李少芳，韋 敏

(廣西壯族自治區(qū)南寧市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，廣西 南寧 530022)

用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測血小板的影響因素研究

李少芳，韋 敏

(廣西壯族自治區(qū)南寧市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，廣西 南寧 530022)

目的：探討用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測血小板的影響因素。方法：將2014年7月至2016年10月在廣西壯族自治區(qū)南寧市第一人民醫(yī)院實(shí)施血小板輸注治療的60例患者作為研究對象。采集本組患者的空腹靜脈血，分別使用手工顯微鏡法及電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀對血液標(biāo)本進(jìn)行血小板檢測，然后分析對本組血液標(biāo)本的血小板異常直方圖及血小板正常直方圖中存在大血小板及血小板聚集的情況，并觀察對本組中存在60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小紅細(xì)胞的血液樣本采用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀與手工顯微鏡法進(jìn)行血小板檢測的情況。結(jié)果：與血小板異常直方圖相比，本組血液標(biāo)本的血小板正常直方圖中血小板聚集的檢出率及大血小板的檢出率均較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與血小板異常直方圖相比，血小板正常直方圖中血小板的計數(shù)較多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與采用手工顯微鏡法進(jìn)行血小板檢測相比，在采用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀對本組中存在體積為60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小紅細(xì)胞的血液樣本進(jìn)行血小板檢測時，血小板的檢出數(shù)均較多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。隨著血液標(biāo)本中小紅細(xì)胞體積的縮小，在對其進(jìn)行電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測時血小板的檢出數(shù)逐漸增多。結(jié)論：在對血液樣本進(jìn)行電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測時，檢出血小板的數(shù)量會受到血液樣本中存在大血小板、血小板聚集及紅細(xì)胞體積過小等因素的影響，其檢測結(jié)果存在一定的誤差。

電阻抗法；血小板；影響因素

血小板是巨核細(xì)胞脫顆粒產(chǎn)生的具有生理及酶活性的無核細(xì)胞，在某些生理和病理過程（如生理性止血）中可發(fā)揮重要的作用。進(jìn)行血小板檢測是臨床上研究凝血及止血功能障礙的重要方法。獲得準(zhǔn)確的血小板數(shù)量可為臨床醫(yī)師診治出血性疾病及血栓性疾病提供重要的參考數(shù)據(jù)。自動血細(xì)胞分析儀是臨床上測定血小板的常用儀器，用其檢測血小板具有可重復(fù)操作、操作方便快捷等特點(diǎn)，但用其測定血小板數(shù)量的準(zhǔn)確度會受到一些因素的干擾[1]。本研究主要探討用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測血小板數(shù)量的相關(guān)影響因素。

1 資料和方法

1.1 一般資料

本研究的對象為2014年7月至2016年10月在我院進(jìn)行血小板輸注治療的60例患者。在這些患者中，有男41例，女19例；其年齡為45～70歲，平均年齡為（60.65±8.50）歲。這些患者均排除了發(fā)生惡性腫瘤、腦血管疾病及多器官功能衰竭的可能，均知曉本研究的內(nèi)容并簽署了對本研究的知情同意書。本研究已經(jīng)通過本院倫理協(xié)會的審核與同意。

1.2 方法

抽取本組患者2.0ml的空腹靜脈血，置于真空抗凝管（IMPROVE公司生產(chǎn)，EDTA-K2）中混勻，置于室溫下，分別采用手工顯微鏡及電阻抗法血細(xì)胞分析儀（邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，BC3000）檢測其中血小板的數(shù)量。

1.3 觀察指標(biāo)

1）分析對本組血液標(biāo)本采用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測時血小板異常直方圖及血小板正常直方圖中存在大血小板及血小板聚集的情況。2）分析對本組中存在60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小紅細(xì)胞的血液樣本采用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀與手工顯微鏡法進(jìn)行血小板檢測的結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件對本研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計數(shù)資料用%表示，采用X2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對本組血液標(biāo)本采用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測時血小板直方圖的分析

