王麗星，謝寶貴，黃志偉

（1．福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002；2．福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心，福建 福州 350002）

白靈菇菌株P(guān)l.n0006的生物學(xué)特性研究

王麗星1，謝寶貴2，黃志偉1

（1．福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002；2．福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心，福建 福州 350002）

研究白靈菇菌株P(guān)l.n0006的生物學(xué)特性，探索其在固體發(fā)酵條件下的最佳生長條件，為其栽培技術(shù)研究奠定基礎(chǔ)。采用不同的固體培養(yǎng)基，研究培養(yǎng)基的組成、含水量、酸堿度及光照對菌絲生長的影響。結(jié)果表明：白靈菇菌絲在添加麥皮或稻草粉的木屑培養(yǎng)基中都能較好地生長；在培養(yǎng)基中添加1%～5%的石灰可促進(jìn)菌絲生長，而添加1%～5%的過磷酸鈣反而會抑制菌絲生長，菌絲在PDA培養(yǎng)基上生長的最佳pH值為8～11；在黑暗條件下培養(yǎng)，菌絲的生長速度顯著比光照條件下快。

白靈菇；生物學(xué)特性；菌絲體；固體培養(yǎng)；生長條件

白靈菇（Pleurotus nebrodensis）屬于擔(dān)子菌亞綱，層菌綱，傘菌目，側(cè)耳科，側(cè)耳屬，又名白阿魏蘑，可稱之為刺芹側(cè)耳的另一個變種。白靈菇是一種藥、食兩用的大型真菌，蓋厚柄粗，菇體肥大，顏色潔白，肉嫩鮮美，并有豐富的營養(yǎng)價值[1]。白靈菇含有豐富的蛋白質(zhì)、碳水化合物、粗纖維、維生素C、多糖和礦物元素，具有清熱解毒、治療胃病、傷寒、降血壓防止動脈硬化、防治骨質(zhì)疏松、增強(qiáng)人體免疫力等功效[2]。盛偉等[3]研究發(fā)現(xiàn)，白靈菇有很強(qiáng)的清除羥基自由基和超氧自由基的能力，并且有較強(qiáng)的還原力和清除NO的能力，可以開發(fā)成為抗衰老保健食品輔料或功能因子。

對于白靈菇的生長培育，優(yōu)質(zhì)的菌種是白靈菇栽培能否成功的關(guān)鍵，而培育優(yōu)質(zhì)白靈菇菌種的關(guān)鍵之一是培養(yǎng)基，培養(yǎng)基雖然有很多種類，但是可以被白靈菇利用的卻不多[4]。王桂芹等[5]研究發(fā)現(xiàn)，以豆秸粉為主料培養(yǎng)白靈菇，其生物學(xué)效率高，因?yàn)榘嘴`菇對碳源的要求高一些，而豆秸粉里含有一定量的稻草粉，說明白靈菇的培養(yǎng)基中要求有一定量的木質(zhì)素。張浩洋等[6]研究表明，白靈菇菌絲可在pH值為4～11的培養(yǎng)基上生長，最適pH為6～8。張瑞穎等[7]研究發(fā)現(xiàn)，白靈菇的培養(yǎng)過程給予一定的散射光（400～600Lux），可使白靈菇的子實(shí)體更加潔白。培養(yǎng)料的最適含水量為60～62%，若含水量過低，不能滿足菌絲生長和子實(shí)體的生長發(fā)育；若含水量過高，則發(fā)菌中后期吃料慢。

為了深入研究白靈菇菌株P(guān)l.n0006的人工栽培技術(shù)，文章對該菌株的生物學(xué)特性進(jìn)行研究，現(xiàn)將研究結(jié)果總結(jié)如下。

表1 12個配方培養(yǎng)基的組成

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株

白靈菇菌株P(guān)l.n0006為福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心提供。

1.1.2 供試培養(yǎng)基配方

1.1.2.1 不同固體培養(yǎng)基配方對白靈菇菌絲生長的影響

采用不同的主料和輔料，按表1分別配制出12種固體培養(yǎng)基配方。在配制培養(yǎng)基之前，先將麥皮、玉米粉、木屑和稻草粉置于105℃下烘干2～3h，并防止返潮（下同）；然后將各種配方培養(yǎng)基的含水量均控制為60%。

1.1.2.2 培養(yǎng)基含水量對白靈菇菌絲生長的影響

配方I：木屑76%、麥皮20%、過磷酸鈣2%、葡萄糖1%、石膏1%；

配方II：木屑76%、稻草粉20%、過磷酸鈣2%、葡萄糖1%、石膏1%。

2種培養(yǎng)基分別設(shè)置6個含水量水平，即50%、55%、60%、65%、70%、75%。

1.1.2.3 培養(yǎng)基酸堿度對白靈菇菌絲生長的影響

PDA斜面培養(yǎng)基配方：馬鈴薯200g、葡萄糖20 g、瓊脂20g、水1000mL，PDA培養(yǎng)基配制好后用1mol·L-1HCl或1mol·L-1NaOH調(diào)整pH至4、5、6、7、8、9、10、11。

