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      涎腺超聲聯(lián)合血清BAFF檢測(cè)在原發(fā)性干燥綜合征診斷中的價(jià)值

      2017-12-04 10:54:48耿保慶黃嫻倩干敏芝彭勇朱夢(mèng)雅應(yīng)穎黃海燕陳勇
      浙江醫(yī)學(xué) 2017年21期
      關(guān)鍵詞:涎腺靈敏度綜合征

      耿保慶 黃嫻倩 干敏芝 彭勇 朱夢(mèng)雅 應(yīng)穎 黃海燕 陳勇

      涎腺超聲聯(lián)合血清BAFF檢測(cè)在原發(fā)性干燥綜合征診斷中的價(jià)值

      耿保慶 黃嫻倩 干敏芝 彭勇 朱夢(mèng)雅 應(yīng)穎 黃海燕 陳勇

      目的 探討涎腺超聲聯(lián)合血清B淋巴細(xì)胞刺激因子(BAFF)檢測(cè)在原發(fā)性干燥綜合征(pSS)診斷中的臨床價(jià)值。方法 選擇pSS患者80例(pSS組),類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者60例(RA組),健康體檢者20例(健康對(duì)照組)。采用ELISA法檢測(cè)各組血清BAFF、增殖誘導(dǎo)配體(APRIL)、TNF-ɑ、IL-1β及IL-6水平;通過(guò)二維超聲評(píng)估pSS患者涎腺受累情況。分析比較各組血清BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6水平,并分析pSS患者血清BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6與涎腺超聲評(píng)分的相關(guān)性。結(jié)果 3組血清BAFF、IL-1β、TNF-ɑ比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),其中pSS組患者血清BAFF、IL-1β、TNF-ɑ水平明顯高于RA組與健康對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。pSS患者血清BAFF與涎腺評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.462,P<0.05),血清IL-1β與涎腺評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.403,P<0.05)。涎腺超聲、血清BAFF對(duì)pSS診斷的靈敏度高于抗干燥綜合征A抗原(SSA)/干燥綜合征B抗原(SSB)、類風(fēng)濕因子(RF),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。對(duì)于涎腺超聲評(píng)分≤2分的早期pSS患者,涎腺超聲聯(lián)合BAFF檢測(cè)診斷特異度達(dá)到96.77%。結(jié)論 pSS患者血清BAFF在疾病的早期即有明顯升高,有助于早期診斷。涎腺超聲對(duì)pSS的診斷比抗SSA/SSB有更高的靈敏度,特異度相當(dāng);BAFF對(duì)pSS的診斷比抗SSA/SSB靈敏度高,但特異度較低。對(duì)于涎腺超聲評(píng)分≤2分的pSS患者,涎腺超聲聯(lián)合血清BAFF檢測(cè)可提高診斷的特異度,可作為早期篩查指標(biāo)。

