劉丹，張建強(qiáng)，畢麗仙，婁斯藝，廖德杰，郭超，陳濟(jì)豐，周瑋,

（1.大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，遼寧 大連 116023；2.大連市水產(chǎn)產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新聯(lián)合會(huì)，遼寧 大連 116023；3.大連海洋大學(xué)科技園有限公司，遼寧 大連 116023）

蛋氨酸硒含量對(duì)食用仿刺參生長(zhǎng)和體壁營(yíng)養(yǎng)成分的影響

劉丹1，張建強(qiáng)2,3，畢麗仙1，婁斯藝1，廖德杰1，郭超1，陳濟(jì)豐1，周瑋1,2,3

（1.大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，遼寧 大連 116023；2.大連市水產(chǎn)產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新聯(lián)合會(huì)，遼寧 大連 116023；3.大連海洋大學(xué)科技園有限公司，遼寧 大連 116023）

在水溫10.2～12.4℃、pH 7.8～8.0、鹽度24～28條件下，將平均體質(zhì)量為（45±5）g的仿刺參Apostichopus japonicus飼養(yǎng)在室內(nèi)養(yǎng)殖池的網(wǎng)箱中，投喂蛋氨酸硒添加量分別為0mg/kg、0.2mg/kg、0.4mg/kg、0.6mg/kg、0.8mg/kg和1.0mg/kg的6組飼料。飼養(yǎng)60d后，測(cè)定仿刺參的特定生長(zhǎng)率（SGR）和體壁中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量。結(jié)果表明：當(dāng)?shù)鞍彼嵛砑恿繛?.0mg/kg飼料時(shí)，仿刺參的特定生長(zhǎng)率、粗蛋白、粗灰分含量最大，較對(duì)照組分別高155.56%、5.65%和2.9%（P＜0.05），而仿粗脂肪含量最低，較對(duì)照組低10.61%（P＜0.05）。

蛋氨酸硒；仿刺參成參；特定生長(zhǎng)率；體壁營(yíng)養(yǎng)成分

蛋氨酸硒以天然形式存在，化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，生物學(xué)效率高，能有效改善動(dòng)物肉質(zhì)品質(zhì)[1-3]，是動(dòng)物體補(bǔ)硒的首選。魏文志[4]、鄭宗林[5]等試驗(yàn)證明，動(dòng)物對(duì)有機(jī)硒的利用效果好于無(wú)機(jī)硒，特別是對(duì)蛋氨酸硒的利用效果最好。王吉橋等[6]在飼料仿刺參幼參中添加不同硒源，發(fā)現(xiàn)蛋氨酸硒對(duì)幼參的促生長(zhǎng)和增強(qiáng)免疫力效果最好。攝食添加蛋氨酸硒的仿刺參幼參中粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量分別為（52.52±0.06）%（P＜0.05）、（5.25±0.03）%和（29.66±0.03）%（P＞0.05）。

體壁營(yíng)養(yǎng)（粗蛋白、粗脂肪、粗纖維等）水平是評(píng)價(jià)仿刺參品質(zhì)和海參飼料效果的重要指標(biāo)[7]。付晶晶等[8]比較研究了鱸Lateolabrax japonicus營(yíng)養(yǎng)成分中蛋白干物質(zhì)（75.08%和69.88%）、粗蛋白（94.55%和94.52%）等指標(biāo)，認(rèn)為花生粕可替代魚粉。李丹彤等[9]比較了1月和5月獐子島野生刺參體壁中粗蛋白（4.92%和3.40%）、粗脂肪（0.10%和0.31%）、灰分（2.58%和2.93%）含量，發(fā)現(xiàn)兩月間營(yíng)養(yǎng)積累存在差異。姜森顥等[10]認(rèn)為可以通過青刺參、紅刺參體壁營(yíng)養(yǎng)中粗蛋白（49.61%和49.00%）、粗脂肪（2.60%和2.71%）、干重灰分（30.02%和28.34%）的比較來(lái)判斷兩種海參營(yíng)養(yǎng)水平的差異。

本試驗(yàn)在基礎(chǔ)飼料中添加不同濃度的蛋氨酸硒，以體壁粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的含量為指標(biāo)，探究蛋氨酸硒對(duì)仿刺參體壁營(yíng)養(yǎng)成分的影響，為研發(fā)仿刺參富硒飼料提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

仿刺參取自養(yǎng)殖池塘，體質(zhì)量為（45±5）g，體長(zhǎng)為（10±1）cm，投喂基礎(chǔ)飼料，馴養(yǎng)10d后用于試驗(yàn)。