在對本組血液標(biāo)本采用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測時，共檢出血小板異常直方圖20例，血小板正常直方圖40例。與血小板異常直方圖相比，血小板正常直方圖中血小板聚集的檢出率及大血小板的檢出率均較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與血小板異常直方圖相比，血小板正常直方圖中血小板的數(shù)量較多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。對本組中檢出血小板異常直方圖與血小板正常直方圖的血液樣本進(jìn)行手工顯微鏡檢測時檢出血小板的數(shù)量相比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。詳情見表1。

2.2 對存在不同體積小紅細(xì)胞的血液樣本進(jìn)行血小板檢測的情況分析

與采用手工顯微鏡法進(jìn)行血小板檢測相比，在采用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀對本組中存在體積為60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小紅細(xì)胞的血液樣本進(jìn)行血小板檢測時，血小板的檢出數(shù)均較多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。隨著血液標(biāo)本中小紅細(xì)胞體積的縮小，在對其進(jìn)行電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測時血小板的檢出數(shù)逐漸增多。詳情見表2。

表1 對本組血液標(biāo)本采用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測時血小板直方圖的分析

表2 對存在不同體積小紅細(xì)胞的血液樣本進(jìn)行血小板檢測的情況分析(×109/L，±s)

表2 對存在不同體積小紅細(xì)胞的血液樣本進(jìn)行血小板檢測的情況分析(×109/L，±s)

檢測方法 小紅細(xì)胞體積＞70 f1（n=26）小紅細(xì)胞體積＜50 f1（n=5）手工顯微鏡檢測血小板的數(shù)量 206.68±19.92 242.12±21.68 256.94±24.26 271.88±34.62自動血細(xì)胞分析儀檢測血小板的數(shù)量 214.06±24.64 260.95±32.45 347.88±42.62 488.87±63.33 t值 1.188 2.047 7.867 12.755 P值 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05小紅細(xì)胞體積為60～70 f1（n=18）小紅細(xì)胞體積為50～59 f1（n=11）

3 討論

近年來,需要進(jìn)行血小板輸注治療的患者逐漸增多。血小板極易粘附于破損的血管壁上。在臨床上，檢測血小板數(shù)量的方法雖較多，但其準(zhǔn)確性均較差[2-3]。

