天麻素在不同溶劑中穩(wěn)定性的對比

楊雪萍，劉　衛(wèi)，孫　昕，袁紅英

天麻素在不同溶劑中穩(wěn)定性的對比

楊雪萍，劉衛(wèi)，孫昕，袁紅英＊

目的考察天麻素在不同溶劑中的穩(wěn)定性。方法利用HPLC法，對天麻素在稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈、水、乙腈-0.5%磷酸（3∶97）溶液中的穩(wěn)定性進(jìn)行分析。對在不同溶劑中天麻素及生成物的保留時間、峰面積積分值進(jìn)行考察比較。結(jié)果天麻素在各溶劑中穩(wěn)定性有較大差別，在水、乙腈-0.5%磷酸（3∶97）較穩(wěn)定；在稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈中不穩(wěn)定，分別不同程度的發(fā)生可逆反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其他物質(zhì)。結(jié)論天麻素在50%乙醇、50%甲醇、50%乙腈中不穩(wěn)定，用以上溶劑作為天麻素提取溶劑時，需蒸干后以水復(fù)溶解。

天麻素；溶劑提??；穩(wěn)定性

DOI:10.14172/j.issn1671-4008.2016.10.021

天麻素可恢復(fù)大腦皮質(zhì)興奮與抑制過程的平衡失調(diào)［1］，具有鎮(zhèn)靜、安眠和鎮(zhèn)痛等中樞抑制作用。被用于治療神經(jīng)衰弱及其綜合征和血管神經(jīng)性頭痛等癥（如偏頭痛、枕骨大神經(jīng)痛等），亦可用于腦外傷性綜合征、眩暈病如梅尼埃病、藥性眩暈、外傷性眩暈、突發(fā)性耳聾、前庭神經(jīng)元炎、椎基底動脈供血不足等。目前常用劑型有片劑和注射劑，為臨床常用藥物。

天麻素可溶于水、乙醇、甲醇等溶劑［2，3］，試驗中常利用甲醇、乙醇、乙腈、水等作為溶劑制備天麻素供試品。在含量測定中發(fā)現(xiàn)天麻素以甲醇、乙醇、乙腈等為溶劑時，在220 nm波長下［4］，高效液相色譜圖中天麻素保留時間附近有未知干擾峰出現(xiàn)，影響天麻素的含量測定。為此對天麻素在以上溶劑中的穩(wěn)定性進(jìn)行考察。

1　材料與方法

1.1材料與儀器天麻素對照品（購自中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用110807-200205）；試驗所用甲醇（天津市永大化學(xué)試劑有限公司）、乙腈（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）均為色譜純，乙醇（天津市百世化工有限公司）、磷酸（天津市化學(xué)試劑六廠）均為分析純，水為純水。安捷倫1200高效液相色譜儀 （四元泵、自動進(jìn)樣），VWD檢測器，超聲清洗器（TCQ-25型），電子天平（AE-240型）

1.2實(shí)驗方法

1.2.1色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性［5，6］以十八烷基硅烷鍵和硅膠為填充劑；以乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為流動相；檢測波長為220 nm。

1.2.2供試品溶液制備取天麻素對照品適量5份，精密稱定，分別加乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）、稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈、水制成每1 ml含50 μg的溶液，備用。分別精密量取10 ml稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈作為溶劑的天麻素對照品溶液，于沸水浴上蒸干，再以水為溶劑分別轉(zhuǎn)移至10 ml量瓶，加水至刻度，搖勻，備用。

2　結(jié)果

2.1以稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈為溶劑的色譜峰對照考察在相同色譜條件下稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈作為溶劑的天麻素對照品分別產(chǎn)生保留時間不同的兩種物質(zhì)。因不能確定峰的歸屬，根據(jù)保留時間將其命名為峰a、峰b（圖1）。

天麻素在以上三種溶劑中產(chǎn)生的物質(zhì)的保留時間、峰面積積分值及峰面積積分值之和與濃度的比值均有較大差異。見表1。

圖 1　稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈為溶劑的天麻素對照品色譜圖

表 1　以稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈為溶劑的色譜峰a、b的保留時間及峰面積積分值

2.2以水、乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑的色譜峰對照考察以水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）作為溶劑的天麻素對照品，在相同色譜條件下，均只有一個色譜峰，但保留時間不同。見圖2。

圖 2　以水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑的天麻素對照品色譜圖

以水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑的天麻素，在相同色譜條件下保留時間不同，但峰面積積分值與天麻素對照品濃度比值相近。見表2。

表 2　以水、乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑天麻素的保留時間及峰面積積分值

2.3將對照品溶液蒸干復(fù)溶前后色譜峰對照考察精密量取蒸干后的水復(fù)溶溶液注入高效液相色譜儀［7］，對色譜圖進(jìn)行觀察并對含量進(jìn)行測定。三份以水為溶劑復(fù)溶后的溶液，在220 nm處均只有一個色譜峰，可與天麻素對照品相對應(yīng)，未見其他色譜峰出現(xiàn)。以水為溶劑復(fù)溶后天麻素保留時間與以水為溶劑的對照品一致，峰面積積分值亦與以水為溶劑的對照品相差不大。見表3。