基礎(chǔ)飼料為市售海參配合飼料（含粗蛋白15.00%、粗脂肪3.21%、粗灰分47.33%、硒0.30mg/kg）。

試驗(yàn)用可溶性（分析純）蛋氨酸硒（98%）購(gòu)自成都格雷西亞化學(xué)技術(shù)有限公司。

試驗(yàn)前將基礎(chǔ)飼料分別加入6組劑量蛋氨酸硒的糊化淀粉中，攪拌、擠壓成型后，烘干至恒重，分組保存。糊化淀粉的制作：分別稱取含硒0.2mg/kg、0.4mg/kg、0.6mg/kg、0.8mg/kg和1.0mg/kg的蛋氨酸硒，溶解在適量純凈水中，加入可溶性淀粉含量為3%的基礎(chǔ)淀粉，加熱至80℃糊化。6組富硒飼料中蛋氨酸硒的添加量見表1。

表1 試驗(yàn)飼料中蛋氨酸硒的添加量Tab.1 The contents（mg/kg diet）of selenium methionine supplemented in the experimental diets

1.2 方法

1.2.1 飼養(yǎng)方法

仿刺參隨機(jī)分為6組，記為A（對(duì)照組）、B、C、 D、E、F，放在室內(nèi)養(yǎng)殖水池中的 18個(gè)90cm× 90cm×100cm網(wǎng)箱中飼養(yǎng)，每個(gè)網(wǎng)箱15頭，每組設(shè)3個(gè)平行。每天17:00按仿刺參體質(zhì)量的3.0%～5.0%投喂相應(yīng)試驗(yàn)飼料。試驗(yàn)池水溫10.2～12.4℃，鹽度27～28，pH7.8～8.0，每天換水三分之一，連續(xù)充氣，每10d徹底清洗一次網(wǎng)箱。

1.2.2 生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定

試驗(yàn)60d時(shí)，測(cè)量自然狀態(tài)下仿刺參體長(zhǎng)，然后用濾紙吸干體表水分，逐一稱重、計(jì)數(shù)，計(jì)算成活率和下列指標(biāo)：

體質(zhì)量特定生長(zhǎng)率（SGR）=100%×（InWt-InW0）/t，其中Wt和W0分別為終末體質(zhì)量和初始體質(zhì)量，t為飼養(yǎng)天數(shù)。

體長(zhǎng)特定生長(zhǎng)率（SGR）=100%×（InLt-InL0）/t，其中Lt和L0分別為終末體長(zhǎng)和初始體長(zhǎng)，t為飼養(yǎng)天數(shù)。

1.2.3 營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，停食36h，每組隨機(jī)取5頭仿刺參，解剖，去除內(nèi)臟和石灰環(huán)，用砂濾海水沖洗后，稱重，剪成小塊，用組織搗碎機(jī)搗碎，在烘箱中（105℃）烘至恒重后，放入干燥器內(nèi)備用。粗蛋白、粗脂肪和灰分含量分別用凱氏定氮法 GB/T 5009.5-2003、索氏抽提法GB/T 5009.6-2003和高溫灼燒法GB/T5009.4-2007測(cè)定。

1.3 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)以（平均值±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，并用SPSS17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，包括方差分析和LSD多重比較，以P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 攝食含蛋氨酸硒飼料的仿刺參的特定生長(zhǎng)率

由圖1可知，本試驗(yàn)條件下，仿刺參特定生長(zhǎng)率與飼料中硒含量呈正相關(guān)性，即隨蛋氨酸硒含量的增加，體長(zhǎng)特定增長(zhǎng)率逐漸升高。各試驗(yàn)組與對(duì)照組的差異性結(jié)果顯示：B組比A組高9.09%（P＞0.05），C組比A組高36.36%（P＞0.05），D組比A組顯著提高100%（P＜0.05），E組比A組顯著提高136.36%（P＜0.05），F(xiàn)組比 A組十分顯著提高209.09%（P＜0.01）。仿刺參體質(zhì)量特定增長(zhǎng)率隨蛋氨酸硒含量的增加而逐漸升高。B組與A組之間差異不顯著，C組比A組顯著提高27.78%（P＜0.05），D組比A組顯著提高66.67%（P＜0.05），E組與A組顯著提高了83.33%（P＜0.05），F(xiàn)組比A組顯著提高155.56%（P＜0.05）。

圖1 攝食含不同劑量蛋氨酸硒飼料的仿刺參的體長(zhǎng)、體質(zhì)量特定增長(zhǎng)率Fig.1 The specific grow th rate in body length,weight in sea cucumber Apostichopus japonicas fed diets containing various doses of selenium methionine