      B淋巴細(xì)胞刺激因子 涎腺超聲 原發(fā)性干燥綜合征

      原發(fā)性干燥綜合征(primary Sjogren’s syndrome ,pSS)是一種主要累及外分泌腺體的慢性自身免疫性疾病,它以單個(gè)核細(xì)胞侵犯外分泌腺體,引起這些腺體的分泌減少為特點(diǎn),形成口干和眼干等癥狀,除外分泌腺受累外,尚可累及其他器官或系統(tǒng)。該病好發(fā)于中年女性,我國(guó)發(fā)病率約為0.29%~0.77%[1]。pSS臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣,病因復(fù)雜,診斷上頗為棘手。當(dāng)前普遍應(yīng)用的是2002年修訂的歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(EULAR)提出的pSS分類標(biāo)準(zhǔn)[2],其特異度較高,但靈敏度較差,對(duì)于新發(fā)pSS或疑似pSS的患者易因缺乏特異度而容易延誤診斷。近年來(lái),涎腺超聲以其方便、無(wú)創(chuàng)、費(fèi)用低的優(yōu)勢(shì)受到越來(lái)越多的關(guān)注,大量研究證實(shí)其對(duì)pSS的診斷具有較高的靈敏度和特異度。但涎腺超聲檢查所發(fā)現(xiàn)的低回聲結(jié)節(jié)或高回聲線,亦不是pSS患者涎腺早期改變的特異性表現(xiàn),需要新的指標(biāo)加以補(bǔ)充,以期做到早診斷、早治療,從而提高患者預(yù)后及生活質(zhì)量。因此,積極探討能夠早期診斷且無(wú)創(chuàng)的技術(shù)手段是pSS防治工作的重點(diǎn)也是當(dāng)前亟待解決的問(wèn)題。B淋巴細(xì)胞刺激因子(BAFF)、增殖誘導(dǎo)配體(APRIL)都是TNF超家族的新成員,可調(diào)節(jié)體液免疫,并在B淋巴細(xì)胞的成熟和活化及pSS發(fā)病過(guò)程中起重要作用。本研究通過(guò)涎腺超聲聯(lián)合血清BAFF檢測(cè)與抗干燥綜合征A抗原(SSA)/干燥綜合征B抗原(SSB)、類風(fēng)濕因子(RF)等臨床常用指標(biāo)的比較,旨在探討涎腺超聲聯(lián)合血清BAFF檢測(cè)在pSS診斷中的價(jià)值。

      1 對(duì)象和方法

      1.1 對(duì)象 選擇2016年2月至2017年2月在本院住院或門診確診的pSS患者80例(根據(jù)EULAR 2002年修訂的pSS分類標(biāo)準(zhǔn)[2])(pSS組),男8例,女72例;年齡26~80(54.61±12.13)歲。選擇同期在本院住院或門診確診的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者60例[(根據(jù)美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ACR)1987年修訂的RA分類標(biāo)準(zhǔn)[3])](RA組),男 10 例,女 50 例;年齡 45~78(60.28±8.74)歲。選擇同期健康體檢者20例作為健康對(duì)照組,男4例,女16例;年齡 36~70(56.11±8.74)歲。3 組性別和年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。排除標(biāo)準(zhǔn):頸部、頭面部放療史、丙型肝炎病毒感染、艾滋病、結(jié)節(jié)病、淀粉樣變、移植物抗宿主病、免疫球蛋白(Ig)G4相關(guān)性疾病。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)和患者知情同意。

      1.2 方法

      1.2.1 血清標(biāo)本檢測(cè) 采集3組受檢者清晨空腹外周靜脈血5ml,以3 000r/min離心5min,取上清液,分裝至試管后立即放入-70℃低溫冰箱保存,集中測(cè)定。采用ELISA法(美國(guó)寶特公司ELX800酶標(biāo)儀讀板,Gene 5軟件) 檢測(cè)血清 BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6 水平;免疫印跡法(全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀,瑞士Roche公司)檢測(cè)血清抗SSA/SSB水平;免疫比濁法(美國(guó)Beckman Coulter公司免疫濁度分析儀)檢測(cè)血清抗RF 水平。BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6 試劑盒均購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司??筍SA/SSB試劑盒購(gòu)自德國(guó)歐蒙生物技術(shù)公司??筍SA/SSB、RF用于診斷pSS的標(biāo)準(zhǔn)參照EULAR 2002年干燥綜合征國(guó)際分類標(biāo)準(zhǔn)[2]。

