陳科云
摘要:論文旨在做好生物組織有機(jī)化合物的顯色反應(yīng)原理,通過(guò)分析生物組織中糖類(lèi)、脂類(lèi)和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定顯色反應(yīng)的機(jī)理,探討了可溶性還原糖鑒定的反應(yīng)原理,明確了蛋白質(zhì)鑒定反應(yīng)原理,在雙縮脲試劑鑒定過(guò)程,實(shí)現(xiàn)肽鍵試劑的有效鑒定。在生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的顯色反應(yīng)過(guò)程,還存在負(fù)反應(yīng),尤其是蛋白質(zhì)鑒定過(guò)程,發(fā)生了蛋白質(zhì)變性現(xiàn)象。在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程,結(jié)合還原糖以及蛋白質(zhì)的有效鑒定,現(xiàn)配現(xiàn)用斐林試劑,做好生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)的有效檢測(cè),也要合理掌握滴加夜的滴加量和滴加濃度,避免出現(xiàn)過(guò)量和過(guò)快的滴加過(guò)程,同時(shí)也要避免出現(xiàn)負(fù)反應(yīng)。
關(guān)鍵詞:生物組織;糖類(lèi);脂肪;蛋白質(zhì);顯色反應(yīng);檢測(cè)
G633.91
生物課程的教材改革越來(lái)越注重內(nèi)容的創(chuàng)新,同時(shí)也要做好關(guān)鍵知識(shí)點(diǎn)的有效教學(xué),對(duì)于生物組織中有機(jī)化合物的反應(yīng)原理而言,更要分析三大有機(jī)化合物的顯色反應(yīng)過(guò)程,盡可能的確定糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)中的不同顯色反應(yīng)機(jī)理,總結(jié)注意事項(xiàng),綜合提升生物知識(shí)儲(chǔ)備能力。對(duì)于生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的顯色反應(yīng)機(jī)理究竟如何始終是生物老師教學(xué)高度重視的一個(gè)問(wèn)題+[1]。因此論文對(duì)生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)阿金側(cè)鑒定的顯色反應(yīng)機(jī)理進(jìn)行研究有一定的現(xiàn)實(shí)意義。
一、生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的顯色反應(yīng)
糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)作為生物組織中的三大有機(jī)化合物,糖類(lèi)中的淀粉一旦遇到碘,將會(huì)呈現(xiàn)出藍(lán)色,就可溶性還原糖而言,一旦和斐林試劑發(fā)生反應(yīng),有磚紅色沉淀,同時(shí)脂肪和蘇丹III反應(yīng),出現(xiàn)橘黃色的反應(yīng),和蘇丹IV反應(yīng),出現(xiàn)紅色。蛋白質(zhì)一旦和雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng),將會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng),這種顯色反應(yīng)作用下,生物質(zhì)中糖類(lèi)可以進(jìn)行有效的判定,同時(shí)也可以鑒定蛋白質(zhì)和脂肪。
關(guān)于顯色反應(yīng)原理的探究,始終是生物界高度重視的一個(gè)焦點(diǎn),在有機(jī)化合物的處理過(guò)程,結(jié)合多種有機(jī)化合物的反應(yīng)原理,借助于多種試劑實(shí)現(xiàn)有效的顯色反應(yīng)處理,實(shí)現(xiàn)化合物的鑒定。關(guān)于染色劑的吸附顯色過(guò)程,主要是做好還原性糖和蛋白質(zhì)的有效鑒定過(guò)程,分析和試劑發(fā)生的作用,并結(jié)合顯色現(xiàn)象,進(jìn)而做好鑒定[2]。
基于可溶性還原糖鑒定的過(guò)程,確定類(lèi)似反應(yīng)原理,確定可溶性還原糖的結(jié)構(gòu),主要是可溶性還原糖存在醛基糖結(jié)構(gòu),同時(shí)也存在堿性果糖溶液和麥芽糖,葡萄糖和果糖作為同分異構(gòu)體,而葡萄糖中一般有醛基,但是果糖具有酮基并沒(méi)有醛基,溶液稀釋的過(guò)程,出現(xiàn)了互變異構(gòu)。
稀堿溶液用果糖稀釋的過(guò)程,出現(xiàn)了還原性的反應(yīng),同時(shí)還原性糖常伴有醛基反應(yīng),在和斐林試劑反應(yīng)的時(shí)候,氫氧化銅和可溶性還原糖出現(xiàn)了氧化還原反應(yīng),而藍(lán)色氫氧化銅也伴有磚紅色氧化亞銅,這一反應(yīng)的進(jìn)行,還原糖存在。
