孫學(xué)亮,季延濱,尚東維,白東清,崔 培,華旭峰,尤宏?duì)帲惓蓜?/p>
( 1.天津農(nóng)學(xué)院 水產(chǎn)學(xué)院,天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300384;2.天津市寶坻區(qū)里自沽農(nóng)場(chǎng),天津 301809; 3.天津市水產(chǎn)研究所, 天津 300042 )
玉米蛋白粉混合物對(duì)血鸚鵡魚(yú)生化機(jī)能的影響
孫學(xué)亮1,季延濱1,尚東維2,白東清1,崔 培1,華旭峰1,尤宏?duì)?,陳成勛1
( 1.天津農(nóng)學(xué)院 水產(chǎn)學(xué)院,天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300384;2.天津市寶坻區(qū)里自沽農(nóng)場(chǎng),天津 301809; 3.天津市水產(chǎn)研究所, 天津 300042 )
(28±1) ℃水溫下,將體質(zhì)量(8.75±0.88) g血鸚鵡魚(yú)飼養(yǎng)在300 cm×150 cm×80 cm的水泥池中,投喂含不同水平玉米蛋白、磷脂和維生素E混合物的飼料30 d,觀察血鸚鵡魚(yú)的生長(zhǎng)、體色、抗氧化指標(biāo)和肝功能。飼料中玉米蛋白粉按1‰(A1)、3‰(A2)、5‰(A3)的比例分別與磷脂1‰(a1)、3‰(a2),維生素E 1‰(b1)、3‰(b2)混合。試驗(yàn)結(jié)果表明,A1a1組中血鸚鵡魚(yú)體色亮度顯著高于對(duì)照組(P<0.05),A2a2組和A3b1組中血鸚鵡魚(yú)黃度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。除A1a1組外,對(duì)照組肝臟中的類胡蘿卜素含量顯著低于其他組(P<0.05)。A1b1組血鸚鵡魚(yú)肌肉組織中類胡蘿卜素的含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。A3b1組的相對(duì)質(zhì)量增加率顯著高于其他組(P<0.05)。A3b1組血鸚鵡魚(yú)特定生長(zhǎng)率最高,顯著高于除A3a1、A3a2、A3b2組外的其他各組(P<0.05);A2b1和A2b2組血鸚鵡魚(yú)肝胰臟超氧化物歧化酶比活力顯著高于其他組(P<0.05);A2b2組肝胰臟過(guò)氧化氫酶比活力顯著高于其他組(P<0.05)。A1a2、A2b1、A3a1組血鸚鵡魚(yú)肝胰臟丙二醛含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。A3a1組血鸚鵡魚(yú)谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。綜合考慮,含3‰~5‰的玉米蛋白粉和1‰~3‰維生素E飼料可促進(jìn)血鸚鵡魚(yú)生長(zhǎng)、調(diào)節(jié)體色、增強(qiáng)抗氧化和肝功能。
血鸚鵡魚(yú);玉米蛋白粉;生長(zhǎng);體色;生理機(jī)能
血鸚鵡魚(yú)(Cichlasomacitrinellum×C.synspilum),又名發(fā)財(cái)魚(yú),是由紅魔鬼魚(yú)(C.citrinellum)的雄魚(yú)和紫紅火口魚(yú)(C.synspilum)的雌魚(yú)雜交所得的新品種,幼魚(yú)期體色灰白,成年魚(yú)體態(tài)臃腫,著色處理后體色呈血紅色或粉紅色,故名血鸚鵡魚(yú)[1]。
玉米蛋白粉含蛋白質(zhì)60%以上,淀粉20%和約13%的纖維素、維生素A、谷氨酸等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),還含有15種無(wú)機(jī)鹽以及玉米獨(dú)有的黃色素。它具有特殊的味道和色澤,是一種優(yōu)良的飼用著色劑,資源優(yōu)勢(shì)明顯,不含有毒有害物質(zhì),可直接作飼料蛋白原料[2-3]。維生素E是一種脂溶性維生素,其重要功能之一是抗氧化作用,能有效地防止機(jī)體脂肪過(guò)氧化及外因?qū)е碌难趸?,保護(hù)細(xì)胞骨架、蛋白質(zhì)巰基,維持細(xì)胞膜的正常功能[4]。磷脂是生物細(xì)胞的構(gòu)成物質(zhì),也是生命的基礎(chǔ)物質(zhì)之一。魚(yú)類飼料中的磷脂為卵磷脂,直接影響魚(yú)體攝入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用,促進(jìn)脂肪吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)[5]。