木屑培養(yǎng)基配方：以木屑78%、麥皮（或稻草粉）20%、葡萄糖1%、石膏1%為基礎(chǔ)，分別在木屑麥皮培養(yǎng)基（I）和木屑稻草粉培養(yǎng)基（II）中添加過磷酸鈣或石灰，各設(shè)5個劑量，即1%、2%、3%、4%、5%，相應(yīng)減少配方中木屑的用量，使培養(yǎng)料總和為100%，以不添加過磷酸鈣和石灰的基礎(chǔ)培養(yǎng)基為對照。

培養(yǎng)基的含水量均為65%。

1.1.2.4 光照對白靈菇菌絲生長的影響

馬鈴薯200g，葡萄糖20g，KH2PO4 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，瓊脂20g，水1000 mL。

1.2 方法

1.2.1 不同固體培養(yǎng)基配方對白靈菇菌絲生長的影響

按15g培養(yǎng)料（干重）/試管計(jì)算，每個配方約需250g/4培養(yǎng)料（干重）。依表1所述配方計(jì)算，并稱取培養(yǎng)基各組分，按配方分別先將除過磷酸鈣、葡萄糖和石膏以外的各組分混合。再分別取自來水375mL/4/配方，加到過磷酸鈣、葡萄糖和石膏的混合物中，溶解后，倒入木屑等的混合物中，并充分混合均勻。然后分裝于25×200mm試管中，并用口徑較小的試管壓實(shí)培養(yǎng)料，塞上棉花塞，在126℃下滅菌45min。用接種針挑取白靈菇菌塊，接種到各試管的培養(yǎng)基上，并使有菌絲的一面朝上，然后置于溫度為28℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待菌絲長入料中約1cm時，畫起始線，并注明畫線日期。然后繼續(xù)培養(yǎng)，待菌絲長至接近試管底時畫終止線，計(jì)算菌絲生長速度（mm·d-1）并評估菌絲長勢，然后用軟件SAS System For Windows Release 6.12 對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析與顯著性測驗(yàn)（下同）。

1.2.2 培養(yǎng)基含水量對白靈菇菌絲生長的影響

參照1.2.1所示方法準(zhǔn)備好不同含水量的培養(yǎng)基，每個處理4個重復(fù)，高壓滅菌，接種，培養(yǎng)，記錄菌絲的生長情況。

1.2.3 培養(yǎng)基酸堿度對白靈菇菌絲生長的影響

不同pH值的PDA培養(yǎng)基分裝于18×180mm試管中，每個處理4個重復(fù)，在121℃下高壓滅菌30min后，制作斜面培養(yǎng)基。配制木屑培養(yǎng)基時，先將過磷酸鈣或石灰、葡萄糖和石膏加入水中制成混懸液，再與其它干料混合物充分混合均勻，配制成不同酸堿度的培養(yǎng)基，然后參照1.2.1所示方法對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓滅菌，接種，培養(yǎng)，記錄菌絲的生長情況。

1.2.4 光照對白靈菇菌絲生長的影響

先配制平板的固體培養(yǎng)基，將白靈菇菌種接種于培養(yǎng)皿的中間位置，然后分成2組，每組4個重復(fù)，一組置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（光照強(qiáng)度為2780 Lux），一組置于暗培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，溫度均為25℃。當(dāng)菌落直徑為2 cm以上時，參照1.2.1所示方法記錄菌絲的生長情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 培養(yǎng)基配方對白靈菇菌絲生長的影響

從圖1可以看出：在不同配方培養(yǎng)基中，白靈菇菌絲生長速度的差異達(dá)極顯著水平，其中：以木屑、棉子殼和麥皮為主料的培養(yǎng)基（9號配方）中，白靈菇菌絲的生長速度最快；以棉子殼、稻草粉和玉米粉為主料的培養(yǎng)基（7號配方）中，菌絲的生長速度最慢。

2.2 培養(yǎng)基含水量對白靈菇菌絲生長的影響

從圖2可以看出：白靈菇菌絲在麥皮培養(yǎng)基中的生長速度均比稻草粉培養(yǎng)基中的生長速度快。白靈菇菌絲在2類培養(yǎng)基中的生長速度對于培養(yǎng)基含水量變化的響應(yīng)基本一致，即隨著培養(yǎng)基含水量的增加，菌絲的生長速度呈加快的趨勢。

