郭 焰，李 巖，白羽嘉，黃文書(shū)，馮作山

（1.新疆輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830021；2.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830052）

新疆玫瑰花中二十八烷醇測(cè)定分析與應(yīng)用研究

郭 焰1，李 巖1，白羽嘉2，黃文書(shū)2，馮作山2

（1.新疆輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830021；2.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830052）

以新疆玫瑰花為研究對(duì)象，建立玫瑰花中二十八烷醇的GC-FID檢測(cè)方法。樣品經(jīng)提取、皂化和濃縮后進(jìn)行氣相色譜分析，采用氫火焰離子化檢測(cè)器測(cè)定二十八烷醇的含量。結(jié)果表明，在400～1 600 μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，該方法的線(xiàn)性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.987 0，精密度試驗(yàn)RSD為0.85%，檢出限為1.5 μg/mL，提取的玫瑰花粗蠟質(zhì)中二十八烷醇含量為23.16%。

玫瑰花；二十八烷醇；氣相色譜法；應(yīng)用

隨著“一帶一路”特別是核心區(qū)的建設(shè)，新疆經(jīng)濟(jì)建設(shè)迎來(lái)了新機(jī)遇，需要調(diào)整優(yōu)化產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，培育新的增長(zhǎng)點(diǎn)。因此，可以通過(guò)發(fā)展特色農(nóng)業(yè)，提升林果業(yè)發(fā)展水平來(lái)發(fā)揮新疆的優(yōu)勢(shì)。新疆南疆地區(qū)野生玫瑰資源豐富，這里的玫瑰花主要用于加工玫瑰精油、玫瑰醬、玫瑰花茶等，產(chǎn)品品種少、附加值低，未能充分利用玫瑰花較高的藥用價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[1]。

玫瑰花中含有多種具有顯著生物活性的物質(zhì)是很好的功能食品原料，玫瑰花蠟質(zhì)中含有的活性物質(zhì)二十八烷醇就是其中較為重要的一種。二十八烷醇是被世界公認(rèn)的具有抗疲勞、增強(qiáng)體能、降低血脂、延緩衰老等作用的物質(zhì)，受到健康食品行業(yè)的推崇，已成為新型功能性食品添加劑和功能性食品的基料[2-5]。

試驗(yàn)以新疆喀什玫瑰花為研究對(duì)象，采用氫火焰離子化檢測(cè)器（FID)，建立了GC-FID測(cè)定玫瑰花中二十八烷醇的方法。該方法樣品前處理簡(jiǎn)單，具有快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，為后期從玫瑰花中提取分離二十八烷醇和玫瑰花的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

新鮮玫瑰花，新疆喀什玫源公司提供，經(jīng)干燥、粉碎，過(guò)20目篩，制得玫瑰花粉；二十八烷醇（標(biāo)準(zhǔn)品），純度＞99.0%，Sigma公司提供；環(huán)己烷、丙酮、乙酸乙酯、聚丙二醇，為優(yōu)級(jí)純，天津市化學(xué)試劑三廠(chǎng)提供；超純水。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 6890N型氣相色譜儀、氫火焰離子化檢測(cè)器（FID），美國(guó)Agilent公司產(chǎn)品；N-1001型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海愛(ài)朗儀器有限公司產(chǎn)品；HH-4型數(shù)顯恒溫水浴鍋，江蘇省金壇市環(huán)宇科學(xué)儀器廠(chǎng)產(chǎn)品；FW-100型高速萬(wàn)能粉碎機(jī)，北京市永光明醫(yī)療儀器廠(chǎng)產(chǎn)品；TGL-16gR型高速冷凍離心機(jī)，湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司產(chǎn)品；BS224S型分析天平，北京賽多利斯儀器設(shè)備有限公司產(chǎn)品；超純水儀，艾柯公司產(chǎn)品；KQ-100E型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司產(chǎn)品；SHZ-C型循環(huán)水式多用真空泵，江蘇科興儀器廠(chǎng)產(chǎn)品。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品處理液制備

精確稱(chēng)取10.00 g（準(zhǔn)確至0.001 g）玫瑰花粉于磨口的三角瓶中，加入乙酸乙酯（料液比1∶15），于60℃水浴均質(zhì)2 h，并經(jīng)常搖動(dòng)。浸提后過(guò)濾，并向?yàn)V渣加入同等料液比的乙酸乙酯，進(jìn)行二次浸提，共提取5次；合并濾液后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于75℃條件下濃縮，于50℃條件下真空干燥至恒質(zhì)量，得玫瑰花粗蠟質(zhì)。