      1.2.2 涎腺超聲檢查 采用意大利Esaote彩色超聲掃描儀,探頭頻率8~13MHz,檢測(cè)雙側(cè)腮腺及雙側(cè)頜下腺,結(jié)果參照Elke等[4]制定的涎腺超聲簡(jiǎn)化評(píng)分系統(tǒng)評(píng)定,0分:正常腺體,回聲均勻;1分:實(shí)質(zhì)回聲減低,輕度不均勻,可見(jiàn)少許高回聲線;2分:實(shí)質(zhì)明顯回聲不均勻,彌漫分布的低回聲結(jié)節(jié),直徑<2mm,高回聲線增多;3分:結(jié)節(jié)狀低呼聲區(qū)增大融合,直徑2~6mm,高回聲線分布雜亂;4分:低回聲結(jié)節(jié)>6mm,或腺體萎縮,多發(fā)高回聲線。將涎腺超聲分≤2分的患者視為早期pSS患者。

      1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以表示,組間比較采用方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)。采用Spearman秩相關(guān)分析 pSS患者血清 BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6 水平與涎腺超聲評(píng)分的相關(guān)性。P<0.05為差異統(tǒng)有計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      2.1 3 組血清 BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6 比較3組血清BAFF、TNF-ɑ、IL-1β比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均 P<0.05),其中 pSS組患者血清 BAFF、TNF-ɑ、IL-1β明顯高于RA組與健康對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05);而3組APRIL及IL-6比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05),見(jiàn)表1。

      表 1 3 組血清 BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6 比較

      2.2 涎腺超聲檢查結(jié)果 pSS患者涎腺超聲評(píng)分0分0例,1分5例,2分18例,3分47例,4分10例。涎腺超聲評(píng)分≤2分的早期pSS患者共23例。

      2.3 pSS 患者血清 BAFF、APRIL、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6與涎腺超聲評(píng)分的相關(guān)性 pSS患者血清APRIL、TNF-ɑ、IL-6與涎腺超聲評(píng)分均無(wú)相關(guān)性(r=-0.102、0.098和-0.141,均P>0.05),血清BAFF與涎腺評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.462,P<0.05),血清 IL-1β 與涎腺評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.403,P<0.05)。

      2.4 涎腺超聲與實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)的診斷效能比較 涎腺超聲、血清BAFF對(duì)pSS診斷的靈敏度高于抗SSA/SSB和RF,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),見(jiàn)表2。

      表2 涎腺超聲與實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)的診斷效能比較(%)

      2.5 涎腺超聲聯(lián)合血清BAFF檢測(cè)在涎腺超聲評(píng)分≤2分pSS患者中診斷的靈敏度及特異度 對(duì)于涎腺超聲評(píng)分≤2分的23例早期pSS患者,涎腺超聲聯(lián)合BAFF檢測(cè)診斷特異度達(dá)到96.77%,見(jiàn)表3。

      表3 涎腺超聲聯(lián)合BAFF檢測(cè)在涎腺評(píng)分≤2分pSS患者中診斷的靈敏度及特異度(%)

      3 討論

      pSS是一種常見(jiàn)病、多發(fā)病,主要累及外分泌腺,至今病因尚不十分清楚[5],且缺乏靈敏度及特異度均高的單項(xiàng)檢查手段[6],常常被誤診,患者從初發(fā)癥狀到最后確診可長(zhǎng)達(dá)20余年,給患者造成長(zhǎng)期精神與肉體上的痛苦[7]。隨著對(duì)pSS認(rèn)識(shí)的逐漸深入,其分類標(biāo)準(zhǔn)不斷修正與改善,當(dāng)前普遍應(yīng)用的是EULAR 2002年修訂的pSS分類標(biāo)準(zhǔn)[2],其特異度較高(98.7%),但靈敏度較差(77.9%),對(duì)于新發(fā)pSS或疑似pSS的患者易因缺乏特異度而延誤診斷。近年來(lái)涎腺超聲因其無(wú)創(chuàng)、方便、價(jià)格低廉等優(yōu)勢(shì)受到關(guān)注,大量研究表明,可提供豐富的定性、定量診斷信息,在鑒別診斷pSS中有較高的靈敏度及特異度[8]。2012年ACR提出以血清學(xué)指標(biāo)、角膜熒光染色、唇腺活檢3項(xiàng)檢查組成的簡(jiǎn)化的分類標(biāo)準(zhǔn)[9],克服了主觀因素的影響,降低了誤診率,但尚存在有創(chuàng)的唇腺活檢不能普遍實(shí)行或患者接受度較低等不足。

