根據(jù)解凍胚胎繼續(xù)培養(yǎng)后卵裂球是否分裂生長，每個(gè) FET 周期所移植胚胎中進(jìn)一步卵裂的胚胎個(gè)數(shù)(n)，分為 I(n=0)、II(n=1)、III(n=2或3)三組；根據(jù)FET胚胎卵裂球的完整性分為：完整組(FET胚胎卵裂球均完整，無損傷)和受損組(FET卵裂球部分損傷，損傷率<50%)。

二、研究方法

1.FET內(nèi)膜準(zhǔn)備方案：(1)自然周期：月經(jīng)規(guī)律且排卵正?；颊?，陰道超聲監(jiān)測卵泡生長及子宮內(nèi)膜厚度，直到成熟卵泡消失，排卵當(dāng)天進(jìn)行子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)化，排卵后第3天進(jìn)行凍融胚胎移植；(2)人工周期：月經(jīng)不規(guī)律，及自然周期卵泡生長欠佳或無排卵的患者，自月經(jīng)第3～4天始口服補(bǔ)佳樂(廣州拜耳)，劑量為4～8 mg/d，至內(nèi)膜生長至較理想厚度(≥8 mm)時(shí)進(jìn)行子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化后第3 天進(jìn)行凍融胚胎移植；(3)促排卵周期：卵泡發(fā)育欠佳，排卵障礙患者，自月經(jīng)第3～5天給予HMG 75～150 U/d，直至卵泡成熟，適時(shí)肌肉注射HCG(珠海麗珠)5 000～10 000 U，監(jiān)測至排卵日按照自然周期轉(zhuǎn)化內(nèi)膜。

2.胚胎解凍：移植前1 d下午進(jìn)行胚胎復(fù)蘇，檢查胚胎透明帶完整性、卵漿的透亮程度，如有 50% 以上卵裂球受損，則解凍其他胚胎，體外培養(yǎng)至次日(約18 h)移植。胚胎解凍：使用MEDICULT胚胎解凍液包(Warming-Kit，Origio，丹麥)。將載有胚胎的冷凍載桿從液氮中取出后直接浸入置于37℃預(yù)熱的WS1(Warming Solution 1)液中平衡1 min，然后將胚胎依次轉(zhuǎn)入WS2、WS3和WS4液中各平衡3 min，最后將胚胎移入胚胎培養(yǎng)液(COOK，美國)中，并放入37℃、6% CO2飽和濕度桌面培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。

3. 胚胎移植：移植前囑咐患者多飲水，充盈膀胱，移植時(shí)患者仰臥于移植床上，常規(guī)清潔外陰及陰道，陰道窺器暴露宮頸去除宮頸黏液。在腹部超聲引導(dǎo)下，根據(jù)內(nèi)膜形態(tài)及厚度，將載有胚胎的移植管(COOK，美國)的內(nèi)管頂端送至宮腔中或中下段，緩慢注入裝有胚胎的移植液至子宮腔，推注完畢停留約5～10 s，緩慢退出內(nèi)管。移植管送實(shí)驗(yàn)室檢查，確定無胚胎遺留后，完成移植。術(shù)后患者平臥休息1 h左右。

4.妊娠標(biāo)準(zhǔn)：自移植日始10～14 d后采血測β-HCG，判斷妊娠情況，將血β-HCG > 30 U/L定義為妊娠。移植后5～6周超聲檢查，有孕囊及原始心管搏動(dòng)即診斷為臨床妊娠。妊娠囊數(shù)除以移植胚胎數(shù)為著床率。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，各組間妊娠率比較采用卡方(χ2)檢驗(yàn)進(jìn)行分析，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、年齡對(duì)凍融胚胎移植妊娠結(jié)局的影響

A組、B組、C組之間妊娠率和著床率均無顯著性差異(P均>0.05)，但均高于D組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表1)。

注：與D組相比，*P<0.01

二、不同子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案對(duì)凍融胚胎移植妊娠結(jié)局的影響

自然周期(N)、人工周期(H)及促排周期(S)3種子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案，妊娠率和種植率3組間兩兩比較，均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)(表2)。

表2　不同子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案對(duì)凍融胚胎

三、移植胚胎數(shù)對(duì)凍融胚胎移植妊娠結(jié)局的影響

移植2枚胚胎組(E組)的妊娠率(45.56%)和移植3枚胚胎組(F組)的妊娠率(45.02%)之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；兩組著床率分別是26.07%和17.40%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表3)。

