虢娟 鄧凱航 林雪珍 賴艷娥 李尚烽

分析核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測血液病毒的應(yīng)用及檢驗(yàn)準(zhǔn)確率

虢娟 鄧凱航 林雪珍 賴艷娥 李尚烽

目的分析核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測血液病毒的應(yīng)用及檢驗(yàn)準(zhǔn)確率。方法25087份無償獻(xiàn)血者標(biāo)本, 有24383份標(biāo)本做完酶聯(lián)免疫檢測后又進(jìn)行核酸檢驗(yàn)。比較兩種檢驗(yàn)準(zhǔn)確率。結(jié)果24383份標(biāo)本, 其中酶聯(lián)免疫檢測陽性130份, 準(zhǔn)確率為0.53%, 核酸檢驗(yàn)陽性32份, 準(zhǔn)確率為0.13%, 兩種檢驗(yàn)方法準(zhǔn)確率對比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論通過核酸檢驗(yàn)對血液病毒進(jìn)行檢測具有較高的準(zhǔn)確率和靈敏度, 能大大減少誤檢、漏檢的發(fā)生率, 值得在臨床推廣應(yīng)用。

核酸檢驗(yàn)；酶聯(lián)免疫檢測；血液病毒；檢驗(yàn)準(zhǔn)確率

輸血是艾滋病病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)等疾病的重要傳播途徑之一, 在輸血之前對血液進(jìn)行抗體檢測或抗原檢測, 是控制疾病傳染的有效方式［1］。目前, 我國《血站技術(shù)操作規(guī)程》(2015版)規(guī)定血液檢測HIV、HBV和HCV感染標(biāo)志物應(yīng)采用2次血清學(xué)檢測和1次核酸檢驗(yàn)。本次研究分析核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測血液病毒的應(yīng)用及準(zhǔn)確率, 取得了良好的成果。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1一般資料 選取本站2016年1～12月25087份無償獻(xiàn)血者標(biāo)本, 對無償獻(xiàn)血者檢測24383份, 所有標(biāo)本均經(jīng)通過梅毒或轉(zhuǎn)氨酶檢測合格。每個(gè)標(biāo)本根據(jù)每項(xiàng)試驗(yàn)的技術(shù)要求,采用相應(yīng)類型的真空采血管留取, 放置在2～8℃下進(jìn)行保存。5 ml EDTA-K2抗凝管的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)在24 h內(nèi)分離血漿, 通過酶聯(lián)免疫法進(jìn)行檢測；5 ml無菌、無DNA酶、無RNA酶的EDTA-K2分離膠真空采血管, 應(yīng)當(dāng)在4 h內(nèi)分離血漿, 進(jìn)行核酸檢驗(yàn)。

1. 2方法 對5 ml EDTA-K2抗凝管進(jìn)行室溫離心, 分離血漿, 利用全自動(dòng)加樣儀(Tecan EVO)自動(dòng)加樣, 通過全自動(dòng)酶聯(lián)免分析儀進(jìn)行檢測, 記錄檢測結(jié)果。對5 ml的EDTAK2分離膠抗凝管標(biāo)本進(jìn)行20 min的離心, 現(xiàn)場保存溫度在2～8℃, 運(yùn)輸2～10℃。當(dāng)血液標(biāo)本經(jīng)過酶聯(lián)免疫檢測合格后, 放置在加樣儀樣品的條架上。WanTag核酸血液篩查系統(tǒng)檢測原理(6混樣)：采用特異性磁珠核酸純化技術(shù), 提取HBV、HCV、HIV-1病毒的核酸；利用實(shí)時(shí)熒光定量探針法設(shè)計(jì)特異性引物及熒光探針, 并結(jié)合競爭性內(nèi)標(biāo)技術(shù)檢測人血清或血漿中的HBV、HCV、HIV-1病毒核酸。

1. 3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

24383份標(biāo)本, 其中酶聯(lián)免疫檢測陽性130份, 準(zhǔn)確率為0.53%, 核酸檢驗(yàn)陽性32份, 準(zhǔn)確率為0.13%, 兩種檢驗(yàn)方法準(zhǔn)確率對比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表124383份標(biāo)本兩種檢測方法結(jié)果對比(n, %)

3 討論

多數(shù)傳染病都可以通過血液進(jìn)行傳播, 其中乙型肝炎、艾滋病是傳播能力較強(qiáng)的一類病癥, 會(huì)嚴(yán)重影響人們的身體健康, 降低生活質(zhì)量［2］。因此, 對無償獻(xiàn)血者進(jìn)行血液檢驗(yàn)有著重要的意義, 是降低輸血可能存在的傳播性風(fēng)險(xiǎn)的必要手段。過去我國大多數(shù)血站只用2次酶聯(lián)免疫檢測方式進(jìn)行檢測［3-5］。該檢測方式存在一定的缺陷, 檢出率較低, 常出現(xiàn)誤檢、漏檢的情況, 導(dǎo)致血液檢查有效率不高, 為血站的治療埋下了安全隱患。

