張建禮，董旭，劉緒貴，李后濤，王宏偉山東齊都藥業(yè)有限公司，山東省腦神經(jīng)保護(hù)類(lèi)藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東淄博　255400

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鹽酸托烷司瓊注射液不同處方及滅菌工藝對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量影響的研究

張建禮，董旭，劉緒貴，李后濤，王宏偉
山東齊都藥業(yè)有限公司，山東省腦神經(jīng)保護(hù)類(lèi)藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東淄博255400

目的通過(guò)對(duì)鹽酸托烷司瓊注射液不同處方及滅菌工藝的研究，選擇出最佳的處方和滅菌工藝，為大生產(chǎn)工藝提供依據(jù)。方法采用不同的處方和不同的pH值配制藥液，考察不同滅菌工藝滅菌前后樣品的性狀、pH值、溶液的澄清度與顏色、含量、有關(guān)物質(zhì)。 結(jié)果鹽酸托烷司瓊注射液受pH調(diào)節(jié)劑、pH值的影響較大。結(jié)論冰醋酸-醋酸鈉處方的樣品穩(wěn)定性好，工藝條件簡(jiǎn)單，適合大規(guī)模生產(chǎn)操作。

鹽酸托烷司瓊；pH值；雜質(zhì)；穩(wěn)定性

［Abstract］Objective To research the different prescriptions of tropisetron hydrochloride injection and sterilization processes and select the best prescription and sterilization process and provide basis for the high-yield process.Methods The soup was prepared by different prescriptions and pH values，and the property，pH value，solution clarify，color，content and relevant materials of samples before and after sterilization of different sterilization processes were examined.Results The pH regulator and pH value had a big effect on the tropisetron hydrochloride injection.Conclusion The sample stability of glacial acetic acid-sodium acetate prescription is good，and the process condition is easy，which is suitable for the largescale production and operation.

［Key words］Tropisetron hydrochloride；pH value；Impurity；Stability

鹽酸托烷司瓊（Tropisetron Hydrochloride）是繼昂丹司瓊和格拉司瓊之后上市的第2代止吐藥，由瑞士諾華公司原研開(kāi)發(fā)，是具有高度選擇性的5-羥色胺受體拮抗藥。鹽酸托烷司瓊注射液1999年由瑞士諾華進(jìn)口到中國(guó)，商品名“歐必亭”，主要用于預(yù)防和治療放化療引起的惡心和嘔吐以及術(shù)后惡心嘔吐。鹽酸托烷司瓊作為強(qiáng)效止吐藥，具有半衰期長(zhǎng)，高效低毒，不良反應(yīng)小的特點(diǎn)［1-2］，近年來(lái)在臨床上得到了廣泛應(yīng)用。鹽酸托烷司瓊為吲哚甲酸衍生物，鹽酸托烷司瓊注射液制備及長(zhǎng)期放置過(guò)程中易降解產(chǎn)生3-吲哚甲酸、3-吲哚甲醛，對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量有較大影響。中國(guó)藥典2015年版收載的鹽酸托烷司瓊原料藥標(biāo)準(zhǔn)中列明了雜質(zhì)Ⅰ（3-吲哚甲酸）、雜質(zhì)Ⅱ（3-吲哚甲醛），但原料和制劑中均未明確要求控制雜質(zhì)Ⅰ和雜質(zhì)Ⅱ，僅要求按主成分自身對(duì)照法控制未知雜質(zhì)的含量。經(jīng)雜質(zhì)譜分析，3-吲哚甲酸是托烷司瓊原料藥合成的關(guān)鍵中間體，同時(shí)也能通過(guò)降解雜質(zhì)3-吲哚甲醛進(jìn)一步降解生成［3］，因此從仿制藥質(zhì)量一致性方面來(lái)說(shuō)，有必要對(duì)制劑中的雜質(zhì)Ⅰ和Ⅱ詳細(xì)研究，并與原研品進(jìn)行質(zhì)量對(duì)比。鹽酸托烷司瓊雜質(zhì)結(jié)構(gòu)式如圖1、圖2所示。

