秦延春 陳國龍 盧玉文韋錦福 吳章榮 陳德榮 丘獻(xiàn)娟 曹本雄 廖芳賢 李永明 高為民

（玉林市微生物研究所/廣西食用菌創(chuàng)新團(tuán)隊玉林綜合試驗站，廣西玉林537000）

圖1 分離培養(yǎng)出毛木耳（容耳1號）

毛木耳柔滑可口，清香脆嫩，味鮮香濃，尤其是其風(fēng)味獨特，品質(zhì)上乘，為眾多菌類品種所不及。毛木耳食用、藥用價值高，不但可鮮銷，還可烘干作為干品銷售，近年來市場價格穩(wěn)中有升。由于毛木耳栽培受地域氣候影響較大，且品種繁多，但真正適合廣西氣候的品種較少，而在廣西氣候條件下生長的大容山野生毛木耳香甜脆嫩。為此，筆者進(jìn)行了大容山野生毛木耳的分離與栽培試驗，現(xiàn)將試驗結(jié)果總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 母種分離2013年3月在大容山周邊鄉(xiāng)鎮(zhèn)小平山、北市、新圩、民樂等進(jìn)行野生毛木耳生長環(huán)境調(diào)查，并采集了野生毛木耳。將采集的毛木耳子實體帶回實驗室分離培養(yǎng)。方法是先將子實體的泥土清理干凈，采用組織分離的方法在無菌條件下進(jìn)行操作，分離時選擇朵型正常，無病蟲生長健壯的毛木耳子實體。分離取材按基部、距基部1 cm處、邊緣三個部位。培養(yǎng)基采用PDA加富培養(yǎng)基，在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)，獲得毛木耳菌種（暫命名為：容耳1號）用作試驗菌種。

1.2 馴化試驗

1.2.1 菌絲生長溫度范圍測定 2013年4月進(jìn)行了菌絲生長溫度范圍的測定。將擴(kuò)大培養(yǎng)的毛木耳菌絲接到PDA加富培養(yǎng)基斜面試管上，置于5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，每個溫度處理培養(yǎng)5支試管。接種10 d后測量菌絲生長速度（mm/d）（方法：菌絲生長前端距試管底部的距離除以菌絲生長天數(shù)，再取平均數(shù)）。同時觀察菌絲形態(tài)特征。

1.2.2 不同母種培養(yǎng)基配方篩選 試驗設(shè)計了5種母種培養(yǎng)基配方（1000 mL）：①馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g。②馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，硫酸鎂2 g，磷酸二氫鉀2 g。③馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，硫酸鎂2 g，磷酸二氫鉀2 g，蛋白胨2 g。④馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，硫酸鎂2 g，磷酸二氫鉀2 g，蛋白胨4 g。⑤馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，硫酸鎂2 g，磷酸二氫鉀2 g，麩皮20 g。2013年5月，將分離純化好的毛木耳母種擴(kuò)大培養(yǎng)，取菌齡相同0.5 cm大小的接種塊分別接入試管斜面中，每個配方設(shè)3個重復(fù)，共接15支斜面試管。接好后放置25℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，接種10 d后測量菌絲生長速度（mm/d），并觀察菌絲形態(tài)特征。

1.2.3 母種培養(yǎng)基pH篩選 對PDA加富培養(yǎng)基設(shè)置了6個pH梯度：4、5、6、7、8和9。將純化好的毛木耳母種擴(kuò)大培養(yǎng)，取菌齡相同0.5 cm大小的接種塊分別接入上述試管斜面中，每個pH處理設(shè)3個重復(fù)共接18支斜面。接好后放置25℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，接種10 d后測量菌絲生長速度（mm/d），并觀察菌絲形態(tài)特征。

1.2.4 原種及栽培種培養(yǎng)試驗 原種和栽培種用相同的培養(yǎng)基，試驗設(shè)5種培養(yǎng)基配方：①木屑68%、棉子殼15%、麩皮15%、石膏1%、磷酸鈣1%；②木屑78%、棉子殼19%、石灰2%、磷酸鈣1%；③木屑97%、石膏1%、磷酸鈣2%；以上各配方培養(yǎng)料按照常規(guī)制作，高壓蒸汽滅菌→冷卻→無菌室接種，每個配方設(shè)5個重復(fù)，共接15袋。接好后放置25℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，觀察菌絲形態(tài)特征。

1.2.5 栽培試驗 出耳溫度試驗：試驗設(shè)計了低溫（15℃±3℃）出耳，常溫（25℃±3℃）出耳，35℃±3℃以上出耳，共3個處理。

袋栽試驗：當(dāng)菌棒袋壁上的菌絲扭結(jié)凸起時，即原基形成時，在袋壁用刀劃“V”形口，噴霧保濕，保持空氣相對濕度在85%～90%，促進(jìn)子實體迅速生長。