本試驗(yàn)測(cè)定了血鸚鵡魚(yú)的著色指標(biāo)及生化指標(biāo),探討不同比例的玉米蛋白、磷脂和維生素E飼料對(duì)血鸚鵡魚(yú)生長(zhǎng)、著色和免疫功能的影響,以指導(dǎo)血鸚鵡魚(yú)健康飼料的配制。
挑選體質(zhì)健壯,規(guī)格一致,體質(zhì)量(8.75±0.88) g,體長(zhǎng)(3.3±0.5) cm的血鸚鵡魚(yú),共520尾。
玉米蛋白粉:魯洲生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),水分≤12%,粗蛋白≥60%,粗脂肪≤5%,粗纖維≤3%,粗灰分≤2%。
磷脂:鶴喜園磷脂科技有限公司生產(chǎn),含量≥95%。
維生素E:鄭州錦德化工食品添加劑貿(mào)易有限公司生產(chǎn),含量為50%。
1.2.1 飼養(yǎng)管理
在普通飼料的基礎(chǔ)上,噴灑以玉米蛋白粉為主要飼料,添加磷脂和維生素E的混合溶液。將玉米蛋白粉按1‰(A1)、3‰(A2)、5‰(A3)的比例分別與磷脂1‰(a1)、3‰(a2)和維生素E 1‰(b1)、3‰(b2)進(jìn)行混合。設(shè)立空白對(duì)照組,共設(shè)13組。試驗(yàn)魚(yú)養(yǎng)殖在300 cm×150 cm×80 cm水泥池中,20尾/池。水溫(28±1) ℃,pH 6.5~7.5,溶解氧8 mg/L。日投喂3次,日投喂量為魚(yú)體質(zhì)量1%。養(yǎng)殖30 d,每日觀察、記錄魚(yú)的攝食、殘餌及死亡情況。
分別測(cè)量試驗(yàn)前后血鸚鵡魚(yú)的體質(zhì)量、體長(zhǎng)。測(cè)量前擦干魚(yú)體表面水分,用濕布包裹魚(yú)體頭部,放置于電子秤上。按以下公式計(jì)算相對(duì)質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率:
相對(duì)質(zhì)量增加率/%=(m2-m1)/m1×100%
特定生長(zhǎng)率/%·d-1=[(lnm2-lnm1)]/(t2-t1)×100%
式中,m1、m2為t1、t2時(shí)刻的平均體質(zhì)量(g),t為養(yǎng)殖時(shí)間(d)。
1.2.2 指標(biāo)的測(cè)定
血清和組織勻漿的制備:試驗(yàn)結(jié)束時(shí),每箱隨機(jī)抽取15尾魚(yú),尾動(dòng)脈采血,4 ℃、4500 r/min離心30 min,取血清備用。
取約200 mg的肝臟組織塊在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,用移液器加入9倍于組織塊質(zhì)量的預(yù)冷勻漿介質(zhì)(0.86%的生理鹽水),在勻漿器中進(jìn)行勻漿,用勻漿管在冰水中勻漿15 min,4 ℃、4500 r/min離心15 min,取上清液備用。
著色指標(biāo)和類胡蘿卜素含量的測(cè)定:用色差分析儀分別測(cè)量血鸚鵡魚(yú)背部表皮的亮度(L)、紅度(a)、黃度(b)。測(cè)量前擦干魚(yú)體表的水分。樣品以丙酮—石油醚(1∶1體積比)混合溶劑反復(fù)萃取使類胡蘿卜素與其他成分分離,在450 nm波長(zhǎng)條件下進(jìn)行HPLC分析檢測(cè),通過(guò)外標(biāo)法計(jì)算各種類胡蘿卜素的含量。
抗氧化性能和肝功能的測(cè)定:用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性及丙二醛的含量。
數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,用Excel 2007及SPSS 13.0分析處理,用Excel軟件制圖表。
除對(duì)照組和A2b2組外,A3b2組中亮度顯著低于其他組(P<0.05),對(duì)照組和A2b2組差異不顯著(P>0.05);A1a1組中亮度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。試驗(yàn)組中紅度均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。A2a2組和A3b1組中黃度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)(表1)。
表1 玉米蛋白混合物對(duì)血鸚鵡魚(yú)著色指標(biāo)的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)
注:標(biāo)相同字母的平均值間差異不顯著(P>0.05),標(biāo)不同字母的平均值間差異顯著(P<0.05),下同.
