李慧

哈藥集團(tuán)制藥六廠 150000

克拉霉素緩釋片釋放度研究

李慧

哈藥集團(tuán)制藥六廠 150000

目的：探討不同介質(zhì)下自制和市售克拉霉素緩釋片的釋放度，并研究分析兩種克拉霉素緩釋片的體外釋放行為，為優(yōu)化自制克拉霉素緩釋片制備工藝提供參考。方法：用高效液相色譜法對(duì)兩種克拉霉素緩釋片的釋放度進(jìn)行測(cè)定，并分別按照中國和美國的藥典中規(guī)定的釋放度方法進(jìn)行釋放，分析和比較其釋放模型和f2相似因子。結(jié)果：若都以BIAXINXL為參比制劑，兩種克拉霉素緩釋片的釋放度值都＞50，而若以KLACID MR為參比制劑則都是＜50。結(jié)論：從試驗(yàn)結(jié)果可看出，自制和市售的克拉霉素緩釋片的體外釋放行為十分相似，說明自制克拉霉素緩釋片的工藝是可靠的。

克拉霉素緩釋片；釋放度；測(cè)定；相似因子

與紅霉素相比，克拉霉素是新一代產(chǎn)品，雖然兩者都屬于大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，但紅霉素的藥效卻不如克拉霉素，尤其是在治療敏感菌引起的鼻咽感染、下呼吸道感染、皮膚感染和泌尿道感染等疾病的過程中，克拉霉素表現(xiàn)的臨床效果更好。而為了能夠更好的釋放藥效，延長克拉霉素的藥效，有時(shí)候需要使用緩釋片這種制劑進(jìn)行產(chǎn)品生產(chǎn)。克拉霉素緩釋片在研發(fā)和生產(chǎn)的過程中都要對(duì)藥物釋放度進(jìn)行控制，這是評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)，也是控制生產(chǎn)工藝的重要手段。

1.儀器與試藥

1.1 儀器

Dinoex P680A高效液相色譜儀，D800LS智能溶出儀，磁極802離心沉淀器。

1.2 試藥

克拉霉素對(duì)照品（含量97.5%）；自制克拉霉素緩釋片（500 mg/片）；克拉霉素緩釋片 “KLACID MR”（500 mg/片）和“BIAXINXL”（500mg/片）；乙腈為色譜純；其他試劑均為市售分析純。

2、方法與結(jié)果

2.1 含量測(cè)定

2.1.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

參照中國藥典。以Diamonsil C18(5 μm， 250 mm×4.6 mm)為色譜柱；以磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鉀9.11 g，加水溶解并稀釋至1 000 mL，加三乙胺2 mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.5）乙腈（體積比600∶400）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為210 nm；流速為1.0 mL/min；柱溫45 ℃。理論板數(shù)按克拉霉素峰 計(jì)算 不低于3 000；拖尾因子不得過2.0；克拉霉素峰與相鄰各雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

取克拉霉素對(duì)照品適量，用流動(dòng)相制成每1 mL含1.969 mg的溶液作為貯備液，分別精密取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL置10 mL量瓶，用流動(dòng)相稀釋至刻度，分別取20 μL進(jìn)樣測(cè)定，以峰面積為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)作線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：Y=17.143X-0.0674，r=1.000，線性范圍為0.098～0.689 mg/mL。

2.1.3 測(cè)定方法

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于克拉霉素35 mg），置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲20 min，放置至室溫，以流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試液，量取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜；另取克拉霉素對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成每1 mL含 0.35 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，同法測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算，即得。

2.1.4 回收率及重復(fù)性試驗(yàn)

分別取自制克拉霉素緩釋片的空白輔料適量，加入精密稱定的克拉霉素對(duì)照品，按“2.1.3”項(xiàng)方法制成供試液，測(cè)定回收率，并進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)。結(jié)果平均回收率為99.3%（n＝9），RSD為0.86%；重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果RSD為0.45%（n＝6）。

2.1.5 含量測(cè)定結(jié)果

自制克拉霉素緩釋片含量為99.1%；克拉霉素緩釋片“KLACID MR”含量為97.8%；克拉霉素緩釋片“BIAXINXL”含量為98.3%。

2.2 釋放度測(cè)定

2.2.1 釋放度方法一

參照《中國藥典》。取本品，以pH5.0醋酸鹽緩沖液(取0.1 mol/L醋酸鈉溶液，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至5.0)900 mL為溶出介質(zhì)（以下稱為介質(zhì)1)，轉(zhuǎn)速100 r/min，溫度為（37.0±0.5） ℃，依法操作。分別于1、2、4、6、8、10、12 h取溶液適量，過濾，濾液作為供試液，照“2.1.1”項(xiàng)下的色譜條件，取10 μL進(jìn)樣，記錄色譜圖；另取克拉霉素約28 mg置50 mL量瓶，加甲醇5 mL使溶解，加介質(zhì)稀釋至刻度，制成每1 mL約含0.56 mg 的溶液，同法測(cè)定。