電阻抗法是一種重復(fù)性高、操作快速的檢測方法。此法可根據(jù)血細(xì)胞相對非導(dǎo)電的性質(zhì)，以電解質(zhì)溶液中懸浮的血細(xì)胞顆粒經(jīng)過小孔時引發(fā)的電阻變化為向?qū)В^為準(zhǔn)確地測定血細(xì)胞的計數(shù)。但是，對發(fā)生異常情況的血液標(biāo)本采用電阻抗法進(jìn)行檢測，難以準(zhǔn)確測出血小板的數(shù)量。例如，在對患有糖尿病、血小板減少性紫癜等疾病的受檢者采用電阻抗法進(jìn)行血小板檢測時，檢出血小板的數(shù)量往往偏低。我們認(rèn)為，導(dǎo)致這種情況的因素可能包括以下幾種：1）血液標(biāo)本中存在大血小板及血小板聚集現(xiàn)象對血小板數(shù)量測定的影響。在用電阻抗法進(jìn)行血小板檢測時，一定量的大血小板未被計入血小板數(shù)，進(jìn)而造成檢出的血小板的數(shù)量偏低[4]。本研究的結(jié)果顯示，與血小板異常直方圖相比，血小板正常直方圖中血小板聚集的檢出率及大血小板的檢出率均較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與血小板異常直方圖相比，血小板正常直方圖中血小板的計數(shù)較多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。可見，存在大血小板及血小板聚集現(xiàn)象是影響采用電阻抗法進(jìn)行血小板檢測準(zhǔn)確度的關(guān)鍵因素。在采用此法進(jìn)行血小板檢測時若出現(xiàn)血小板異常直方圖，應(yīng)采用手工顯微鏡法重新進(jìn)行血小板檢測。2）血液標(biāo)本中小紅細(xì)胞的干擾。電阻抗法是通過對同一系統(tǒng)中不同顆粒的大小進(jìn)行區(qū)分來鑒別紅細(xì)胞與血小板。當(dāng)血液中小紅細(xì)胞的量較大時可導(dǎo)致血小板上限區(qū)域改變。當(dāng)血液標(biāo)本中紅細(xì)胞的體積超過70 f1時，對其進(jìn)行電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測的準(zhǔn)確度一般不會受其中血小板上限區(qū)域的干擾。因此對其進(jìn)行手工顯微鏡檢測與電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測的結(jié)果無明顯的差異。當(dāng)血液標(biāo)本中紅細(xì)胞的體積≤70 f1時，對其進(jìn)行電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測的準(zhǔn)確度會受到血小板上限區(qū)域的干擾，其檢出的血小板直方圖上會錯誤地顯示出小紅細(xì)胞，進(jìn)而可導(dǎo)致血小板的檢出數(shù)偏高。我們在本次研究中發(fā)現(xiàn)，隨著血液標(biāo)本中小紅細(xì)胞體積的縮小，在對其采用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測時血小板的檢出數(shù)逐漸增多?？梢?，在對血液標(biāo)本進(jìn)行血小板檢測時若發(fā)現(xiàn)其中存在體積較小的小紅細(xì)胞，應(yīng)采用二維激光散射或流式細(xì)胞計數(shù)法重新進(jìn)行血小板檢測。3）血液標(biāo)本的放置時間過長。將血液標(biāo)本放置較長的時間易使其中產(chǎn)生巨大血小板。巨大血小板若在體積為100～250 f1的紅細(xì)胞直方圖中出現(xiàn)，可導(dǎo)致血小板的檢出數(shù)偏低。因此，在采集血液標(biāo)本后應(yīng)在1 h內(nèi)完成血小板檢測，而且應(yīng)對全血標(biāo)本頻繁地進(jìn)行混勻操作，以提高檢測血小板數(shù)量的準(zhǔn)確率。4）所用試劑的質(zhì)量較差。在進(jìn)行血小板檢測時所用試劑質(zhì)量的好壞可直接決定血小板的檢出數(shù)，因此我們應(yīng)盡可能使用與檢測儀器的操作原理相匹配的試劑。對血液標(biāo)本所用稀釋液的離子強(qiáng)度及滲透壓等可對檢測結(jié)果造成不同程度的影響。因此，在對血液標(biāo)本進(jìn)行檢測時應(yīng)嚴(yán)防所用的稀釋液受到污染，并禁止使用污染試劑（污染試劑中所含的雜質(zhì)微?？蓪?dǎo)致血小板數(shù)量偏高）。此外，在進(jìn)行血液標(biāo)本檢測時使用不同的抗凝劑也可在一定程度上影響檢測結(jié)果[5]。

綜上所述，在對血液樣本進(jìn)行電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀檢測時，檢出血小板的數(shù)量會受到血液樣本中存在大血小板、血小板聚集及紅細(xì)胞體積過小等因素的影響，其檢測結(jié)果存在一定的誤差。在采用電阻抗法自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血小板檢測的過程中，應(yīng)盡可能消除上述因素對檢測結(jié)果的影響，并應(yīng)在檢出血小板異常直方圖時采用手工顯微鏡法重新進(jìn)行檢測。

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[2]張馳,張洪波.CELL-DYN Sapphire 血液分析儀的 CD61免疫學(xué)法、光學(xué)法、電阻抗法在低值血小板計數(shù)中的比較與應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2015,30(3):274-279.

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R331.1+43

B

2095-7629-（2017）12-0110-02