表3　移植胚胎數(shù)對(duì)凍融胚胎妊娠結(jié)局的影響

注：與E組比較，*P<0.05

四、凍融胚胎進(jìn)一步卵裂對(duì)凍融胚胎移植妊娠結(jié)局的影響

胚胎解凍后繼續(xù)培養(yǎng)，隨著進(jìn)一步卵裂胚胎數(shù)目的增加，妊娠率(分別為25.27%、39.29%、52.37%)和著床率(分別為10.74%、19.79%、29.16%)均有逐漸升高的趨勢，且3組的妊娠率和著床率兩兩比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表4)。

表4　凍融胚胎進(jìn)一步卵裂數(shù)目對(duì)妊娠結(jié)局的影響

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組兩兩相比，*P<0.01

五、胚胎完整性對(duì)凍融胚胎移植妊娠結(jié)局的影響

胚胎完整組的妊娠率高于胚胎受損組(分別為45.08%、40.15%)，但兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而兩組的著床率相比較，胚胎完整組高于胚胎受損組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表5)。

表5　胚胎完整性對(duì)凍融胚胎妊娠結(jié)局的影響

注：與胚胎受損組相比，*P<0.05

討論

自1994年我國完成首例凍融胚胎移植(FET)妊娠以來[3]，該技術(shù)在國內(nèi)得以飛速發(fā)展。FET是輔助生殖技術(shù)(ART)的重要內(nèi)容，研究表明，F(xiàn)ET可以通過減少卵巢過度刺激綜合征的發(fā)生來提高累積妊娠率[4]，并且還能最大限度地減少移植胚胎的個(gè)數(shù)。目前，F(xiàn)ET已廣泛被臨床醫(yī)學(xué)所采用。但是，由于技術(shù)層面和患者自身健康等條件的制約，尚不能確保每一次的成功率。

但是，胚胎在經(jīng)歷凍融的強(qiáng)烈刺激之后，具有發(fā)育潛能的卵裂球數(shù)目會(huì)減少，并會(huì)與準(zhǔn)備的子宮內(nèi)膜不同步，最終難以獲得較好臨床妊娠率。張洪秀等[5]發(fā)現(xiàn)對(duì)冷凍前分裂速率較慢胚胎提前一日復(fù)蘇，相比當(dāng)日復(fù)蘇的可提高臨床妊娠率和種植率。本研究發(fā)現(xiàn)：隨著胚胎復(fù)蘇后進(jìn)一步卵裂胚胎數(shù)目的增加，臨床妊娠率和著床率就愈高，且各組間差異顯著，這與之前的研究報(bào)道一致[6]。說明凍融胚胎復(fù)蘇后，有絲分裂的恢復(fù)以及進(jìn)一步卵裂球數(shù)目的增多是影響妊娠成功率的關(guān)鍵因素。因此，我們認(rèn)為適當(dāng)提前進(jìn)行胚胎復(fù)蘇并觀察復(fù)蘇后有效卵裂球數(shù)目，可能是臨床中提高妊娠率和著床率的重要措施之一。

目前，很多研究已證明年齡是衡量IVF活產(chǎn)率的一個(gè)重要的因素[7]。早在1990年，Piette等[8]就已對(duì)IVF中婦女的年齡因素進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)高齡婦女(>40歲)的妊娠成功率顯著降低。Check等[9]將患者分成三組(<35歲，36～39歲和40～42歲)，發(fā)現(xiàn)前兩組的臨床妊娠率沒有顯著差異，而40～42歲組則顯著降低；對(duì)于種植率來說，年輕組更好。本研究中，發(fā)現(xiàn)隨著年齡的增長，臨床妊娠率和著床率均呈現(xiàn)下降趨勢。與Check等[9]的研究類似，年齡40歲以下時(shí)，各組之間并沒有顯著差異，而40歲以上明顯下降。隨著年齡的增長，卵巢儲(chǔ)備能力和子宮內(nèi)膜容受性下降，胚胎非整倍性增加，染色體等異常導(dǎo)致胎兒發(fā)育異常，最終引發(fā)流產(chǎn)[10]。因此，年齡是造成高齡孕婦低妊娠率的一個(gè)很重要因素。

