黑占財(cái) 張繼元王淑琴董 偉沈艷麗

(1.西寧市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,青海西寧 810000; 2.青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,青海西寧 810000)

不同免疫程序?qū)ωi口蹄疫疫苗抗體產(chǎn)生的影響

黑占財(cái)1張繼元1王淑琴1董 偉1沈艷麗2

(1.西寧市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,青海西寧 810000; 2.青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,青海西寧 810000)

為進(jìn)一步驗(yàn)證多重免疫同時(shí)進(jìn)行的可行性，以減少生豬的疫苗接種次數(shù)及應(yīng)激反應(yīng)，試驗(yàn)針對開展口蹄疫（FMD）、豬瘟（CSF）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）三種疫苗同時(shí)免疫效果觀察。結(jié)果表明：采用 FMD、CSF、PRRS 三種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射免疫效果達(dá)到預(yù)期目標(biāo)。

免疫程序 豬口蹄疫 豬瘟 豬繁殖與呼吸綜合征 抗體

口蹄疫（FMD）、豬瘟（CSF）和豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）三種疫病目前仍然是威脅我國養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的重要疫病。農(nóng)村散養(yǎng)戶和規(guī)模養(yǎng)殖場畜禽目前主要實(shí)行春秋兩季集中免疫和月月補(bǔ)針，各地為節(jié)約時(shí)間、節(jié)約勞力、降低成本，對豬瘟、口蹄疫疫苗進(jìn)行同時(shí)注射，單苗注射和多苗同時(shí)注射是否對抗體產(chǎn)生影響，只有通過免疫效果監(jiān)測，建立科學(xué)的免疫程序，才能對多種疫苗免疫進(jìn)行合理程序化安排，避免不同種疫苗作用的相互干擾。為了促進(jìn)防疫工作開展，減輕基層防疫人員工作強(qiáng)度和物資消耗，我們進(jìn)行了豬瘟疫苗、口蹄疫疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征疫苗分組分點(diǎn)注射的免疫干擾試驗(yàn)，具體方法如下：

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物：選自西寧市湟中縣攔隆口鑫隆養(yǎng)殖場40～60日齡未經(jīng)免疫的健康仔豬120頭作為試驗(yàn)豬，免疫前對動(dòng)物進(jìn)行基礎(chǔ)抗體滴度測定，豬繁殖與呼吸綜合征病毒和抗體陰性，口蹄疫感染抗體陰性，免疫抗體低于1：32的選擇為試驗(yàn)對象。

1.1.2 試驗(yàn)疫苗：豬瘟活疫苗（脾淋組織苗），生產(chǎn)批號2014015，系中牧實(shí)業(yè)股份有限公司成都精華藥械廠生產(chǎn)；口蹄疫O型滅活苗，生產(chǎn)批號1408006，系中農(nóng)威特生物科技股份有限公司生產(chǎn)；豬繁殖與呼吸綜合征滅活苗，批號20140211，系浙江杭州優(yōu)幫生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

1.1.3 檢測試劑：豬瘟正相間接血凝診斷液及陽性血清，批號140401，O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA試劑盒，批號2014120901-3，均購自蘭州獸醫(yī)研究所。

1.1.4 試驗(yàn)場地與飼養(yǎng)管理：試驗(yàn)場地位于湟中縣攔隆口鎮(zhèn)，附近無其他豬舍，各組單獨(dú)一圈，隔離飼養(yǎng)，飼喂相同飼料，整個(gè)試驗(yàn)場地封閉管理，固定飼養(yǎng)人員，嚴(yán)格消毒，杜絕無關(guān)人員出入。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)分組：將120頭仔豬，隨機(jī)分成4組，第1組30頭，注射口蹄疫疫苗；第2組30頭，注射O型口蹄疫苗和豬瘟疫苗；第3組注射豬口蹄疫和豬繁殖與呼吸綜合征滅活苗；第4組，同時(shí)分點(diǎn)注射豬瘟疫苗、豬口蹄疫疫苗和豬繁殖與呼吸綜合征滅活苗。

1.2.2 免疫方法：單組疫苗免疫，注射部位為左右頸部。兩種以上疫苗同時(shí)分點(diǎn)免疫，注射部位為左右頸部和腿部內(nèi)側(cè)。免疫劑量：豬瘟疫苗1頭份/頭，口蹄疫疫苗1 ml/頭，豬繁殖與呼吸綜合征滅活苗2ml/頭。