脂肪鑒定的過(guò)程,蘇丹III一旦融入脂肪,溶解度比較大,脂肪生物組織得到有效的處理,同時(shí)對(duì)于酒精中的蘇丹III而言,和脂肪發(fā)生反應(yīng),脂肪呈現(xiàn)出橘黃色。關(guān)于蛋白質(zhì)的鑒定過(guò)程,主要是確定雙縮脲的試劑成分,確定氫氧化鈉溶液以及質(zhì)量濃度,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)硫酸銅溶液的分析,在堿性溶液作用下,往往和銅離子發(fā)生反應(yīng),并伴有紫紅色絡(luò)合物沉淀。
關(guān)于蛋白質(zhì)鑒定的一種反應(yīng)原理而言,主要是結(jié)合蛋白質(zhì)鑒定的試劑,并借助于雙縮脲實(shí)際確定蛋白質(zhì)顯色反應(yīng),雙縮脲分子一旦發(fā)生縮合反應(yīng),將會(huì)失去一分子氨,分子中和蛋白質(zhì)一樣存在肽鍵,同時(shí)堿性溶液作用下,出現(xiàn)了大量的化學(xué)反應(yīng),并出現(xiàn)了紫色銅離子羅何物,基于肽鍵和物質(zhì)反應(yīng)過(guò)程,常伴有紫色銅離子絡(luò)合物,這一反應(yīng)過(guò)程中需要分析生物組織蛋白質(zhì)的存在。
二、 生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定可能存在的負(fù)反應(yīng)
基于生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定中的問(wèn)題分析,就要做好蘋(píng)果組織樣液的加熱過(guò)程,一旦加入斐林試劑之后,將會(huì)出現(xiàn)受熱現(xiàn)象,黑色沉淀逐步產(chǎn)生,斐林試劑也伴有黑色沉淀,主要是氫氧化銅逐步的分解了氧化銅,在磚紅色沉淀之后,也出現(xiàn)了變黑的現(xiàn)象,也即是氧化了氧化亞銅,進(jìn)而出現(xiàn)了氧化銅[3]。鑒定蛋白質(zhì)的時(shí)候,需要做好蛋清液的稀釋工作,逐步的滴加硫酸銅,乳白色沉淀逐步產(chǎn)生,在重金屬鹽出現(xiàn)變性之后,變小了實(shí)際的溶解度,同時(shí)實(shí)驗(yàn)也伴有蛋白質(zhì)的變性,這種蛋白質(zhì)變性不僅僅和溫度有關(guān),同時(shí)也和堿性強(qiáng)度有著直接的關(guān)聯(lián),一旦過(guò)強(qiáng)受熱和過(guò)強(qiáng)堿性,都會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性[4]。鑒定蛋白質(zhì)的時(shí)候,需要控制硫酸銅的滴加速度,一旦有過(guò)量和過(guò)快的滴加速度,藍(lán)色沉淀產(chǎn)生,硫酸銅和氫氧化鈉出現(xiàn)了藍(lán)色氫氧化銅沉淀。
三、生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的相關(guān)注意事項(xiàng)
還原糖和蛋白質(zhì)鑒定階段,就要避免出現(xiàn)負(fù)反應(yīng),保證有著規(guī)范化的操作。關(guān)于斐林試劑的使用,需要本著現(xiàn)配現(xiàn)用的基本原則,在斐林試劑以及蘋(píng)果組織樣液混合之后,實(shí)現(xiàn)充分的加熱處理。
蛋清液的稀釋之后,可以使用蒸餾水,避免蛋清液的加熱,同時(shí)鑒定的過(guò)程,避免滴加硫酸銅,需要充分均勻氫氧化鈉溶液,在硫酸銅滴加之后,避免有過(guò)快的滴加速度,進(jìn)行邊滴加邊振蕩的過(guò)程。而硫酸銅溶液一旦為0.05g/mL時(shí),就要滴加2滴左右,硫酸銅溶液的濃度為0.05g/mL事,就要滴加4滴左右。關(guān)于氫氧化鈉濃度而言,避免濃度的過(guò)大,確定氫氧化鈉的低濃度添加。
總而言之,生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定時(shí),就要分析三大有機(jī)物的反應(yīng)過(guò)程,做好糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的顯色原理分析,合理使用滴加夜,并結(jié)合不同化合物的基本反應(yīng)要求,避免出現(xiàn)負(fù)反應(yīng)。鑒定蛋白質(zhì)的時(shí)候,需要做好蛋清液的稀釋工作,逐步的滴加硫酸銅,乳白色沉淀逐步產(chǎn)生。蛋白質(zhì)的鑒定過(guò)程,主要是確定雙縮脲的試劑成分,確定氫氧化鈉溶液以及質(zhì)量濃度,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)硫酸銅溶液的分析。對(duì)于斐林試劑的使用,需要本著現(xiàn)配現(xiàn)用的基本原則,在斐林試劑以及蘋(píng)果組織樣液混合之后,實(shí)現(xiàn)充分的加熱處理。
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