段木栽培試驗：當(dāng)耳木含水量為40%～45%時，將耳木放入稀石灰水中浸泡1 h左右，取出晾干，打孔，接種，噴水保濕發(fā)菌，觀察出耳情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 大容山毛木耳不同部位組織分離培養(yǎng)結(jié)果從表1看出，毛木耳子實體不同部位組織分離成功率存在較大差異：基部組織分離成功率較低，只有60%；邊緣的組織分離成功率稍高，為80%；距基部1 cm處的組織分離成功率最高，達(dá)90%。毛木耳子實體不同部位組織分離菌絲在同一培養(yǎng)基內(nèi)的生長速度及長勢存在一定的差異：基部和距基部1 cm處組織分離的菌絲不但生長速度快，而且表現(xiàn)出較好的生長勢，即生長旺盛、菌絲前端整齊、潔白濃密、粗壯有力；而邊緣組織分離的菌絲生長速度慢，長勢表現(xiàn)一般，前端不夠整齊、菌絲較為稀疏、顏色偏淡。

表1 大容山野生毛木耳不同部位分離菌絲生長情況（培養(yǎng)溫度25～28℃）

2.2 菌絲培養(yǎng)溫度試驗結(jié)果由表2可見，不同溫度對野生毛木耳菌絲生長的影響不同。菌絲生長溫度范圍為15～25℃，適宜的溫度是20～25℃，最佳溫度25℃，菌絲長勢旺盛，菌絲濃密，整齊，菌絲生長速度達(dá)5.8 mm/d。當(dāng)溫度在高于35℃低于5℃時，菌絲不生長；溫度低于15℃以下菌絲生長緩慢、微弱。

表2 不同溫度對大容山野生毛木耳菌絲生長的影響

2.3 母種培養(yǎng)基試驗結(jié)果由表3可見，在配方④和⑤培養(yǎng)基上，毛木耳菌絲濃密，生長旺盛，菌絲邊緣整齊度好，生長速度快，分別為6.01 mm/d，6.18 mm/d。由此可見蛋白胨和麩皮可以提供豐富的營養(yǎng)元素適宜毛木耳菌絲的生長。

表3 5種培養(yǎng)基中大容山毛木耳菌絲生長情況

2.4 母種培養(yǎng)基pH試驗結(jié)果由表4可見，大容山野生毛木耳在不同pH條件下菌絲前端整齊度、菌絲濃密、菌絲長勢、菌絲生長速度有所不同。pH為6時，菌絲前端整齊、濃密、長勢好，生長速度最快，為6.11 mm/d；pH為9時，菌絲微弱，菌絲稀疏，不整齊，生長速度僅為3.08 mm/d，在其他pH下的菌絲生長速度為：pH7＞pH5＞pH4＞pH8。

表4 不同p H大容山野生毛木耳菌絲生長情況

2.5 不同原種培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果配方①毛木耳菌絲生長旺盛，菌絲濃密，菌絲前端整齊，菌絲滿袋需25～28 d；配方②毛木耳菌絲密，長勢一般，整齊度一般，菌絲滿袋需30～35 d；配方③毛木耳菌絲稀疏，長勢弱，前端不整齊，菌絲滿袋需32～38 d。毛木耳在供試三種培養(yǎng)基上均能生長，其中配方①培養(yǎng)基菌絲長勢優(yōu)于另兩個培養(yǎng)基，菌絲滿袋時間也早于另兩個培養(yǎng)基。

表6 毛木耳不同栽培方式出耳情況

2.6 栽培試驗結(jié)果由表6可見，毛木耳在15℃低溫出耳的一組、25℃處理的一組和35℃以上處理一組都可以出耳，出耳最適溫度為25℃處理的一組；毛木耳栽培方式上適宜袋栽，段木栽培在25℃處理的一組子實體長勢一般。

3 小 結(jié)

試驗表明：大容山野生毛木耳菌絲最適宜生長溫度為20～25℃；最適宜生長pH 6～7；最適宜出耳溫度25～30℃，溫度太低或太高對毛木耳菌絲體的生長均不利；出耳不需要溫差，屬于中溫恒溫型菇類；菌絲在添加4 g蛋白胨的PDA加富母種培養(yǎng)基和添加20 g麩皮的PDA加富母種培養(yǎng)基生長較好，說明毛木耳菌絲生長要求的氮素營養(yǎng)較高，為此在生產(chǎn)中要添加適量的餅粉、麩皮、玉米粉等含氮物質(zhì)。