圖1　雜質(zhì)|：3-吲哚甲酸

圖2　雜質(zhì)‖：3-吲哚甲醛

該文參考諾華上市品“歐必亭”原研品處方，采用不同的處方和制備工藝，對(duì)制備的鹽酸托烷司瓊注射液進(jìn)行質(zhì)量和穩(wěn)定性研究，重點(diǎn)考察不同處方工藝條件的樣品雜質(zhì)Ⅰ和雜質(zhì)Ⅱ的含量，最終為選擇適合大生產(chǎn)規(guī)模的處方工藝提供依據(jù)。經(jīng)調(diào)研，筆者尚未發(fā)現(xiàn)該方面的研究報(bào)道。具體研究?jī)?nèi)容如下。

1　試驗(yàn)部分

1.1儀器與材料

1.1.1儀器與設(shè)備 pHS-3C型精密pH計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司），RFG型實(shí)驗(yàn)用安瓿瓶熔封機(jī)（長(zhǎng)沙中亞制藥設(shè)備有限公司），不銹鋼配液桶，TMQ.C/3850J型臺(tái)式滅菌器（新華醫(yī)療器械股份有限公司），LC-20AT型高效液相色譜儀（日本島津公司）。

1.1.2材料鹽酸托烷司瓊（批號(hào)：150201，山東齊都藥業(yè)有限公司），氯化鈉（批號(hào)：201505002，山東肥城精制鹽廠），冰醋酸，醋酸鈉，鹽酸，注射用水，5 mL安瓿瓶。

1.2處方與制備工藝

原研品“歐必亭”輔料使用冰醋酸、醋酸鈉，成品pH值為4.6～5.2，為考察不同pH調(diào)節(jié)劑、半成品不同pH值以及不同滅菌工藝對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響，設(shè)計(jì)處方及制備工藝如下。

1.2.1處方鹽酸托烷司瓊注射液為鹽酸托烷司瓊的滅菌水溶液，以氯化鈉為滲透壓調(diào)節(jié)劑，同時(shí)使用醋酸鈉-冰醋酸緩沖對(duì)或者鹽酸為pH調(diào)節(jié)劑，兩種pH調(diào)節(jié)劑的處方組成見(jiàn)表1。

表1　鹽酸托烷司瓊注射液處方

表2　滅菌前后樣品的性狀、澄清度與顏色對(duì)比

表3　滅菌前后樣品的pH值對(duì)比

表5　滅菌前后樣品的有關(guān)物質(zhì)含量對(duì)比（%）

1.2.2制備工藝（1）按處方1分別稱取鹽酸托烷司瓊5.64 g，氯化鈉45.0 g，醋酸鈉5.0 g，冰醋酸適量，備用。向不銹鋼配液桶內(nèi)加入約4 000 mL注射用水，加入稱量好的氯化鈉、醋酸鈉和鹽酸托烷司瓊，攪拌至完全溶解，加注射用水至5 000 mL。用冰醋酸調(diào)節(jié)藥液pH值至6.0，灌裝200支；剩余藥液平均分為4份，分別使用冰醋酸調(diào)節(jié)藥液pH值至5.5、5.0、4.5、4.0，各個(gè)pH值藥液均灌封200支。每個(gè)pH值樣品取20支不滅菌，作為留樣，其余樣品每個(gè)pH值樣品平均分為2份，分別在115℃30 min和121℃12 min條件下滅菌，得成品。（2）按處方2分別稱取鹽酸托烷司瓊5.64 g，氯化鈉45.0 g，鹽酸適量，備用。向不銹鋼配液桶內(nèi)加入約4 000 mL注射用水，加入稱量好的氯化鈉、鹽酸托烷司瓊，攪拌至完全溶解，加注射用水至5 000 mL。用鹽酸調(diào)節(jié)藥液pH值至6.0，灌裝200支；剩余藥液平均分為4份，分別使用鹽酸調(diào)節(jié)藥液pH值至5.5、5.0、4.5、4.0，各個(gè)pH值藥液均灌封200支。每個(gè)pH值樣品取20支不滅菌，作為留樣，其余樣品每個(gè)pH值樣品平均分為2份，分別在115℃30 min和121℃12 min條件下滅菌，得成品。

