吳明光

（山東省萊州市曲家畜牧獸醫(yī)站261400）

相關(guān)文獻報道了我國奶牛存欄量大約在1440萬頭，奶牛隱性乳房炎的陽性率在46～80%，嚴重影響奶牛生產(chǎn)性能。奶牛乳房炎是奶牛養(yǎng)殖過程中常見的疾病之一[1]，具有發(fā)病率高，難以治愈、病因復雜等特點。病原微生物金黃色葡萄球菌、鏈球菌和大腸桿菌等是引起奶牛乳房炎的主要病原菌。病原微生物金黃色葡萄球菌、鏈球菌和大腸桿菌這3種菌也是引起隱性乳房炎的主要病原菌。致病性大腸桿菌廣泛存在環(huán)境中，導致奶牛乳房炎的發(fā)病率相對較高，且無明顯季節(jié)性。當致病性大腸桿菌通過多種途徑侵入奶牛乳房組織后，引發(fā)奶牛炎癥反應，引起乳房炎。致病性大腸桿菌引起的奶牛乳房炎多見于高產(chǎn)奶牛及產(chǎn)后泌乳高峰期奶牛。本實驗對采集患乳房炎牛奶樣品中分離到大腸桿菌，該菌具有很強的致病性，對分離的致病性大腸桿菌進行藥敏試驗，分析其耐藥性，為奶牛乳房炎的防治提供研究基礎(chǔ)。

1 病料來源

某地區(qū)奶牛養(yǎng)殖場，采集患乳房炎奶牛鮮奶樣品，采集樣品時對乳頭進行消毒，無菌采集乳樣，進行細菌分離鑒定。

2 細菌的分離鑒定

對采集的乳樣，按照1∶100比例接種到滅菌營養(yǎng)肉湯中，37℃恒溫培養(yǎng)12～16h后，并接種于麥康凱培養(yǎng)基上，37℃恒溫培養(yǎng)12～16h后，挑取典優(yōu)勢菌落接種到伊紅美藍培養(yǎng)基培養(yǎng)后，革蘭氏染色試劑盒對分離的細菌進行染色鏡檢。結(jié)果顯示，分離菌株在營養(yǎng)肉湯中培養(yǎng)后，營養(yǎng)肉湯呈現(xiàn)混色、不透明狀態(tài)；分離菌株在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上長出粉紅色、濕潤的扁圓、邊緣光滑整齊菌落；分離菌株在伊紅美蘭培養(yǎng)基上長出深紫帶金屬光澤的圓形、中間黑色菌落；革蘭氏染色鏡檢可見，分離菌株為陰性菌，呈現(xiàn)兩端鈍圓、桿狀菌。

3 細菌的生化試驗

挑取伊紅美藍培養(yǎng)基優(yōu)勢菌落，接種到生化試管中[2]，37℃恒溫培養(yǎng)24h后，對分離菌株進行生化特性鑒定，結(jié)果顯示，分離菌株分解甘露醇、葡萄糖、海藻糖、麥芽糖、阿拉伯糖、鼠李糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，V-P試驗為陰性、吲哚試驗為陽性。

4 分離菌株的致病性試驗

將培養(yǎng)好的大腸桿菌口服方式攻毒小白鼠5只，每只小白鼠攻毒劑量為0.5ml，另外5只小白鼠口服等量生理鹽水，觀察7d，結(jié)果顯示，攻毒的5只小鼠死亡率為100%，另外5只小鼠健康存活。證實分離的大腸桿菌具有很強的致病性。

5 藥敏試驗

藥敏試驗結(jié)果顯示，分離的致病性大腸桿菌對氟苯尼考、頭孢曲松、頭孢他啶、恩諾沙星4種藥物高度敏感；對新霉素、慶大霉素、多西環(huán)素、阿莫西林、阿米卡星、青霉素、卡娜霉素7種藥物耐藥。

6 小結(jié)

引起奶牛乳房炎的病原菌為致病性大腸桿菌，藥敏試驗結(jié)果顯示，對氟苯尼考、頭孢曲松、頭孢他啶、恩諾沙星4種藥物高度敏感。

[1]謝昆,蔣成硯,劉杰,等.奶牛隱性乳房炎大腸桿菌的分離鑒定及藥敏試驗[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2016,(12下)：107-109.

[2]羅志堯,陳天來.奶牛隱性乳房炎大腸桿菌的鑒定與藥敏試驗[J].江西畜牧獸醫(yī)雜志,2013(4):11-14.