除A1a1組外,對(duì)照組魚(yú)肝臟中類胡蘿卜素的含量顯著低于其他組(P<0.05);肌肉中A1b1組的類胡蘿卜素含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)(表2)。
A3b1組魚(yú)的相對(duì)質(zhì)量增加率最高,顯著高于其他組(P<0.05);A3b1組魚(yú)特定生長(zhǎng)率最高,顯著高于除A3a1、A3a2、A3b2組外的其他各組(P<0.05)(表3)。
A1a1、A1a2和對(duì)照組魚(yú)肝胰臟中超氧化物歧化酶的比活力顯著低于其他組(P<0.05),A2b1和A2b2組顯著高于其他組(P<0.05);A2b2組魚(yú)肝胰臟過(guò)氧化氫酶比活力最大,顯著高于其他組(P<0.05);A1a2、A2b1、A3a1組魚(yú)肝胰臟丙二醛含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),其他組與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)(表4)。
表2 玉米蛋白混合物對(duì)組織中類胡蘿卜素含量的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差) mg/kg
表3 玉米蛋白混合物對(duì)血鸚鵡魚(yú)生長(zhǎng)指標(biāo)的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)
表4 玉米蛋白混合物對(duì)血鸚鵡魚(yú)肝胰臟中抗氧化指標(biāo)的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)
各組間魚(yú)谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均無(wú)顯著差異(P>0.05);A3a1組谷丙轉(zhuǎn)氨酶顯著高于對(duì)照組(P<0.05)(表5)。
表5 玉米蛋白混合物對(duì)血鸚鵡魚(yú)肝功能指標(biāo)的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)
玉米蛋白粉具有特殊的味道和色澤,葉黃素含量高達(dá)90~180 mg/kg,是黃玉米的5倍以上,能有效地被吸收,使魚(yú)體呈金黃色,是優(yōu)良的飼用著色劑。類胡蘿卜素是一類廣泛存在于高等植物中的烯萜類化合物,包括胡蘿卜素和葉黃素類,是高等植物、藻類和藍(lán)細(xì)菌光合膜的組成成分[6]。本試驗(yàn)中,除對(duì)照組和A2b2組外,A3b2組中亮度顯著低于其他組(P<0.05);紅度均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。除A1a1組外,對(duì)照組肝臟組織中的類胡蘿卜素含量顯著低于其他組(P<0.05)。A1b1組肌肉組織中類胡蘿卜素的含量顯著高于其他組(P<0.05)。玉米蛋白粉在魚(yú)體內(nèi)代謝為蝦青素,使體色更為鮮艷。程云生等[7]研究結(jié)果表明,紅辣椒粉、螺旋藻、玉米蛋白粉3種著色劑混合投喂,著色效果顯著優(yōu)于各最佳單組。向梟等[8]認(rèn)為,當(dāng)魚(yú)類從飼料中吸收類胡蘿卜素后,一部分類胡蘿卜素在魚(yú)體內(nèi)轉(zhuǎn)化為維生素 A,作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被魚(yú)體利用或直接、間接地參與孕酮的生成,另一部分類胡蘿卜素則在魚(yú)蝦皮層、肌肉和外殼等處沉積,改變了魚(yú)蝦的色澤。韓學(xué)哲[9]認(rèn)為,類胡蘿卜素對(duì)魚(yú)體的著色作用與其被吸收、沉積的量以及其被代謝損失的量相關(guān)。當(dāng)餌料中類胡蘿卜素含量較低時(shí),其在消化吸收過(guò)程中可能被氧化代謝掉,起不到著色效果; 當(dāng)類胡蘿卜素含量過(guò)高時(shí),脂蛋白載體或其受體可能被飽和而受到抑制。類胡蘿卜素的添加量最適時(shí)才能達(dá)到最佳著色效果。
血鸚鵡魚(yú)是肉食性為主的雜食性魚(yú)類,為觀賞需要,保持圓潤(rùn)的體態(tài)尤為重要,因此飼料中動(dòng)物蛋白和脂肪的含量要求較高。玉米蛋白粉中脂肪含量遠(yuǎn)高于豆餅類。本試驗(yàn)顯示,A3b1組試驗(yàn)魚(yú)相對(duì)質(zhì)量增加率最高,顯著高于其他組(P<0.05);特定生長(zhǎng)率最高,顯著高于除A3a1、A3a2、A3b2組外的其他各組。本試驗(yàn)表明飼料中添加3%玉米蛋白粉有效提高了血鸚鵡魚(yú)的生長(zhǎng)率,有利于飼用蛋白質(zhì)、脂肪資源的開(kāi)發(fā)利用。玉米蛋白粉添加量過(guò)高會(huì)抑制魚(yú)類生長(zhǎng),朱磊等[10]研究發(fā)現(xiàn),在黃顙魚(yú)(Pelteobagrusfulvidraco)擠壓膨化飼料中可以使用6%的玉米蛋白粉,能夠維持黃顙魚(yú)的正常生產(chǎn)性能和正常生理功能,隨著玉米蛋白粉用量的增加,飼料系數(shù)呈增高的趨勢(shì),特定生長(zhǎng)率呈降低的趨勢(shì),蛋白質(zhì)沉積率也有下降趨勢(shì)。