2　樣品檢驗(yàn)部分

2.1儀器與試劑

LC-20A型高效液相色譜儀（日本島津），BS110S型電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司），鹽酸托烷司瓊對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，規(guī)格：100 mg/支，批號(hào)：100683-200401），鹽酸托烷司瓊雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ?qū)φ掌罚‥DQM，規(guī)格：10 mg/支），澄明度檢測(cè)儀，pH-3C型pH計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

2.2檢驗(yàn)項(xiàng)目

滅菌前后自制樣品的性狀、澄清度與顏色、pH值、滲透壓摩爾濃度、鹽酸托烷司瓊含量和有關(guān)物質(zhì)。

2.3檢驗(yàn)結(jié)果

2.3.1性狀、澄清度與顏色 對(duì)制備的樣品進(jìn)行目測(cè)，檢查不同pH值對(duì)樣品性狀、澄清度與顏色是否有影響，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3.2pH值、滲透壓摩爾濃度 對(duì)制備的樣品進(jìn)行pH值、滲透壓摩爾濃度檢測(cè)，對(duì)比滅菌前后變化情況，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

2.3.3含量（1）色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱（250 mm×4.6 5 μm）；流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鉀6.8 g，加水500 mL使溶解，加三乙胺5 mL，用水稀釋至1 000 mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.5）-乙腈（80∶20）；檢測(cè)波長(zhǎng)：284 nm。（2）試驗(yàn)方法。精密量取該品，用流動(dòng)相A稀釋制成每mL含托烷司瓊約20 μg的溶液，作為供試溶液。精密量取托烷司瓊對(duì)照品適量，用流動(dòng)相A制成每mL含托烷司瓊約20 μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。分別取供試品溶液和對(duì)照品溶液10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法計(jì)算托烷司瓊的含量。檢驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。

表4　滅菌前后樣品的含量對(duì)比

2.3.4有關(guān)物質(zhì)（1）色譜條件：同含量檢測(cè)項(xiàng)下色譜條件；（2）試驗(yàn)方法：精密量取該品，每毫升含托烷司瓊約1 mg的溶液，作為供試溶液。精密量取供試溶液1 mL，置500 mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。另取雜質(zhì)Ⅰ、雜質(zhì)Ⅱ?qū)φ掌愤m量，加流動(dòng)相稀釋制成各含雜質(zhì)Ⅰ和Ⅱ1 μg的溶液，搖勻，作為對(duì)照品溶液。分別精密量取供試溶液、對(duì)照及對(duì)照品溶液20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試溶液中溶劑峰和小于0.05%對(duì)照溶液主成份峰的雜質(zhì)峰除外，如顯與雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ一致和雜質(zhì)峰，不得大于對(duì)照品溶液中的峰面積（0.1%），如有其他雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得過(guò)對(duì)照溶液主峰面積的0.5倍（0.1%），各雜質(zhì)峰面積和不得過(guò)對(duì)照溶液主峰面積的2.5倍（0.5%）。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表5。

圖1　兩種處方均115℃30 min滅菌樣品雜質(zhì)|含量與pH值的關(guān)系

圖2　兩種處方均115℃30 min滅菌樣品雜質(zhì)‖含量與pH值的關(guān)系

圖3　兩種處方均115℃30 min滅菌樣品其它雜質(zhì)含量與pH值的關(guān)系

圖4　兩種處方均121℃12 min滅菌樣品雜質(zhì)|含量與pH值的關(guān)系

圖5　兩種處方均121℃12 min滅菌樣品雜質(zhì)‖含量與pH值的關(guān)系

圖6　兩種處方均121℃12 min滅菌樣品其它雜質(zhì)含量與pH值的關(guān)系

2.4結(jié)果分析

（1）表2表明，不同處方工藝制備的樣品滅菌前后性狀均為無(wú)色的澄明液體，溶液澄清無(wú)色，符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。

（2）表3表明，處方2樣品滅菌后pH值較滅菌前有所下降，呈現(xiàn)滅菌前pH值越高，滅菌后pH下降越明顯的趨勢(shì)；而處方1樣品滅菌前后pH值沒(méi)有變化。試驗(yàn)表明，處方1使用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值，與醋酸鈉形成緩沖對(duì)有利于滅菌前后pH值保持穩(wěn)定。不同處方工藝樣品的滲透摩爾濃度差別不明顯，均符合等滲要求。