2.3 培養(yǎng)基酸堿度對白靈菇菌絲生長的影響

2.3.1 斜面培養(yǎng)基pH值對菌絲生長的影響

從圖3可以看出：斜面培養(yǎng)基的pH值為4～8時，菌絲生長速度差異顯著，隨著pH值的上升，菌絲生長速度顯著上升。當(dāng)斜面培養(yǎng)基的pH值為9～11時，菌絲的生長速度沒有顯著性差異，且生長良好。

2.3.2 在麥皮草粉培養(yǎng)基中添加酸性或堿性輔料對白靈菇菌絲生長的影響

從圖4可以看出：在木屑麥皮（或稻草粉）培養(yǎng)基中添加1%～5%的過磷酸鈣均抑制了白靈菇菌絲的生長，而在木屑麥皮（或稻草粉）培養(yǎng)基中添加1%～5%的石灰均可促進(jìn)白靈菇菌絲的生長。

2.4 光照對白靈菇菌絲生長的影響

從圖5可以看出：在光照和黑暗條件下培養(yǎng)，白靈菇菌絲生長速度的差異達(dá)到極顯著水平，在黑暗條件下培養(yǎng)可以顯著促進(jìn)白靈菇菌絲的生長。

3 結(jié)論與討論

本研究結(jié)果表明：白靈菇菌株P(guān)l.n0006在添加麥皮或稻草粉的木屑培養(yǎng)基中都能較好地生長；在培養(yǎng)基中添加1%～5%的石灰可促進(jìn)菌絲的生長，而添加1%～5%的過磷酸鈣反而會抑制菌絲生長，菌絲生長適宜的PDA培養(yǎng)基pH為8～11；在黑暗條件下培養(yǎng)，菌絲的生長速度顯著比光照條件下快。

長期以來白靈菇栽培的主料為棉籽殼，其價格已經(jīng)日益上漲[8]。馬瑞霞[9]研究表明，用棉籽殼作為主要原料培養(yǎng)出的菌絲長勢強(qiáng)，出菇快，且子實(shí)體大、菌肉厚，產(chǎn)量高，這是因?yàn)槊拮褮ゎw粒大、結(jié)構(gòu)疏松、透氣性好、營養(yǎng)豐富，營養(yǎng)物質(zhì)易被白靈菇吸收利用。因此，本研究將麥皮或稻草粉與棉籽殼混合作為培養(yǎng)基主料，不影響白靈菇的菌絲生長，降低其栽培成本，并使稻草等廢棄物得到有效利用。

從本研究結(jié)果可以看出，光照對白靈菇菌絲的生長有顯著影響，這與王文治等[10]的研究結(jié)果一致。因此，為了更好地讓白靈菇菌絲生長，應(yīng)在暗處培養(yǎng)白靈菇，而到了菇蕾分化階段則需要一定的散射光。

[1] 陳文良.白靈菇的營養(yǎng)價值和開發(fā)前景[J].食用菌，1999，(4)：40.

[2] 惠恩舉.白靈菇發(fā)展前景看好[J].特種經(jīng)濟(jì)動植物，2002，(11)：38.

[3] 盛偉，方曉陽，吳萍.白靈菇、杏鮑菇、阿魏菇多糖體外抗氧化活性研究[J].食品工業(yè)科技，2008，(5)：29.

[4] 胡清秀，鄧華平.白靈側(cè)耳栽培技術(shù)研究[J].食用菌學(xué)報(bào)，2001，8(4)：38 -42.

[5] 王桂芹，穆寶漢.白靈菇培養(yǎng)基篩選試驗(yàn)[J].中國林副特產(chǎn)，2006，(6)：10-12.

[6] 張浩洋，李冬，葛芳，等.白靈菇人工試栽技術(shù)[J].防護(hù)林科技，2010，(4)：121-122.

[7] 張瑞穎，胡清秀，左雪梅，等.白靈菇栽培經(jīng)驗(yàn)及問題分析[J].中國食用菌，2010，29(2)：63-65.

[8] 吳鄭武，胡清秀，夏志蘭，等.白靈菇新型栽培基質(zhì)配方研究[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2012，28(04)：245-249.

[9] 馬瑞霞.不同配方培養(yǎng)料對白靈菇生長發(fā)育和產(chǎn)量的影響[J].食用菌學(xué)報(bào)，2007，14(3)：73-76.

[10] 王文治，王永左，蔡玉俠.白靈菇生物學(xué)特性及高產(chǎn)栽培技術(shù)[J].天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，9(2)：61-62.

10.3969/j.issn.1007-550X.2016.12.001

S646.9

A

1007-550X（2016）12-0038-04

2016-8-25

王麗星（1992—），女，碩士研究生，研究方向：食品生物技術(shù)。

黃志偉（1978—），男，博士，講師，研究方向：食品生物技術(shù)。Email：972842976@qq.com