2.2 攝食含蛋氨酸硒飼料的仿刺參體壁的營(yíng)養(yǎng)成分含量

由圖2可知，仿刺參體壁粗蛋白含量與飼料中蛋氨酸硒添加量呈正相關(guān)。B組與A組差異不顯著（P＞0.05），C組比A組顯著提高1.75%（P＜0.05），D組比A組顯著提高2.42%（P＜0.05），E組比A組顯著提高3.69%（P＜0.05），F(xiàn)組比A組顯著提高5.65%（P＜0.05）。

圖2 攝食含不同劑量蛋氨酸硒飼料的仿刺參體壁的粗蛋白、粗脂肪含量Fig.2 The crude protein,fat levels in body wall of sea cucumberApostichopusjaponicasfed diets containing various doses of selenium methionine

同樣，由圖2可知，仿刺參體壁粗脂肪含量與飼料中蛋氨酸硒添加量呈負(fù)相關(guān)。A、B、C組間差異不顯著（P＞0.05），D組比A組顯著降低5.74%（P＜0.05），E組比A組顯著降低8.17%（P＜0.05），F(xiàn)組比A組顯著降低10.61%（P＜0.05）。

由圖3可知，仿刺參體壁粗灰分含量與飼料中蛋氨酸硒添加量呈正相關(guān)。B組與A組差異不顯著（P＞0.05），C組比A組顯著升高1.24%（P＜0.05），D組比A組顯著升高1.66%（P＜0.05），E組比A組顯著提高1.85%（P＜0.05），F(xiàn)組比A組顯著提高2.9%（P＜0.05）。

圖3 攝食含不同劑量蛋氨酸硒飼料的仿刺參的體壁粗灰分含量Fig.3 The crude ash levels in body wall of sea cucumberApostichopusjaponicasfed diets containing various doses of selenium methionine

3 討論

3.1 飼料蛋氨酸硒對(duì)仿刺參生長(zhǎng)的影響

硒是動(dòng)物體的必需微量元素，缺硒會(huì)影響動(dòng)物體生長(zhǎng)發(fā)育，改變動(dòng)物的生理狀態(tài)[11]。大量研究證實(shí)，添加富硒飼料能促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)和繁殖[12-15]。在飼料中添加適量富硒飼料，提高了草魚Ctenopharyngodonidella[16]、中國(guó)對(duì)蝦Penaeusorientalis[17]、皺紋盤鮑Haliotisdiscushannai[14]等的生長(zhǎng)率。Nugroho等[18]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0.2mg/kg的有機(jī)硒，有效提高了紅螯螯蝦Cheraxquadricarinatus特定生長(zhǎng)率和成活率。李曉霞等[19]研究結(jié)果表明，攝食含蛋氨酸硒的對(duì)蝦的終末體質(zhì)量、特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率等均顯著高于對(duì)照組。本試驗(yàn)中，隨著蛋氨酸硒添加量從0mg/kg逐漸增加至1.0mg/kg時(shí)，仿刺參的體長(zhǎng)增長(zhǎng)率增加0.23%，體質(zhì)量增長(zhǎng)率增加0.28%，與王吉橋等[20]的幼參特定生長(zhǎng)率與蛋氨酸硒添加量成正相關(guān)性的結(jié)果相一致。

3.2 蛋氨酸硒添加量對(duì)仿刺參體壁營(yíng)養(yǎng)成分的影響

蘇傳福等[16]研究表明，適量添加硒可提高草魚體和肌肉中蛋白質(zhì)的含量，降低脂肪含量，說(shuō)明硒能改善草魚的肉質(zhì)品質(zhì)。龍萌等[21]試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中適量添加富硒酵母，可以提高團(tuán)頭魴Megalobramaamblycephala肌肉中的粗蛋白含量，改善肌肉營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。李曉霞等[19]發(fā)現(xiàn)，飼料中添加不同硒源顯著影響凡納濱對(duì)蝦Litopenaeusvannamei體蛋白和脂肪含量，其中，蛋氨酸硒組對(duì)蝦體蛋白含量最高。本試驗(yàn)中，飼料蛋氨酸硒濃度在0～1.0mg/kg之間時(shí)，仿刺參體壁粗蛋白和粗灰分含量與蛋氨酸硒添加量呈正相關(guān)性，而粗脂肪含量則相反。但就其影響程度而言，對(duì)粗脂肪影響程度最大，其次為粗蛋白，對(duì)粗灰分含量影響最小。本文隨著蛋氨酸硒添加量的增加，粗蛋白含量逐漸升高的試驗(yàn)結(jié)果與王吉橋等[20]的結(jié)果相一致，但其認(rèn)為飼料中蛋氨酸硒含量的最適添加量為0.6mg/kg，與本文的最佳硒添加量為1.0mg/kg并且可能更高的結(jié)果有差異。其原因：一是養(yǎng)殖條件與方式不同，前者是在實(shí)驗(yàn)室塑料水箱（規(guī)模為40L）中馴養(yǎng)，換水方式是隔天換水，本試驗(yàn)是在室內(nèi)養(yǎng)殖池進(jìn)行的網(wǎng)箱養(yǎng)殖（規(guī)模為1 000L），采用每天換水三分之一，連續(xù)充氣，每10d徹底清洗一次網(wǎng)箱的方式，而富硒飼料在水中有較高溶解度[22,23]，每天換水的方式相比于隔天換水的方式使水中溶解的富硒飼料流失的部分更多，導(dǎo)致硒添加量最高的試驗(yàn)組效果最好；二可能是成參與幼參的代謝和吸收能力不同[24]，本文試驗(yàn)對(duì)象是成參，成參的代謝能力比幼參低，而吸收的飼料又比幼參多，也是使試驗(yàn)結(jié)果偏高的原因。

