淺談常規(guī)蔬菜農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)

楊發(fā)瀅

(四川省會(huì)東縣鲹魚河鎮(zhèn)綜合服務(wù)中心，四川 會(huì)東 615200)

農(nóng)藥殘留物不僅對(duì)人體健康有影響，還對(duì)環(huán)境的生態(tài)安全有重大的影響。由于會(huì)東縣耕作農(nóng)戶分散、使用農(nóng)藥的安全意識(shí)淡薄，農(nóng)作物和食品流通管理上缺乏必要的檢查和準(zhǔn)入制度，所以對(duì)常規(guī)蔬菜等農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)在社會(huì)生活中顯得十分迫切。

1 農(nóng)藥殘留危害

隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展，農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)越來(lái)越依賴于農(nóng)藥、抗生素和激素等外源物質(zhì)。全縣農(nóng)藥在糧食、蔬菜、水果、烤煙上的用量居高不下，這些物質(zhì)的不合理使用導(dǎo)致了農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留超標(biāo)。長(zhǎng)期食用農(nóng)藥殘留超標(biāo)的農(nóng)副產(chǎn)品，雖然不會(huì)導(dǎo)致急性中毒，但可能引起人和動(dòng)物的慢性中毒，導(dǎo)致疾病的發(fā)生，誘發(fā)癌癥，甚至影響到下一代。另外農(nóng)藥殘留超標(biāo)還會(huì)影響農(nóng)產(chǎn)品的貿(mào)易。

2 農(nóng)殘超標(biāo)的主要種類

造成蔬菜農(nóng)藥殘留量超標(biāo)的主要是一些國(guó)家禁止在蔬菜生產(chǎn)中使用的有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，如甲胺磷、氧化樂(lè)果、甲拌磷、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷等。有機(jī)磷、氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯是目前市場(chǎng)上最主要的三類殺蟲劑, 特別是有機(jī)磷類殺蟲劑仍在生產(chǎn)上起主導(dǎo)作用, 更是菜農(nóng)首選使用的一類殺蟲劑。

3 農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用

農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法種類繁多，究其原理來(lái)說(shuō)主要分為兩大類：生化測(cè)定法和色譜檢測(cè)法。會(huì)東縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)站目前都采用NY-16DA型農(nóng)殘測(cè)試儀進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)。NY-16DA型農(nóng)藥殘留速測(cè)儀是根據(jù)國(guó)標(biāo)(GB/T 5009.199～2003)采用酶抑制原理和光電比色法原理研制而成，具有快速、靈敏、操作簡(jiǎn)便、成本低廉等特點(diǎn)。

在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)測(cè)定412nm下吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留，從而實(shí)現(xiàn)有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。現(xiàn)已成為對(duì)果蔬中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速定性初篩檢測(cè)的主流技術(shù)之一，廣泛應(yīng)用于產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)、環(huán)境保護(hù)、農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)基地等部門的蔬菜和水果中的農(nóng)藥殘毒檢測(cè)。

4 常規(guī)蔬菜農(nóng)殘檢測(cè)的技術(shù)

4.1 檢測(cè)對(duì)象

主要是對(duì)農(nóng)藥使用后殘留在蔬菜中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。

4.2 檢測(cè)樣品

蔬菜的根、莖枝、葉。

4.2.1 塊根類和塊莖類的蔬菜 采集塊根或塊莖，去除泥土及其他黏附物。樣本采集量至少為4～6份個(gè)體，且不少于1kg,代表類蔬菜有：馬鈴薯、蘿卜、胡蘿卜、甘薯、山藥等。

4.2.2 鱗莖類疏菜 去除泥土及其他黏附物、根部和老皮，樣本采集量至少為5～8個(gè)體，且不少于1kg。代表類蔬菜有：韭菜、大蔥、蔥頭、大蒜等。

4.2.3 葉類蔬菜 去掉明顯腐爛和萎焉部分的莖葉，菜花和花椰菜取花序和莖。樣品采集量至少為3～5份個(gè)體，且不少于1kg,代表類蔬菜有：小白菜、小青菜、菠菜、芹菜、生菜等。

4.3 檢測(cè)流程

4.3.1 試劑配制 提取液：將1包提取液粉劑倒入500mL燒杯中，加510mL蒸餾水，充分搖勻后待用。酶液：每瓶酶液加入3.1mL提取液，充分搖勻后待用。底物：每瓶底物加入3.1mL蒸餾水，充分搖勻后待用。顯色劑：每瓶顯色劑加入32mL提取液，充分搖勻后備用。

4.3.2 樣品清液配制 取干凈的蔬菜樣品，用天平準(zhǔn)確稱取2g,葉菜取葉片部分，葉片、瓜肉等剪成1cm,置于100mL小燒杯內(nèi)；用吸管吸10mL提取液注入小燒杯中，振蕩5～10min，靜置2分鐘；取上層清液作為樣液。

4.3.3 配制樣品溶液 用10mL比色管加入2.5mL樣品清液、100μL酶液和100μL顯色劑，放置15min后加入100μL底物搖勻迅速倒入比色皿(放入儀器第一通道以外的其他通道中進(jìn)行檢測(cè))。

4.3.4 配制對(duì)照溶液 用10mL比色管加入2.5mL提取液、100μL酶液和100μL顯色劑，放置15min后加入100μL底物搖勻迅速倒入比色皿(放入儀器第一通道進(jìn)行檢測(cè))。

4.4 儀器操作

4.4.1 儀器開機(jī)，預(yù)熱后進(jìn)行空白對(duì)照。

4.4.2 對(duì)照測(cè)定 將對(duì)照溶液放入儀器第一通道，按“對(duì)照”健(注意：吸光度應(yīng)在0.3以上，低于0.3為無(wú)效對(duì)照)。

4.4.3 對(duì)照做完后隨即在其它通道放入樣品溶液進(jìn)行檢測(cè)。

4.5 結(jié)果判定

結(jié)果中樣品的抑制率超過(guò)50%為可疑農(nóng)殘超標(biāo)樣品，若重復(fù)數(shù)次后抑制率仍大于50%為農(nóng)殘超標(biāo)樣品，表明被測(cè)樣品中有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥農(nóng)藥可能超過(guò)安全的界定標(biāo)準(zhǔn)，建議用氣象色譜法等分許方法做進(jìn)一步的確認(rèn)。結(jié)果中樣品的抑制率在50%以下說(shuō)明該樣品合格。

5 檢測(cè)中應(yīng)注意的問(wèn)題

(1)儀器正常工作室溫應(yīng)在25～35℃。

(2)配制好的提取液、顯色劑和底物需放入冰箱冷藏(2～4℃)，切勿冷凍結(jié)冰；酶試劑已配成溶液可直接使用，平常要在2～4℃環(huán)境條件下冷藏保存，切勿冷凍至結(jié)冰！

(3)檢測(cè)液加入底物后，應(yīng)迅速混勻，立即測(cè)試。

(4)在對(duì)蔬菜檢樣的檢測(cè)過(guò)程中，應(yīng)認(rèn)真按操作程序進(jìn)行，建議對(duì)抑制率≥50%以上的菜樣，進(jìn)一步采用色譜或質(zhì)譜方法定性定量分析，以確定其農(nóng)藥殘留是否真的超標(biāo)。