鶴壁市農產品質量安全監(jiān)測檢驗中心 李勇 張艷麗 劉宏偉 宋保軍
如何驗證農殘速測儀的準確性
鶴壁市農產品質量安全監(jiān)測檢驗中心 李勇 張艷麗 劉宏偉 宋保軍
河南省農產品質量安全檢測中心
河南省綠色食品發(fā)展中心 主辦
河南省無公害農產品認證委辦公室
鶴壁市農產品質量安全監(jiān)測檢驗中心通過摸索和研究,開展了速測儀的比對驗證?,F(xiàn)將驗證方法介紹如下,供同行參考。
(一)基本準備
1.儀器與試劑
驗證儀器:河南農大迅捷公司生產的農藥殘留檢測儀、吉大·小天鵝農藥殘留快速檢測儀、北京強盛分析儀器制造中心快速檢測儀。
驗證試劑:石家莊某農殘試劑,廣州某農殘試劑。
2.實驗方法
按照GB/T5009.199-2003《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測》酶抑制率法(分光光度法)方法檢測。
3.樣品的預處理
(1)樣品處理:選取有代表性的蔬菜樣品,剪成1 cm左右長度的碎片,取樣品1 g,放入燒杯或提取瓶中,準確加入5 mL提取液,振蕩1~2 min,倒出提取液,靜置3~5 min,待用。
(2)空白溶液測試:先于試管中加入2.5 mL緩沖液,再準確加入0.1 mL酶液和0.1 mL顯色劑,搖勻,在水浴溫度37℃的條件下放置15 min以上。再加入0.1 mL底物搖勻,將溶液倒入比色皿中,此時檢測溶液開始顯色反應,應立即放入儀器比色池中,記錄反應3 min的吸光度變化值。
(3)樣品溶液測試:先于試管中加入2.5 mL樣品提取液,其他操作與空白溶液測試相同,記錄反應3 min的吸光度變化值。
(二)采用不同分組進行多角度驗證
1.不同操作人員使用同一樣品在同一臺儀器上進行驗證,以驗證不同操作習慣對速測準確性的影響。人員操作習慣影響的驗證,是指定多名檢驗人員,用統(tǒng)一的樣品和速測試劑,對同一臺速測儀器進行操作。根據(jù)每個操作人員的通道誤差率判定操作人員對速測準確性的影響。本驗證指定了4名操作人員,用同一樣品和同一品牌試劑進行,選取3臺速測儀進行平行驗證。以1號速測儀為例,驗證結果見表1。
結果表明:在統(tǒng)一樣品、統(tǒng)一速測試劑、同一臺速測儀器的條件下,由于操作人員的習慣不同,得到的4個數(shù)據(jù),按照Q檢驗法,25.7屬于可疑值,說明結果存在一定的差異。這種差異多數(shù)由于操作不規(guī)范造成的,比如吸取2.5 mL浸提劑時,不用移液槍,直接倒入小瓶,小瓶里的浸提劑數(shù)量不精確,直接影響檢測結果;又如不會正確使用移液槍,吸取時過量。也可能是器具工具造成的,比如移液槍老化,造成吸液時有漏液,或吸量不準確。
表1 1號速測儀不同操作人員的通道誤差
2.同一操作人員用同一樣品對多臺同型號儀器進行驗證,以驗證同型號儀器之間的差異。同型號儀器之間的驗證就是一名檢測人員用統(tǒng)一的樣品和速測試劑在多臺同型號的速測儀上進行檢測。本驗證要求參與本平行驗證的所有儀器為性能可靠的儀器,并要求不同儀器由同一名操作員進行。 以抑制率平均值之間的絕對差判定各儀器之間的差異。本驗證指定了1名檢測員,選取了某品牌型號的4臺速測儀,用同一樣品和同一品牌試劑進行,驗證結果見表2。
結果表明:4臺某品牌型號速測儀的抑制率平均值最高為27.6,最低為25.9,絕對差值為3.5,表明同型號速測儀的準確性并非完全一致。但各臺的抑制率平均值的差別均不超過10%,表明各臺儀器均為合格產品,能夠承擔速測任務。
3.同一人員使用同一樣品對不同型號儀器進行驗證,以驗證不同型號儀器之間的差異
不同型號速測儀的驗證是平行驗證,3種品牌型號的的速測儀,各選取1臺,由同一人員使用同一樣品、同一試劑進行檢測,通過比較抑制率平均值判定各型號儀器的準確性是否一致。本驗證選取了河南農大迅捷速測儀、吉大速測儀、北京強盛速測儀中各選取1臺,指定4名檢測員,用同一樣品和同一品牌試劑進行,驗證結果見表3。
表2 4臺某型號儀器之間的抑制率平均值
結果表明:在同一操作人員、同一樣品、同一試劑的條件下,3種品牌型號的速測儀抑制率平均值接近一致,說明3種品牌型號速測儀的準確性是一致的。
(一)速測雖然不在計量認證和機構考核范圍內,但由于其作為最常用的監(jiān)管手段,必須定期對速測儀的準確性進行驗證。這方面是大部分實驗室的薄弱環(huán)節(jié),必須進行加強與完善。
(二)本次驗證表明,速測儀的準確性受人員操作習慣、水浴溫度、廠家試劑等多種因素影響,必須加強操作規(guī)范培訓,并對速測試劑進行準確性驗證。
(三)不同型號、品牌的速測儀,很有可能存在差異。若一個單位在使用不同型號、品牌的速測儀時,必須對其進行驗證,以掌握不同型號不同品牌速測儀的稟性。
(四)對試驗過程所用的移液槍等器具,要定期進行校驗,操作人員也要正確使用移液槍等器具,減少操作誤差。
表3 不同型號儀器之間的抑制率平均值