      2013年Divi等[10]將涎腺超聲列入分類標(biāo)準(zhǔn)中,在2002年pSS分類標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上提出了新的分類標(biāo)準(zhǔn),其靈敏度為85.7%,特異度為94.9%,靈敏度明顯高于2002年標(biāo)準(zhǔn),特異度相似。該研究認(rèn)為對(duì)于疑診患者,唇腺活檢可在涎腺超聲檢查結(jié)果陰性以后再完善,以減輕患者有創(chuàng)檢查的痛苦??傊?,這項(xiàng)研究預(yù)示了涎腺超聲良好的應(yīng)用前景,減低了早期pSS的漏診率,減少了唇腺活檢等有創(chuàng)檢查帶來(lái)的不便。本研究通過(guò)對(duì)比涎腺超聲與抗SSA/SSB抗體、RF等臨床常用指標(biāo)在pSS診斷中的價(jià)值,也發(fā)現(xiàn)涎腺超聲對(duì)pSS的診斷有更高的靈敏度,且特異度相當(dāng)。但是涎腺超聲檢查所發(fā)現(xiàn)的低回聲結(jié)節(jié)或高回聲線,亦不是pSS患者涎腺早期改變,需要新的指標(biāo)加以補(bǔ)充。

      BAFF是新近發(fā)現(xiàn)的TNF超家族成員之一,基因定位于染色體13q32~34,主要是由巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞分泌產(chǎn)生,活化的T細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞也有少量表達(dá)。它能促進(jìn)B淋巴細(xì)胞增生、分化和產(chǎn)生Ig,在體液免疫中起重要作用[11]。pSS是一類侵犯外分泌腺器官,并可累及多臟器的系統(tǒng)性自身免疫性疾病,血清中存在多種異常的自身抗體,且常伴有多種Ig水平升高,提示B細(xì)胞功能異常、體液免疫紊亂參與其發(fā)病。

      2001年Joanna等[12]研究發(fā)現(xiàn)BAFF的轉(zhuǎn)基因小鼠隨著生長(zhǎng)出現(xiàn)了如唾液腺炎、唾液減少等pSS樣改變。Joanna等[12]推測(cè)BAFF的轉(zhuǎn)基因小鼠產(chǎn)生疾病的原因可能是隨著脾的成熟,在BAFF的刺激下超過(guò)一個(gè)耐受點(diǎn)對(duì)自動(dòng)反應(yīng)B細(xì)胞產(chǎn)生一種過(guò)度存活信號(hào),從而調(diào)節(jié)B細(xì)胞的分化。因此,BAFF誘導(dǎo)的B細(xì)胞的分化和耐受可能是pSS的病理學(xué)基礎(chǔ)。在人類,也有研究提示pSS與BAFF水平升高有關(guān)。Szodoray等[13]研究發(fā)現(xiàn),在BAFF水平升高的pSS患者中伴有高丙種球蛋白血癥,提示過(guò)度的BAFF刺激可導(dǎo)致B細(xì)胞的增殖進(jìn)而產(chǎn)生大量的Ig。Lavie等[14]研究發(fā)現(xiàn),在pSS患者的血清及唾液腺中均可發(fā)現(xiàn)BAFF水平的升高,在淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)的唾液腺中高表達(dá)BAFF,且高于血清BAFF水平。