（3）表4表明，相同處方及pH值的樣品不同條件滅菌前后含量測(cè)定RSD均小于1%；相同處方、不同pH值的樣品相同條件滅菌前后含量測(cè)定RSD均小于1%；兩種處方的樣品經(jīng)滅菌后托烷司瓊含量均有下降趨勢(shì)；處方2樣品經(jīng)121℃12 min滅菌后，含量下降較其他產(chǎn)品下降更為明顯，使用鹽酸調(diào)節(jié)pH值的樣品對(duì)121℃12 min較高滅菌強(qiáng)度的耐受性較差，不利于產(chǎn)品質(zhì)量控制。相反，處方1使用冰醋酸-醋酸鈉緩對(duì)調(diào)節(jié)pH的樣品，pH值介于4.5～5.5時(shí)，經(jīng)115℃30 min和121℃12 min兩種工藝滅菌后，含量下降最不明顯，基本處于相對(duì)穩(wěn)定的范圍。

（4）根據(jù)表5繪制不同工藝條件下處方1和處方2雜質(zhì)含量對(duì)比圖：①兩種滅菌條件下的樣品，各個(gè)pH條件下處方1的雜質(zhì)Ⅰ、雜質(zhì)Ⅱ的含量相比處方2較少，如圖1、2（115℃30min）、圖4、5（121℃12min）所示，兩種處方下其它雜質(zhì)的含量基本相同，如圖3、6所示；處方1樣品整體質(zhì)量?jī)?yōu)于處方2。②兩種處方下樣品均有pH值越高，雜質(zhì)Ⅰ含量越高的趨勢(shì)，如圖1、4所示，但是對(duì)雜質(zhì)Ⅱ來(lái)說(shuō)，處方1樣品pH值在4.5～5.5時(shí)，能夠控制雜質(zhì)Ⅱ含量在較低范圍，如圖2、3所示。③在pH值不大于5.5時(shí)，不同滅菌條件對(duì)各雜質(zhì)含量影響差異不明顯；pH值大于5.5時(shí)，不同處方樣品的雜質(zhì)含量均有明顯升高，如圖1、2、4、5所示。④由圖1～6可分別看出，處方1下樣品在pH值4.0～5.5范圍內(nèi)，雜質(zhì)含量較低且趨于穩(wěn)定。

3　試驗(yàn)結(jié)論

參考原研處方，處方1冰醋酸-醋酸鈉緩對(duì)調(diào)節(jié)pH的樣品，pH值介于4.5～5.5時(shí)，121℃12 min滅菌條件下能夠較好的控制鹽酸托烷司瓊注射液中的雜質(zhì)Ⅰ和雜質(zhì)Ⅱ及其它有關(guān)物質(zhì)的含量，且能夠穩(wěn)定控制產(chǎn)品性狀、澄清度與顏色、托烷司瓊含量，保證產(chǎn)品質(zhì)量。

4　討論

鹽酸托烷司瓊為生物堿類(lèi)，本身含有的酯結(jié)構(gòu)易在高溫滅菌條件下水解，且與pH值關(guān)系較大，該文通過(guò)不同處方、不同pH及滅菌工藝的對(duì)比研究，為鹽酸托烷司瓊注射液開(kāi)發(fā)初期的質(zhì)量的設(shè)計(jì)提供了依據(jù)，為產(chǎn)品大生產(chǎn)規(guī)規(guī)模確定生產(chǎn)工藝提供了指導(dǎo)。

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Research on Effect of Different Prescriptions of Tropisetron Hydrochloride Injection and Sterilization Processes on the Product Quality

ZHANG Jian-li，DONG Xu，LIU Xu-gui，LI Hou-tao，WANG Hong-wei
Shandong Qi Du Pharmaceutical Co.，Ltd&Shandong Provincial Key Laboratory of brain nerve protection，Zibo，Shandong Province，255400 China

R943

A

1672-5654（2016）07（c）-0173-05

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.21.173

張建禮（1963.9-），男，山東淄博人，大專(zhuān)，高級(jí)工程師，研究方向：藥品生產(chǎn)與研發(fā)。

2016-04-20）