FET前子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案有自然周期、人工周期和促排卵周期。自然周期符合人體生理狀態(tài)，避免了使用外源性激素，符合胚胎著床的生理要求，同時(shí)可以減輕患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，但其監(jiān)測頻繁、時(shí)機(jī)不易掌握。人工周期通過使用外源性激素藥物進(jìn)而改善內(nèi)分泌激素水平來模擬自然狀態(tài)準(zhǔn)備內(nèi)膜，促使子宮內(nèi)膜的增厚及轉(zhuǎn)化，監(jiān)測簡單、靈活，便于臨床上的工作安排。我們的結(jié)果發(fā)現(xiàn)三種內(nèi)膜準(zhǔn)備方案間的妊娠結(jié)局沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與Gelbaya等[11]的研究相一致。對(duì)月經(jīng)規(guī)律且有排卵，卵巢儲(chǔ)備功能好的患者，采用自然周期方案。對(duì)部分月經(jīng)規(guī)律，無優(yōu)勢卵泡發(fā)育或無排卵以及卵巢儲(chǔ)備功能較差的患者，可采用人工周期[12]。而對(duì)于雌、孕激素反應(yīng)不佳者可采用促排卵方案來準(zhǔn)備內(nèi)膜。因此，應(yīng)根據(jù)個(gè)體情況，結(jié)合患者經(jīng)濟(jì)能力和個(gè)人意愿制定個(gè)體化方案，以期獲得較好的FET妊娠結(jié)局。

有研究表明，移植2枚和移植3枚胚胎的妊娠率沒有明顯差異[13]。本研究結(jié)果顯示：移植2枚胚胎的妊娠率與移植3枚胚胎相比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；然而，移植3枚胚胎的著床率卻顯著低于移植2枚胚胎的著床率，可能與移植3枚組患者的年齡、移植次數(shù)和胚胎質(zhì)量等有關(guān)，這還需作進(jìn)一步研究。一般移植胚胎數(shù)目越多，其臨床妊娠率雖越高，同時(shí)多胎妊娠率也增加[14]。目前多胎妊娠已成為ART的嚴(yán)重并發(fā)癥之一，所以應(yīng)根據(jù)患者的具體情況嚴(yán)格控制移植胚胎數(shù)目。本中心現(xiàn)以移植2枚胚胎為主，能最大程度地避免胚胎資源的浪費(fèi)，進(jìn)而提高累積妊娠率。

在胚胎凍融過程中，由于冰晶形成、滲透壓改變等因素會(huì)導(dǎo)致復(fù)蘇胚胎卵裂球的損傷。損傷的卵裂球?qū)鈨雠咛セ盍?、著床率以及妊娠率均有?fù)面影響[15-16]。它可能破壞細(xì)胞信號(hào)和破壞胚胎細(xì)胞的形態(tài)重組，還可能通過釋放一些毒性物質(zhì)損傷胚胎的發(fā)育潛能[17-18]。有研究表明，含解凍后損傷的卵裂球，其胚胎的種植潛能下降約30%[19]。我們的研究表明：卵裂球損傷的胚胎臨床妊娠率有所降低，著床率也明顯降低。評(píng)價(jià)卵裂球是否損傷可以作為FET選擇的重要衡量因素。

綜上所述，移植前不同的子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案對(duì)妊娠結(jié)局沒有顯著影響；移植胚胎數(shù)對(duì)妊娠結(jié)局影響不大；年齡和卵裂球的完整性是影響凍融胚胎移植成功的重要因素；冷凍胚胎提前解凍培養(yǎng)后選擇進(jìn)一步卵裂的胚胎進(jìn)行移植，有助于提高妊娠率和著床率。因此，我們認(rèn)為一次成功的妊娠不單單是技術(shù)的勝利，也是通過考量各種因素誕生健康胎兒的前提。臨床上應(yīng)因人而異，選擇合適的子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備方案行FET。嚴(yán)格控制冷凍和解凍操作過程的每一環(huán)節(jié)，減少胚胎損傷，提高胚胎的完整性，以獲得較好的妊娠結(jié)局。冷凍胚胎提前解凍并培養(yǎng)后，選擇進(jìn)一步卵裂的胚胎進(jìn)行移植有助于提高FET妊娠率和著床率。

【參考文獻(xiàn)】

[1]Weinerman R，Mainigi M. Why we should transfer frozen instead of fresh embryos：the translational rationale[J]. Fertil Steril，2014，102：10-18.

[2]Trounson A，Mohr L. Human pregnancy following cryopreservation，thawing and transfer of an eight-cell embryo[J]. Nature，1983，305：707-709.

[3]張麗珠，陳貴安，劉平，等. 凍融胚胎移植臨床妊娠成功[J]. 中華婦產(chǎn)科雜志，1994，29：706-707.