精確稱(chēng)取上述提取的玫瑰花蠟質(zhì)1.00 g（準(zhǔn)確至0.001 g）于磨口三角瓶中，加熱使蠟質(zhì)熔化，準(zhǔn)確加入5.17 mL的0.5 mol/L KOH溶液和0.05 g聚丙二醇，在90℃下回流4 h，對(duì)蠟質(zhì)進(jìn)行皂化[2]。

皂化產(chǎn)物經(jīng)丙酮抽提、真空干燥后得到白色片狀物質(zhì)，即為含二十八烷醇的高級(jí)脂肪醇混合物。將此混合物溶于5 mL環(huán)己烷中，超聲波振蕩溶解后全部轉(zhuǎn)入10 mL容量瓶中，用環(huán)己烷定容至刻度，進(jìn)行GC分析。

1.3.2 二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液制備

精確稱(chēng)取二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)樣品0.050 0 g于25 mL容量瓶中，加入15 mL環(huán)己烷在40℃超聲波下溶解，用環(huán)己烷定容稀釋至刻度，作為二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。于4℃條件下避光保存。分別吸取1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 mL二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液置于5 mL容量瓶中，用環(huán)己烷定容至刻度，配成0.40，0.80，1.20，1.60，2.00 mg/mL二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)使用液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.3.3 氣相色譜條件

色譜柱：毛細(xì)管柱，HP-5型（30 m×0.32 mm，膜厚0.25 μm）；載氣：高純氮，純度≥99.999%；恒流50 mL/min；柱溫（程序升溫）：于240℃條件下保持1 min，以20℃/min的速度升至300℃，于300℃條件下保持10 min；進(jìn)樣口溫度：300℃；檢測(cè)器溫度：330℃；氫氣（H2）流速：50 mL/min；助燃?xì)猓╝ir） 流速：450 mL/min；進(jìn)樣量：1 μL，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣1 min后開(kāi)閥；進(jìn)樣方式：自動(dòng)進(jìn)樣。1.3.4 二十八烷醇含量的測(cè)定

準(zhǔn)確吸取二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)液和樣品處理液各1 μL，按照上述氣相色譜條件，采用外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法測(cè)定玫瑰花中二十八烷醇的含量[6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 定性試驗(yàn)

將二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)品和樣品進(jìn)行氣相色譜檢測(cè)，得到二十八烷醇標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間為15.853 min。

2.2 線(xiàn)性范圍

分別吸取標(biāo)準(zhǔn)使用液各1.00 μL，測(cè)定其色譜峰面積。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得線(xiàn)性回歸方程：Y=401.718 57X-55.929 22，二十八烷醇在400～1 600 μg/mL范圍內(nèi)，其質(zhì)量濃度和峰面積呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.987 0[6-7]。

2.3 測(cè)定結(jié)果

樣品溶液經(jīng)氣相色譜測(cè)定，得到樣品溶液中二十八烷醇的峰面積值。將峰面積值代入回歸方程得樣品溶液中二十八烷醇質(zhì)量濃度0.989 0 mg/mL，皂化后經(jīng)丙酮抽提得到的混合高級(jí)醇中二十八烷醇含量為23.16%[6]。

2.4 精密度與檢出限

精密度是指在相同條件下多次重復(fù)測(cè)定結(jié)果之間相符合的程度。在上述色譜條件下對(duì)同一樣品進(jìn)行6次平行測(cè)定，得到精密度試驗(yàn)RSD為0.85%，GC-FID方法精密度較好。

取接近噪音（信噪比S/N＞3）濃度的樣液按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，目標(biāo)物的最低檢出質(zhì)量濃度為1.5 μg/mL。對(duì)照《蜂蠟中二十八烷醇、三十烷醇的測(cè)定-氣相色譜法》編制說(shuō)明的征求意見(jiàn)稿中，其方法檢出限為5 mg/L，因此該方法檢出限合理。

3 討論與應(yīng)用

美國(guó)依利諾依大學(xué)運(yùn)動(dòng)健康研究所最先從小麥胚芽油中提取出二十八烷醇，經(jīng)過(guò)分析與測(cè)試研究，結(jié)果表明二十八烷醇具有多種生理功能。主要表現(xiàn)在能增強(qiáng)體力、精力、耐力；提高應(yīng)激能力與反應(yīng)靈敏性；改善機(jī)體氧利用率與心肌營(yíng)養(yǎng)；降低甘油三酯、血清膽固醇含量等方面。目前，美國(guó)和日本已將二十八烷醇廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、功能性食品、化妝品等中。尤其日本的二十八烷醇應(yīng)用開(kāi)發(fā)及其商品化趨勢(shì)非常迅猛，相關(guān)產(chǎn)品產(chǎn)值突破10億日元?，F(xiàn)在，我國(guó)對(duì)二十八烷醇的研究及其在新原料、新技術(shù)、新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)與用途等方面也逐漸加以重視[8-9]。