血液病毒感染患者在臨床上大多無明顯癥狀, 短期內(nèi)也不會(huì)發(fā)病, 同時(shí)部分患者的抗體濃度較低, 無法進(jìn)行有效的檢測, 因此酶聯(lián)免疫檢測的適用性不強(qiáng)。若有誤檢、漏檢患者的血液進(jìn)入到其他患者體內(nèi), 會(huì)直接導(dǎo)致血液污染, 甚至出現(xiàn)交叉感染的情況。血液病毒指的是HIV、HBV、HCV等,這些病毒會(huì)在人體中潛伏較長的時(shí)間, 有些患者甚至不知道已經(jīng)被感染。一旦這些患者進(jìn)行獻(xiàn)血, 會(huì)大大增加血液病毒的傳播性, 這也是目前血液病毒傳播的主要途徑之一［6-9］。酶聯(lián)免疫檢測主要是對患者血液的病毒抗原進(jìn)行檢測, 若患者存在血液病毒, 分析儀在對樣本分析后, 波長會(huì)出現(xiàn)一定的變化, 一般臨床醫(yī)師會(huì)根據(jù)變化的具體數(shù)值, 對患者的情況進(jìn)行判斷。但血液病毒會(huì)在人體中潛伏, 只有當(dāng)潛伏到一定時(shí)間后再能被檢測, 這段時(shí)間也被稱作窗口期。對于窗口期的血液病毒, 該檢測方法無法進(jìn)行有效的檢測, 例如HIV在人體內(nèi)的潛伏時(shí)間格外長, 一旦出現(xiàn)誤檢、漏檢, 會(huì)嚴(yán)重影響到其他患者的生存質(zhì)量, 為疾病的傳播埋下了隱患。另一方面, 酶聯(lián)免疫檢測還會(huì)受到氣溫的影響。HBV感染一般和季節(jié)、溫度有關(guān), 冬季氣溫較低, 人體內(nèi)部乙型肝炎表面抗原(HBsAg)活性較低, 表達(dá)能力較差, 因此在檢測時(shí)不能僅對HBsAg進(jìn)行篩查, 需要給予一定的重視。

核酸檢驗(yàn)采用病毒核酸擴(kuò)增技術(shù), 直接讓病毒擴(kuò)增到陽性匯集孔, 對各類血液病毒的靈敏性均較高, 即使血液病毒存在于窗口期, 也能進(jìn)行有效的檢測, 漏檢、誤檢率較低,陽性檢出率較高。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展, 核酸檢測在我國也有了廣泛的應(yīng)用, 尤其是在血站血液檢測中, 優(yōu)勢明顯。但從整體上來看, 我國核酸檢驗(yàn)技術(shù)起步較晚, 技術(shù)水平和國外相比還有一定差距, 從臨床時(shí)間來看, 有必要將其作為血液篩查的主要手段, 重視其發(fā)展與應(yīng)用［10］。

本次研究中, 分別通過核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫法進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示, 酶聯(lián)免疫法檢測準(zhǔn)確率低于核酸檢驗(yàn), 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

綜上所述, 通過核酸檢驗(yàn)對血液病毒進(jìn)行檢測具有較高的準(zhǔn)確率和靈敏度, 能大大減少誤檢、漏檢的發(fā)生率, 值得在臨床推廣應(yīng)用。

［1］ 鐘萬芬, 唐小勇. HBsAg 和抗-HCV 酶聯(lián)免疫檢測與血液病毒核酸篩查技術(shù)之間的相關(guān)性分析.肝臟, 2015, 20(11):876-878.

［2］ 劉俊才.核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測血液病毒的應(yīng)用及檢驗(yàn)準(zhǔn)確率對比研究.中國保健營養(yǎng), 2016, 26(18):56.

［3］ 夏麗娜.乙型肝炎病毒的液相雜交技術(shù)在聚合酶鏈反應(yīng)酶聯(lián)免疫檢測的應(yīng)用探討.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué), 2012, 39(17):4525-4527.

［4］ 呂蓉, 王倫善, 盛琪琪, 等.無償獻(xiàn)血者HIV-1抗體蛋白印跡確認(rèn)與核酸檢測結(jié)果分析.臨床輸血與檢驗(yàn), 2012, 14(4):308-311.

［5］ 鄭顯良, 吳嬌嬋, 趙靜, 等.血液病毒核酸檢測在集中化檢測實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床, 2013, 10(18):2458-2459.

［6］ 劉德春, 孫波, 徐群, 等. 核酸檢測技術(shù)與酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)在血液篩檢中的初步應(yīng)用比較. 中國輸血雜志, 2007, 20(1):43-45.

［7］ 趙俊鵬, 田喜鳳, 賈幼珍, 等. 血液病毒核酸檢測與酶聯(lián)免疫檢測比較研究. 中國病原生物學(xué)雜志, 2011(10):732-735.

［8］ 曾勁峰, 李活, 許曉絢, 等. 核酸檢測陽性標(biāo)本與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)分析研究. 國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2010, 31(6):557-558.

［9］李玉泉. 核酸檢測與酶聯(lián)免疫檢測血液病毒的比較分析. 中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè), 2016, 13(31):45-47.

［10］ 郭振秀, 李凌云. 采用核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測血液病毒的應(yīng)用及準(zhǔn)確率對比分析. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘(連續(xù)型電子期刊), 2016, 16(12):8-9.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.13.028

2017-04-06］

511518 清遠(yuǎn)市中心血站