2.2.2 釋放度方法二

參照《美國藥典》。以含0.5%的十二烷基硫酸鈉的磷酸鹽緩沖液（pH 6.8）900 mL為溶出介質(zhì)（以下稱為介質(zhì)2），轉(zhuǎn)速為100 r/min，溫度為（37.0±0.5） ℃，分別于1、2、4、6、8、10、12、16、20、24 h取5 mL溶液（同時(shí)補(bǔ)充等溫度等體積的新鮮介質(zhì)），濾過，取續(xù)濾液在2 500 r/min條件下離心10 min，取上清液作為供試品溶液；照“2.1.1”項(xiàng)下的色譜條件，取10 μL進(jìn)樣，記錄色譜圖；另取克拉霉素約28 mg置50 mL量瓶，加甲醇5 mL使溶解，加介質(zhì)稀釋至刻度，制成每1 mL約含0.56 mg 的溶液，同法測(cè)定。

2.2.3 克拉霉素在兩種釋放介質(zhì)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線

取克拉霉素對(duì)照品適量，甲醇制成每1 mL含1.933 mg的溶液作為貯備液，分別精密取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL置10 mL量瓶，分別加兩種釋放介質(zhì)稀釋至刻度，按釋放度項(xiàng)下測(cè)定法測(cè)定峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)作線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

2.3 克拉霉素緩釋片釋放度曲線

自制和市售進(jìn)口克拉霉素緩釋片在兩種釋放介質(zhì)中的釋放度測(cè)定結(jié)果見1和圖2。

圖1 自制和進(jìn)口克拉霉素緩釋片累積釋放曲線（介質(zhì)1）

圖2 自制和進(jìn)口克拉霉素緩釋片累積釋放曲線（介質(zhì)2）

2.4 釋放模型的擬合

將自制緩釋片與兩種市售的克拉霉素緩釋片分別于介質(zhì)1和介質(zhì)2中的釋放度數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合。

在介質(zhì)1中，自制緩釋片和BIAXINXL的釋放用Higuchi函數(shù)擬合結(jié)果均較優(yōu)，表明它們的體外釋放行為都是擴(kuò)散和溶蝕協(xié)同作用；KLACID MR則以Peppas函數(shù)和一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程擬合結(jié)果最優(yōu)，表明其釋放機(jī)制為骨架溶蝕。

在介質(zhì)2中，自制緩釋片和BIAXINXL的釋放用Higuchi和Peppas函數(shù)的擬合結(jié)果均較佳，表明釋放行為為骨架溶蝕；KLACID MR以Peppas函數(shù)擬合結(jié)果最優(yōu)，其釋放行為也是骨架溶蝕；因此，在該釋放介質(zhì)中，3種片劑的釋放行為都較相似。

2.5 釋放度評(píng)價(jià)方法

國外學(xué)者在比較多種制劑的釋放度曲線時(shí)，常采用體外釋藥行為有無顯著性差異的相似因子法（f2），該方法優(yōu)點(diǎn)在于可以直接對(duì)釋藥數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，無需擬合各種釋藥速率，現(xiàn)已被美國等多個(gè)國家。

當(dāng)f2值在50～100之間時(shí)，認(rèn)為兩制劑的體外釋藥行為差異無顯著性；f2值愈接近 100，相似程度就愈高。本實(shí)驗(yàn)分別以BIAXINXL和KLACID MR緩釋片作為參比制劑，自制緩釋片分別在兩種介質(zhì)下與他們進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)：以BIAXINXL為參比制劑，自制緩釋片在兩種釋放介質(zhì)中， f2值均大于50；以KLACID MR為參比制劑，自制緩釋片在兩種釋放介質(zhì)中，f2值均小于50。

3、結(jié)論

通過本次試驗(yàn)可以看出，自制和市售的克拉霉素緩釋片無論在哪種釋放介質(zhì)下所表現(xiàn)出的釋放度和體外釋放行為都十分相似。說明自制的克拉霉素緩釋片符合相關(guān)質(zhì)量規(guī)定，可以生產(chǎn)銷售。

[1]黃平，丁慧萍，李智，等.高效液相色譜——電噴霧質(zhì)譜法測(cè)定人血漿克拉霉素濃度［J］.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2007，26（7）：728-730.

[2]呂長淮.藥物釋放度研究概述［J］.安徽醫(yī)藥，2007，11（1）：76-78.

[3]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典:二部［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.

R 473.5

A

1672-5018（2017）03-005-01