超氧化物歧化酶能消除生物體新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)[11]。清除生物體內(nèi)自由基的首要物質(zhì)就是超氧化物歧化酶,它可對(duì)抗與阻斷因氧自由基對(duì)細(xì)胞造成的損害,及時(shí)修復(fù)受損細(xì)胞,復(fù)原因自由基造成的對(duì)細(xì)胞的傷害。過(guò)氧化氫酶存在于紅細(xì)胞及某些組織內(nèi)的過(guò)氧化體中,催化H2O2分解為H2O與O2,使得H2O2不致于與O2在鐵螯合物作用下反應(yīng)生成有害的-OH。丙二醛是脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)中的降解產(chǎn)物,脂質(zhì)過(guò)氧化作用不僅將活性氧轉(zhuǎn)化成活性化學(xué)劑,即非自由基性的質(zhì)類分解產(chǎn)物,而且通過(guò)鏈?zhǔn)交蜴準(zhǔn)街ф湻磻?yīng),放大活性氧的作用。
本試驗(yàn)表明,A1a1、A1a2和對(duì)照組魚(yú)肝胰臟超氧化物岐化酶比活力顯著低于其他組(P<0.05),A2b1和A2b2顯著高于其他組(P<0.05)。維生素E作為體脂的主要抗氧化劑,可保護(hù)體細(xì)胞免受自由基的破壞,并使細(xì)胞膜維持正常功能。本試驗(yàn)在基礎(chǔ)飼料中添加3‰玉米蛋白粉和1‰~3‰維生素E,有助于提高血鸚鵡魚(yú)肝胰臟超氧化物歧化酶的比活力。徐力等[12]研究表明,鏈長(zhǎng)為2~6個(gè)氨基酸殘基的玉米肽,具有較好的類超氧化物歧化酶活性。本試驗(yàn)中,A2b2組肝胰臟過(guò)氧化氫酶比活力最大,顯著高于其他組(P<0.05);A1a2、A2b1、A3a1組肝胰臟丙二醇含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),其他組與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。在超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶的聯(lián)合作用下,丙二醛作為脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)中的降解產(chǎn)物,減少了因脂質(zhì)過(guò)氧化物的分解產(chǎn)物引起細(xì)胞損傷。邢克智等[13]研究表明,適當(dāng)添加維生素E可以提高點(diǎn)帶石斑魚(yú)(Epinephelusmalabaricus)的抗氧化能力。
血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力的變化是反應(yīng)肝功能正常與否的重要指標(biāo)[14]。本試驗(yàn)中血鸚鵡魚(yú)各組間肝功能指標(biāo)谷草轉(zhuǎn)氨酶均無(wú)顯著差異(P>0.05)。A3a1組谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。大量醫(yī)學(xué)試驗(yàn)表明谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是肝細(xì)胞受損最靈敏指標(biāo)之一,血清中微量的轉(zhuǎn)氨酶活力即可表征肝功能己受到損傷[15]。正常情況下血清中的轉(zhuǎn)氨酶活性值很低;當(dāng)組織中毒病變或受損組織范圍較大時(shí),血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量會(huì)相應(yīng)上升且活性也會(huì)相應(yīng)增強(qiáng)[16]。陳權(quán)文等[17]研究發(fā)現(xiàn),在飼料中添加玉米蛋白粉,中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活力顯著高于其他組,提示中華絨螯蟹的肝胰臟可能受到了損傷。因此,將玉米蛋白粉與磷脂和維生素E混合添加到飼料中,在一定程度上保持了肝功能水平的正常,對(duì)肝功能基本無(wú)顯著損傷。
綜合考慮,3‰~5‰的玉米蛋白粉和1‰~3‰的維生素E在促進(jìn)血鸚鵡魚(yú)生長(zhǎng)、體色、抗氧化和肝功能等方面具有較好效果。在血鸚鵡魚(yú)養(yǎng)殖中,可以使用這種比例的配合飼料,保證血鸚鵡魚(yú)生長(zhǎng)速度,魚(yú)體健康,提高養(yǎng)殖產(chǎn)量,獲得健康且形態(tài)優(yōu)美、圓潤(rùn)、色澤鮮艷的血鸚鵡魚(yú)。
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EffectsofCornProteinMixtureonPhysiologicalFunctioninBloodParrotCichlasomasynspilum♀×C.citrinellum♂
SUN Xueliang1, JI Yanbin1,SHANG Dongwei2,BAI Dongqing1, CUI Pei1, HUA Xufeng1,YOU Hongzheng3, CHEN Chengxun1
( 1.Tianjin Key Laboratory of Aqua-ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China; 2. Tianjin Lizigu Farm, Tianjin 301809,China; 3. Tianjin Fisheries Research Institute, Tianjin 300042, China )