在我國(guó)，醫(yī)藥工業(yè)的應(yīng)用是以二十八烷醇開(kāi)發(fā)藥品為主，如護(hù)肝、降血脂、預(yù)防骨質(zhì)疏松等藥物的研究開(kāi)發(fā)。浙江醫(yī)學(xué)院研制的“力源膠囊”一藥，具有增加血清蛋白、增強(qiáng)體能、降低肝臟脂質(zhì)的作用，已進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)且通過(guò)[10]。

在保健品產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用，主要是針對(duì)運(yùn)動(dòng)員，利用二十八烷醇能增強(qiáng)人體的精力與耐力、有助于減輕體重、補(bǔ)充能量消耗等功效開(kāi)發(fā)體育運(yùn)動(dòng)保健系列功能性食品。利用二十八烷醇能夠減少血液中的過(guò)多鈣質(zhì)、降低甘油三酯和血清膽固醇含量的效用，開(kāi)發(fā)有助于治療骨質(zhì)疏松癥、高膽固醇及預(yù)防心腦血管疾病的保健系列功能性食品[11-12]。白樹(shù)民等人[13]在食品中添加二十八烷醇，研究其對(duì)尾吊大鼠部分生理指標(biāo)的影響，得出添加二十八烷醇的食物使尾吊大鼠胸腺質(zhì)量增加明顯，對(duì)紅血細(xì)胞膜的流動(dòng)性有一定改善，且顯著改善股骨生物學(xué)性能。未來(lái)，二十八烷醇可能會(huì)成為航天員保健系列功能食品中的重要組分之一。曹志然等人[14]在杏仁露飲品中添加二十八烷醇，研究其對(duì)機(jī)體免疫能力、運(yùn)動(dòng)耐力的影響，已取得一些較好的成果。

4 結(jié)論

通過(guò)建立新疆玫瑰花中二十八烷醇的GC-FID測(cè)定法，以乙酸乙酯為提取劑，用KOH和聚丙二醇對(duì)玫瑰花蠟質(zhì)進(jìn)行皂化，皂化產(chǎn)物經(jīng)丙酮抽提后采用FID測(cè)定二十八烷醇的含量。結(jié)果表明，玫瑰花中二十八烷醇質(zhì)量濃度400～1 600 μg/mL時(shí)，線(xiàn)性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.987 0，精密度試驗(yàn)RSD為0.85%，檢出限為0.5 μg/mL，提取的玫瑰花粗蠟質(zhì)中二十八烷醇含量為23.16%。該方法檢測(cè)靈敏度高、定量準(zhǔn)確性高。

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[11]宋建華，陳明德.新型健康食品添加劑二十八烷醇的開(kāi)發(fā)研究 [J].廈門(mén)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），1998，37（3）：414-418.

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[14]曹志然，李利平，徐月清，等.二十八烷醇對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫功能及游泳耐力的影響 [J].食品科學(xué)，2004，25（7）：158-160.◇

Determination and Analysis of Octacosanol in Xinjiang Rose

GUO Yan1，LI Yan1，BAI Yujia2，HUANG Wenshu2，F(xiàn)ENG Zuoshan2
（1.Xinjiang Institute of Ling Industry Vocational and Technical，Urumqi，Xinjiang 830021，China；2.College of Food Scicnce and Medicine，Xinjiang Agricultural University，Urumqi，Xinjiang 830052，China）

Taking Xinjiang Rose as the subject of research，a determination method about content of octacosanol of rose is established with GC-FID.The method consists of extraction，saponification，concentration and GC analysis.The GC analysis is carried out by using hydrogen flame ionization detector.The results show that there is a good linear relationship（R2=0.987 0）in the range of 400～1 600 μg/mL，with the relative standard deviation of precision（RSD）is 0.85%and the limit of detection（LOD）is 1.5 μg/mL.Octacosanol content is 23.16%in the crude wax.

rose；octacosanol；gas chromatography；application

TS201.2

A

10.16693/j.cnki.1671-9646（X）.2017.01.048

1671-9646（2017）01b-0037-03

2016-12-08

郭 焰（1967— ），女，碩士，教授，研究方向?yàn)槭称芳庸づc檢測(cè)技術(shù)。