      本研究也顯示pSS患者血清BAFF、IL-1β、TNF-ɑ明顯升高,提示pSS患者存在B細(xì)胞的異常增殖與功能亢進(jìn)。pSS患者血清BAFF與涎腺評(píng)分呈負(fù)相關(guān),提示pSS患者血清BAFF在疾病的早期即有明顯升高,有助于早期診斷;血清IL-1β與涎腺評(píng)分呈正相關(guān),提示血清IL-1β與疾病的嚴(yán)重程度更相關(guān)。因此,在pSS診治過(guò)程中定期檢測(cè)BAFF、IL-1β,有助于更準(zhǔn)確地評(píng)估疾病發(fā)展階段或嚴(yán)重程度。

      隨著小器官超聲技術(shù)的成熟,采用無(wú)創(chuàng)、安全的超聲技術(shù)評(píng)價(jià)和隨訪pSS的靶器官腮腺、頜下腺的功能和形態(tài)成為可能。pSS患者涎腺二維超聲圖像有其特異性表現(xiàn),通過(guò)此項(xiàng)檢查能降低早期pSS的漏診率,但靈敏度較低。本研究發(fā)現(xiàn)pSS患者血清BAFF在疾病的早期即有明顯升高,對(duì)于涎腺超聲評(píng)分≤2分的pSS患者,涎腺超聲聯(lián)合BAFF檢測(cè)可以進(jìn)一步提高診斷的特異度,可作為早期篩查指標(biāo)。

      綜上所述,pSS患者血清BAFF在疾病的早期即有明顯升高,涎腺超聲聯(lián)合BAFF檢測(cè)可提高診斷的特異度,有助于pSS的早期診斷。

      [1] 張霞,何菁.涎腺超聲對(duì)干燥綜合征診斷的貢獻(xiàn):是否作為新的診斷標(biāo)準(zhǔn)[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志,2013,17(10):713.doi:10.3760/cma.j.issn.1007-7480.2013.10.017.

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      (本文由浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病學(xué)分會(huì)推薦)

      Serum BAFF test combined with salivary gland ultrasonography in diagnosis of primary Sjogren's syndrome


      GENG Baoqing,HUANG Xianqian,GAN Minzhi,et al.
      Department of Rheumatology,Ningbo Second Municipal Hospital,Ningbo 315010,China

      Objective To assess the value of serum BAFF level combined with salivary gland ultrasonography in diagnosis of primary Sjogren's syndrome(pSS). Methods The serum levels of BAFF,APRIL,TNF-ɑ,IL-1β and IL-6 were measured by ELISA in 80 pSS patients,60 rheumatoid arthritis(RA)patients and 60 healthy controls.Salivary gland was examined with two-dimensional ultrasonography in three groups.The correlation of serum levels of BAFF,APRIL,TNF-ɑ,IL-1β,IL-6 and salivary gland ultrasonography with pSS was evaluated. Results The serum levels of BAFF,IL-1β,TNF-ɑ in pSS patients were significantly higher than those in RA patients and healthy controls(all P<0.05),while there were no significant differences in serum levels of APRIL and IL-6 among tree groups.The salivary gland ultrasound scores was negatively correlated with serum BAFF level(r=-0.462,P<0.05)and positively correlated with IL-1β level(r=0.403,P<0.05).The sensitivity of salivary ultrasonography in diagnosis of pSS was higher than that of SSA/SSB and the specificity was similar.The sensitivity of serum BAFF in diagnosis of pSS was higher than that of SSA/SSB,but the specificity was lower.For pSS patients with ultrasonic score<2min,the specificity of ultrasonography combined with BAFF was increased to 96.77%. Conclusion Serum BAFF measurement combined with salivary gland ultrasound examination can be used for screening and diagnosis of primary Sjogren's syndrome.

      B cellactivating factor Salivary gland ultrasonography Primary Sjogren's syndrome

      10.12056/j.issn.1006-2785.2017.39.21.2017-1608

      2017年寧波市自然基金(2017A610208)

      315010 寧波市第二醫(yī)院風(fēng)濕免疫科

      陳勇,E-mail:nbdeyycy@163.com

      2017-07-07)

      陳麗)

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