A 30 day feeding trail was conducted to study the effects of corn protein mixture on growth, body-color, antioxidant index and liver function in blood parrot (Cichlasomasynspilum♀×C.citrinellum♂) at water temperature of (28±1) ℃. Blood parrot with body weight of (8.75±0.88) g were reared in 300 cm×150 cm×80 cm cement tanks and fed to apparent satiation diets containing corn protein mixture at a rate of corn protein 1‰ (A1), 3‰ (A2) and 5‰(A3); phospholipid 1‰ (a1) and 3‰ (a2) and vitamin E 1‰(b1) and 3‰ (b2). The results showed that there was significantly higher brightness in body in A1a1group than that in the control group (P<0.05), and there was significantly higher yellow index in A2a2group and A3b1group than that in the control group (P<0.05) . The carotenoid content in the blood parrot was found to be significantly lower in the control group than in other groups (P<0.05) except for A1a1group. The blood parrot in A1b1group had significantly higher muscular carotenoid content than the fish in the control group did (P<0.05). There was significantly higher relative weight gain rate in the fish in A3b1than that in other groups (P<0.05), with the maximal specific growth rate, significantly higher than in the other groups except for A3a1, A3a2, and A3b2groups (P<0.05). Superoxide dismutase (SOD) activities in hepatopancreas were significantly higher in A2b1and A2b2groups than those in other groups (P<0.05), and catalase (CAT) activity in hepatopancreas was significantly higher in A2b2group than that in other groups (P<0.05). There were significantly higher MDA contents in hepatopancreas in A1a2, A2b1and A3a1groups than those in the control group (P<0.05). The blood parrot in A3a1group had significantly higher activity of glutamic-pyruvic transaminase (ALT) than the fish in the control group did (P<0.05). It is concluded that diet containing 3‰—5‰ of corn protein and 1‰—3‰ of vitamin E leads to improvement of good growth, body color, antioxidant and liver function.
blood parrot; corn protein; growth; body-color; physiological function
10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.04.014
S965.8
A
1003-1111(2017)04-0488-05
2016-05-27;
2016-09-23.
國(guó)家星火計(jì)劃項(xiàng)目(2014GA610001);天津市高等學(xué)校創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)基金資助項(xiàng)目(TD12-5018);天津市科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(14ZCZDNC00010);天津市科技計(jì)劃項(xiàng)目(14ZCDGNC00029);天津市科技型中小企業(yè)創(chuàng)新項(xiàng)目(14ZXCXNC00058);天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃(重點(diǎn)項(xiàng)目)(13JCZDJC29200).
孫學(xué)亮(1984—),男,碩士;研究方向:水產(chǎn)養(yǎng)殖.E-mail:sunxueliang12345@163.com.通訊作者:陳成勛(1976—),男,研究員;研究方向:水產(chǎn)養(yǎng)殖.E-mail:ccxnxy@163.com.