[4]Tahani AA，Safak T，Amir AK，et al. Can we improve implantation by cancellation of fresh embryo transfer?[J]. Mid East Fertil Socie J，2013，18：9-12.

[5]張洪秀，呂薈明，夏蕾，等. 提前復(fù)蘇分裂速率較慢胚胎對(duì)妊娠率的影響[J]. 中國優(yōu)生與遺傳雜志，2010，18：100-101.

[6]Joshi BV，Banker MR，Patel PM，et al. Transfer of human frozen-thawed embryos with further cleavage during culture increases pregnancy rates[J]. J Hum Reprod Sci，2010，3：76-79.

[7]Elizur SE，Lerner-Geva L，Levron J，et al. Factors predicting IVF treatment outcome：a multivariate analysis of 5310 cycles[J/OL]. Reprod Biomed Online，2005，10：645-649.

[8]Piette C，de Mouzon J，Bachelot A，et al. In-vitro fertilization：influence of women’s age on pregnancy rates[J]. Hum Reprod，1990，5：56-59.

[9]Check JH，Katsoff B，Wilson C，et al. Pregnancy outcome following fresh vs frozen embryo transfer into gestational carriers using a simplified slow freeze protocol[J]. Clin Exp Obstet Gyn，2012，39：23-24.

[10]Wang YA，Healy D，Black D，et al. Age-specific success rate for women undertaking their first assisted reproduction technology treatment using their own oocytes in Australia，2002-2005[J]. Hum Reprod，2008，23：1633-1638.

[11]Gelbaya TA，Nardo LG，Hunter HR，et al. Cryopreserved-thawed embryo transfer in natural or down-regulated hormonally controlled cycles：a retrospective study[J].Fertil Steril，2006，85：603-609.

[12]康艷，匡延平. 凍融胚胎移植周期內(nèi)膜準(zhǔn)備方案的進(jìn)展[J]. 生殖與避孕，2012，32：478-481.

[13]Wang JX，Yap YY，Matthews CD. Frozen-thawed embryo transfer：influence of clinical factors on implantation rate and risk of multiple conception[J]. Hum Reprod，2001，16：2316-2319.

[14]Hazlett W，Karande V，Vietzke M. How many frozen embryos should be transferred：Is 3 better than 2?[J]. Fertil Steril，2002，78：S126-S127.

[15]Van Landuyt L，Van de Velde H，De Vos A，et al. Influence of cell loss after vitrification or slow-freezing on further in vitro development and implantation of human Day 3 embryos[J]. Hum Reprod，2013，28：2943-2949.

[16]李偉，施文浩，李明昭，等. 玻璃化凍融后胚胎卵裂球的損傷與生長融合對(duì)移植結(jié)局的影響[J]. 生殖醫(yī)學(xué)雜志，2015：542-545.

[17]Kopeika J，Thornhill A，Khalaf Y. The effect of cryopreservation on the genome of gametes and embryos：principles of cryobiology and critical appraisal of the evidence[J]. Hum Reprod Update，2015，21：209-227.

[18]Houghton FD，Barr KJ，Walter G，et al. Functional significance of gap junctional coupling in preimplantation development[J]. Biol Reprod，2002，66：1403-1412.

[19]Edgar DH，Bourne H，Jericho H，et al. The developmental potential of cryopreserved human embryos[J]. Mol Cell Endocrinology，2000，169：69-72.

[編輯：郭永]

Affecting factors in outcome of frozen-thawed embryo transfer

WANG Wei-zhou#，WEI De-li#，SHEN Yu-liang，WU Di，WANG Ai-ming*

AssistedReproductiveCenter，DepartmentofObstetrics&Gynecology，NavyGeneralHospital，Beijing100048

【Abstract】Objective： To investigate several possible influencing factors on success of frozen-thawed embryos transfer (FET).

Key words：Frozen-thawed embryo transfer；Age;Blastomere growth；Pregnancy rate；Implantation rate

DOI：10.3969/j.issn.1004-3845.2016.06.007

【收稿日期】2015-09-15；【修回日期】2016-01-20

【基金項(xiàng)目】海軍總醫(yī)院創(chuàng)新培育基金(CXPY201408)

【作者簡介】王偉周，男，廣東人，碩士，主管技師，細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)；魏德莉，女，山東濰坊人，碩士，技師，動(dòng)物胚胎工程專業(yè). (#為共同第一作者；*通訊作者)