2.4在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中穩(wěn)定性的考察［8］取以水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑的天麻素對照品溶液，標(biāo)記為1、2，分別測定上述兩種對照品溶液放置0、4、8、12、24 h的峰面積積分值。由結(jié)果可知，以水為溶劑天麻素對照品溶液峰面積積分值平均值為8808.64，RSD=0.96%，以乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑峰面積積分值平均值為8122.05，RSD=0.91%，表明天麻素在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中24 h內(nèi)均穩(wěn)定。見表4。

表 3　以水為溶劑復(fù)溶后天麻素的保留時間及峰面積積分值

編號　0 h　4 h　8 h　12 h　24 h 1　8786.63　8925.32　8717.19　8752.34　8861.71 2　8162.33　8004.75　8177.36　8171.64　8094.17

3　討論

根據(jù)圖1、表1，在稀乙醇溶液中，色譜峰a、b的峰面積積分值相當(dāng)；在50%甲醇溶液中，色譜峰a的峰面積積分值小于色譜峰b；在50%乙腈溶液中，色譜峰a的峰面積積分值大于色譜峰b。根據(jù)在以上三種不同溶劑中天麻素色譜峰a、b的保留時間，天麻素在不同溶劑中的存在形式有較大差異。在以上三種不同溶劑中的天麻素的色譜峰，峰a的保留時間有較大差異、峰b的保留時間相近。根據(jù)以上三種不同溶劑中天麻素的色譜峰a、b的峰面積積分值及色譜峰a、b峰面積積分值之和與天麻素對照品濃度的比值，天麻素在不同溶劑中存在的形式差異較大。根據(jù)圖2、表2，天麻素在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中，在220 nm處只有一個吸收峰存在，沒有在此處有吸收的其他物質(zhì)生成。天麻素在相同的色譜條件下，以不同的溶劑溶解保留時間有較大差異。峰面積積分值差別不大。根據(jù)表3，天麻素的稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈溶液，蒸干后以水為溶劑復(fù)溶，其天麻素保留時間及峰面積積分值均無大的變化，220 nm檢測，未產(chǎn)生除天麻素以外的色譜峰。根據(jù)表4，天麻素在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中，24 h內(nèi)r值均小于1，穩(wěn)定性良好。

天麻素在稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈三種不同溶劑中的存在形式發(fā)生變化，且各不相同。分析原因可能是天麻素與以上三種溶劑發(fā)生不同程度的反應(yīng)生成了不同的物質(zhì)［9］。在對上述溶液蒸干，以水為溶劑復(fù)溶后，進(jìn)行高相液相檢測，檢測波長為220 nm時，均只有一個與天麻素對照品相對應(yīng)的色譜峰，未見有其他色譜峰出現(xiàn)，提示天麻素在稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈中發(fā)生的反應(yīng)是可逆的。在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中，天麻素雖然保留時間不同，但未反應(yīng)生成其他物質(zhì)，根據(jù)穩(wěn)定性考察結(jié)果，天麻素在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中，24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。天麻素測定過程中為減少雜質(zhì)干擾，可能需要選擇甲醇、乙醇等溶劑提取制備供試品溶液?？蓪⒐┰嚻啡芤赫舾梢运蛞译?0.05%磷酸溶液（3∶97）復(fù)溶的方法，避免天麻素與甲醇、乙醇等溶劑的可逆反應(yīng)對含量造成的影響。

［1］劉衛(wèi)，王中師，宋書偉，等.鉤藤總堿與天麻素聯(lián)用對自發(fā)性高血壓大鼠血壓和血壓變異性的影響［J］.中華高血壓雜志，2012，20（6）：570-574.

［2］國家藥典委員會.中國藥典2015年版：一部［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

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［5］國家藥典委員會.中國藥典2015年版：四部［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

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［2016-04-12收稿，2016-05-10修回］［本文編輯：劉一洋］

Research on stability of Gastrodin in different solvents

YANG Xue-ping①，LIU Wei，SUN Xin，et al.①Department of Pharmacy，the Pepole's Hospital of Fushan District，Yantai，Shandong 265500，China

ObjectiveTo investigate the stability of gastrodin in different solvents.MethodsHPLC method was used to analyse the stability of gastrodin's in 50%ethanol，50%methanol，50%methyl cyanides，water and methyl cyanides-0.5%phosphoric acid.Then the retention time and peak area of gastrodin in different solvents were compared.ResultsThere were great differences in stability of gastrodin in different solvents.In water and methyl cyanides-0.5%phosphoric acid no new substance was formed.But some transformed to other new substances in 50%ethanol，50%methanol，50%methyl cyanides.ConclusionGastrodin is of instability in 50%ethanol，50%methanol，50%methyl cyanides.If using those as solvent，it should be evaporated and dissolved by water.

Gastrodin；Extraction solvent；Stability

R917

A

265500山東煙臺，煙臺市福山區(qū)人民醫(yī)院（楊雪萍）；271000山東泰安，解放軍88醫(yī)院藥劑科（劉衛(wèi)，孫昕，袁紅英）

袁紅英，Email：tayuanhongying@163.com