3.3 蛋氨酸硒對(duì)仿刺參體壁粗蛋白影響的機(jī)理探究

目前，關(guān)于富硒飼料對(duì)仿刺參體壁中粗脂肪、粗灰分影響的機(jī)理研究較少，有待于進(jìn)一步探索，大部分研究集中在影響粗蛋白含量的機(jī)理方面。研究發(fā)現(xiàn)，富硒飼料在動(dòng)物體內(nèi)消化吸收轉(zhuǎn)化后，以硒蛋白的形式存在，與硒蛋白的生理功能關(guān)有。硒蛋白大多數(shù)是具有重要作用的酶[25]，其中5'-脫碘酶可以提高血清中三碘甲腺原氨酸的水平，促進(jìn)生長(zhǎng)激素的合成和分泌，加快動(dòng)物的生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)合成。而硒是參與合成5'-脫碘酶的重要組成成分[26]，補(bǔ)充適量硒便于合成5'-脫碘酶，調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的激素水平，提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和飼料轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)了仿刺參的生長(zhǎng)，增加了其體壁營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的積累。杜明等[27]認(rèn)為，富硒靈芝中的含硒粗蛋白具有抗氧化和清除自由基的作用。筆者認(rèn)為，攝食富硒飼料的仿刺參體壁中，含硒粗蛋白同樣具有清除·OH、O2-·等自由基活性的作用，減少仿刺參機(jī)體損傷，增加抗氧化性，使仿刺參肉質(zhì)品質(zhì)更好。富硒飼料中硒的最適添加量與致毒的濃度范圍非常小，開發(fā)低毒、高效的富硒飼料非常必要。

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Effects of Doses of Dietary Selenium Methionine on Growth and Approximate Composition of Body W all in Sea Cucumber Apostichopus japonicus

LIU Dan1,ZAHNG Jian-qiang2,3,BILi-xian1,LOU Si-yi1,LIAO De-jie1,GUO Chao1,CHEN Ji-feng1, ZHOUWei1,2,3
（1.College of Fisheriesand Life Science，Dalian Ocean University,Dalian 116023,China; 2.Dalian Fisheries Association of Industrial Technology Innovation,Dalian 116023,China; 3.Science and Technology Park of Dalian Ocean University Co.Ltd.,Dalian 116023,China）

Adultsea cucumberApostichopusjaponicusw ith initialbodyweightof（45±5）gwere reared in cages disposed in an indoor pond and fed the diets containing selenium methionine ata dose of 0mg/kg,0.2mg/kg,0.4mg/kg,0.6mg/kg,0.8mg/kg and 1.0 mg/kg atwater temperature of10.2～12.4℃,pH 7.8～8.0,and a salinity of24～28 for60 days.At the end of the experiment,specific grow th rate（SGR）of the sea cucumberwasmeasured,and the contentsof crude protein,crude fat,and crude ash were determ ined in the sea cucumber fasted for36 h.The results showed that therewere significantly higherSGRand contents of crude protein and crude ash in the sea cucumber fed diet containingmethionine selenium ata rate of 1.0mg/kg than those in the control group（P＜0.05）, higherby 155.56%,5.65%,and 2.9%,respectively,w ith theminimal crude fatcontent,significantly lower（by 10.61%）lower than in the controlgroup（P＜0.05）.

selenium methionine;adultsea cucumberApostichopusjaponicus;specific grow th rate（SGR）；nutritionalcomposition

S963.73+4

A

1005-3832（2017）03-0024-05

2017-01-03

大連市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2012B11NC049）.

劉丹（1992-），女，碩士研究生，從事水產(chǎn)養(yǎng)殖研究.E-mail:2275769324@qq.com

周瑋（1963-），男，教授，碩士生導(dǎo)師，從事水產(chǎn)養(yǎng)殖研究.E-mail:zhouwei@dlou.edu.cn