1.2.3 臨床不良反應(yīng)觀察：所有試驗(yàn)豬在免疫注射后進(jìn)行臨床觀察7～10d，主要觀察豬只精神狀況是否良好，采食是否正常，體溫有無升高，是否有其他嚴(yán)重不良反應(yīng)。

1.2.4 免疫抗體檢測：分別于免疫后14d、21d、28d、43d，經(jīng)前腔靜脈采血，分離血清，用于抗體檢測。

O型口蹄疫抗體檢測：采用液相阻斷ELISA（LpB-ELISA）方法，具體操作參照試劑盒說明書進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn)：豬血清抗體滴度≥1∶64，則判定被檢血清O型口蹄疫抗體合格；抗體滴度＜1∶64，則判定被檢血清O型口蹄疫抗體不合格。

檢測數(shù)據(jù)按病種進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)，以Log10的對數(shù)進(jìn)行分析比較。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同免疫程序豬口蹄疫抗體產(chǎn)生情況（見表1和圖1）

表1 豬口蹄疫抗體檢測結(jié)果（抗體滴度用log10表示）

圖1 豬口蹄疫抗體檢測圖

2.2 比較分析

從上圖可以看出，口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征疫苗分點(diǎn)同時(shí)注射組和口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征三種疫苗同時(shí)注射組，所產(chǎn)生的口蹄疫抗體水平最高，高于口蹄疫單苗注射組。

3 討論

（1）口蹄疫O型、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗同時(shí)分點(diǎn)免疫注射，臨床上無嚴(yán)重不良反應(yīng)，可推廣應(yīng)用。

（2）第4組的口蹄疫免疫抗體水平高于一組，且高抗體水平維持時(shí)間較長，表明口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征疫苗同時(shí)分點(diǎn)免疫的抗體水平要優(yōu)于單苗注射組。

（3）從近幾年的檢測來看，西寧市豬O型口蹄疫免疫抗體水平很低，一直以來認(rèn)為是與豬多種疫苗同時(shí)注射而產(chǎn)生拮抗作用有關(guān)，從本次試驗(yàn)結(jié)果來看，多種疫苗同時(shí)注射不會產(chǎn)生拮抗作用，相反在一定程度上還有促進(jìn)協(xié)同抗體產(chǎn)生的作用。

（4）從同一品種、相同的飼養(yǎng)環(huán)境以及年齡相當(dāng)?shù)呢i的抗體檢測結(jié)果中可以看出，注射相同劑量的同一種疫苗后，在不同個(gè)體之間的免疫抗體水平存在差異。從本試驗(yàn)中，豬口蹄疫抗體滴度值始終較低，這可能與試驗(yàn)所選仔豬有關(guān)，因?yàn)槭浅醮蚊庖?、反?yīng)敏感性較差，首免后產(chǎn)生的抗體水平低，不能達(dá)到規(guī)定的保護(hù)效價(jià)。本次試驗(yàn)中口蹄疫抗體合格率也較低，最高只有67.1%，也驗(yàn)證了我市春秋集中免疫中抗體水平較低這一結(jié)果。因此，在今后的防疫工作中，應(yīng)加大對仔豬等的二次強(qiáng)化免疫工作。

（5）豬瘟、口蹄疫和豬繁殖與呼吸綜合征疫苗分點(diǎn)同時(shí)注射對3種抗體的產(chǎn)生沒有顯著影響，沒有增加免疫副反應(yīng)，可在農(nóng)村散養(yǎng)生豬中推廣“同時(shí)接種口蹄疫、豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征疫苗”的免疫程序。

4 結(jié)論與建議

口蹄疫與豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征不會影響口蹄疫免疫抗體的產(chǎn)生，反而會對抗體產(chǎn)生具有協(xié)同作用。建議在口蹄疫防治工作中，可以同時(shí)注射口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征，但在第一次免疫抗體尚未完全產(chǎn)生之前，避免注射其他疫苗。

[1] 馬睿麟，蔡金山，沈艷麗，等.豬瘟、口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征等多種疫苗免疫試驗(yàn)[J].畜牧與獸醫(yī)，2010，（42）：79-81.

[2] 楊慧，封林，黎強(qiáng)，等.口蹄疫和豬瘟疫苗同時(shí)免疫注射豬的試驗(yàn)效果[J].四川畜牧獸醫(yī)，2008，（10）：29-31.

[3] 王劍峰，楊宗照，谷藝.同時(shí)注射豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征疫苗對豬瘟抗體效價(jià)的影響試驗(yàn)[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2007，32（1）：33.

[4] 華樹明.豬口蹄疫、豬瘟、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征分點(diǎn)免疫注射效果觀察[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2008，（4）：23-24.