楊鄭州 肖雨君 謝曉娜
摘 要:為研究芒果皮萃取物對病源微生物的抑菌效果,該試驗(yàn)選用3種不同品種的芒果皮,采用85%的乙醇萃取得到萃取物,用含有萃取物的培養(yǎng)基進(jìn)行抑菌活性研究。結(jié)果表明,玉芒芒果皮萃取物對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白色念球菌及釀酒酵母有較好的抑菌效果,而四季芒和臺農(nóng)對釀酒酵母的抑制效果較好。
關(guān)鍵詞:芒果;果皮;萃取物;抑菌活性
中圖分類號 S667.7;R284 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731(2017)12-0022-03
Abstract:Three kinds of different varieties of mango peel were used.After degreasing with petroleum ether,the extract was extracted with 85% ethanol and the antibacterial activity of the extract was studied.The results showed that the extract of Yumeng mango peel was effective against Staphylococcus aureus,Pseudomonas aeruginosa,Candida albicans and Saccharomyces cerevisiae have a good antibacterial effect,four Seasons and Taiwanese farmers mango can play a very good bacteriostatic effect on Saccharomyces cerevisiae.
Key words:Mango;The skin;Extract;Antibacterial activity
芒果(Mangifera indica L.)為漆樹科芒果屬(Mangifera L.)水果,被稱為“熱帶水果之王”,在我國東南各省均有分布[1-2]。芒果除可以鮮食外,大部分被用于加工成芒果干、芒果酒、芒果醋、芒果罐頭等,這樣可以解決芒果的不耐貯存的問題,但同時(shí)也產(chǎn)生了大量的芒果皮。目前,芒果皮的處理一般為被拋棄,這樣既造成了原材料的浪費(fèi)又污染了環(huán)境[3]。有研究表明,芒果皮中含有類黃酮、芒果苷等天然化學(xué)成分,對于許多微生物都具有明顯的抑制效果[4-7],可以為開發(fā)新型植物殺菌劑提供一定的新思路。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑 芒果:臺農(nóng)、玉芒、四季芒;微生物:金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26003];白色念球菌[CMCC(F)98001];釀酒酵母菌(ATCC9080);銅綠假單胞菌[CMCC(B)10104],以上菌種都是由上海魯徽科技有限公司提供。試劑:石油醚(60~90℃)、乙醇(AR級)、85%的乙醇:150mL的蒸餾水注入850mL的分析醇中。營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基:牛肉膏3g,蛋白胨10g,Nacl5g,瓊脂20g,ddH2O1L,pH7.4~7.6。PDA培養(yǎng)基:馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂20g,ddH2O1L,pH自然。
1.2 樣品處理 從百色市芒果市場購買得健康的臺農(nóng)、玉芒、四季芒芒果,取芒果皮,置于60℃烘干機(jī)中、24h,粉碎至40目。
1.3 脫脂及乙醇萃取 反復(fù)用石油醚對臺農(nóng)、玉芒、四季芒果皮粉末脫脂2次,倒掉上層溶液,60℃趕凈石油醚后。倒入85%乙醇,20min后,超聲波振蕩8min,離心倒出上層溶液。用85%的乙醇萃取3次,收集這3次的萃取液。置于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.4 抑菌實(shí)驗(yàn) (1)培養(yǎng)平板制備:事先將培養(yǎng)皿、槍頭、0.22μm的濾膜、注射器滅菌和接種環(huán),滅菌。在無菌接種室中,將50mL芒果皮乙醇萃取物振蕩搖勻后,吸取25mL的原液,過濾(0.22μm的濾膜)備用。取1mL溶液放于培養(yǎng)皿中,然后倒入培養(yǎng)基,萃取物一定要在培養(yǎng)基60℃以下倒入,不能過熱,否則會破壞掉萃取物里面的有效成分,搖勻,冷卻。(2)菌液制備:事先用酒精擦拭超凈工作臺,在紫外燈下滅菌30min。將菌種劃線活化后,分別將釀酒酵母菌和其他3種菌接種于斜面培養(yǎng)基,倒置培養(yǎng)48h后,用無菌水稀釋成10-7濃度左右的菌液備用。(3)接種及培養(yǎng):取0.1mL金黃色葡萄球菌、白色念球菌、銅綠假單胞菌菌液接種于含有萃取物的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上,釀酒酵母菌菌液接種于含有萃取物的PDA營養(yǎng)瓊脂上,用涂布棒涂勻。貼好標(biāo)簽,倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2 結(jié)果與分析
2.1 四季芒芒果皮萃取物對實(shí)驗(yàn)菌的影響 從表1可以看出,四季芒芒果皮萃取物對釀酒酵母有顯著的抑菌效果,其他3種菌第一天都有菌落出現(xiàn),金黃色葡萄球菌第二天長勢停止;銅綠假單胞菌第二天出現(xiàn)淡綠色,第三天長勢變?nèi)酰话咨钋蚓鷱牡谌扉_始長勢才變慢。由此可知,四季芒芒果皮萃取物中對釀酒酵母的抑制作用最顯著,其次是金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌,最后是白色念球菌。
2.2 臺農(nóng)芒果皮萃取物對實(shí)驗(yàn)菌的影響 由表2可知,釀酒酵母一直沒有菌落的生長,金黃色葡萄球菌第一天有菌落出現(xiàn),銅綠假單胞菌和白色念球菌第二天出現(xiàn)菌落,第三天這3種菌的長勢均變慢。由此可知,臺農(nóng)芒果果皮萃取物對這4種菌的抑制效果均顯著,其中對釀酒酵母的抑菌效果最顯著。
2.3 玉芒芒果皮萃取物對實(shí)驗(yàn)菌的影響 由表3可知,釀酒酵母一直沒有菌落的生長,第一天金黃色葡萄球、銅綠假單胞菌和白色念球菌均沒有菌落的出現(xiàn),第二天開始金黃色葡萄球菌小且聚攏,銅綠假單胞菌和白色念球菌出現(xiàn)菌落;第三天開始金黃色葡萄球菌,銅綠假單胞菌和白色念球菌長勢均變慢。故玉芒果皮萃取物對釀酒酵母的抑菌效果最顯著,對于其他3種實(shí)驗(yàn)菌也有明顯的抑菌效果。
3 結(jié)論與討論
本試驗(yàn)一共采用了4種實(shí)驗(yàn)菌,3種芒果品種,分別記錄了5d的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。結(jié)果表明,四季芒、臺農(nóng)、玉芒對金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌均有明顯的抑菌效果;四季芒、臺農(nóng)、玉芒這3種芒果的果皮萃取物對釀酒酵母有顯著的抑制生長的作用。雖然第一天金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌都有菌落,但是第二天過后菌落不再生長。對于金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和白色念球菌,臺農(nóng)、四季芒、玉芒都起到了一樣的抑菌效果,故可以用這3種芒果品種中的任何一種芒果皮的萃取物來抑制這3種實(shí)驗(yàn)菌,但是最好使用臺農(nóng)和玉芒這2種芒果的果皮。
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(責(zé)編:張宏民)