程媛 齊兵 吳欣欣等

摘要：目的 了解江西省婺源縣婦女人乳頭瘤病毒（HPV）感染率、基因分型和HPV疫苗接種意愿，為后期HPV篩查及預(yù)防接種策略制定提供依據(jù)。方法 在全縣隨機(jī)抽取10個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機(jī)抽取3個(gè)自然村，以抽中的30個(gè)自然村全體20～60歲婦女作為調(diào)查對(duì)象，共計(jì)8936人。采用問卷調(diào)查收集人口學(xué)特征和HPV疫苗知曉情況和接種意愿；采集調(diào)查對(duì)象子宮頸口和子宮頸管脫落細(xì)胞，應(yīng)用PCR進(jìn)行HPV病毒檢測(cè)和分型。結(jié)果 8936名研究對(duì)象平均年齡為（38.15±8.43）歲，HPV陽(yáng)性率為19.01%，HPV單基因亞型陽(yáng)性率為12.58%，低風(fēng)險(xiǎn)亞型基因?yàn)镠PV6和HPV11，高風(fēng)險(xiǎn)亞型基因?yàn)镠PV16、HPV58、HPV52和HPV18；HPV復(fù)合基因亞型陽(yáng)性率為6.45%。高風(fēng)險(xiǎn)基因亞型具有明顯的年齡別差異，呈現(xiàn)雙峰曲線（20～29歲，50～60歲）。調(diào)查對(duì)象HPV疫苗知曉率為35.98%，接種意愿率為61.22%，不愿意接種的原因主要包括不了解其安全性、價(jià)格貴、年齡不適合和擔(dān)心不良反應(yīng)。結(jié)論 婺源縣HPV感染率較低，高風(fēng)險(xiǎn)基因亞型分布與全國(guó)一致，HPV篩查時(shí)應(yīng)該關(guān)注HPV58和HPV52基因亞型，同時(shí)加強(qiáng)HPV疫苗相關(guān)宣傳。

關(guān)鍵詞：人乳頭瘤病毒感染；基因分型；疫苗接種意愿 中圖分類號(hào)：R183 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

宮頸癌位列全球婦女最常見腫瘤的第3位，每年約52萬(wàn)名婦女被診斷為宮頸癌，同時(shí)導(dǎo)致27萬(wàn)人因?qū)m頸癌死亡。人乳頭瘤病毒（human papillomavirus virus，HPV）感染是宮頸癌發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素，其感染者罹患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)為普通人群的50倍。HPV是一種微小的雙鏈DNA病毒，目前已發(fā)現(xiàn)有100多個(gè)亞型，根據(jù)其致癌性可分為高風(fēng)險(xiǎn)亞型和低風(fēng)險(xiǎn)亞型。HPV6、HPVl1和HPV43是常見的低風(fēng)險(xiǎn)亞型，主要引起子宮頸上皮細(xì)胞增殖性病損；高風(fēng)險(xiǎn)亞型包括HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、 HPV52、 HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66和HPV68，與96.62%的侵襲性宮頸癌發(fā)生有關(guān)。因此，開展HPV篩查并進(jìn)行病毒基因分型可提高宮頸癌防治的成本效益，具有重要意義。2016年7月，由葛蘭素史克研發(fā)生產(chǎn)的HPV疫苗獲得中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局的上市許可，成為國(guó)內(nèi)首個(gè)獲批的預(yù)防宮頸癌的HPV疫苗。了解人群對(duì)HPV疫苗的認(rèn)知和接種意愿，可為后期制定預(yù)防接種宣傳和策略提供依據(jù)。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

采用多階段整群抽樣法，在江西省婺源縣16個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)中隨機(jī)抽取10個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機(jī)抽取3個(gè)自然村（居委會(huì)），以抽中的30個(gè)自然村（居委會(huì)）全體18～60歲婦女作為調(diào)查對(duì)象，共計(jì)9815人。研究對(duì)象的納入標(biāo)準(zhǔn)為：有性生活史、近期無妊娠、無子宮頸手術(shù)史、無子宮頸炎癥和生殖道炎癥、無免疫缺陷性疾病。最后實(shí)際調(diào)查8 936人，調(diào)查率為91.04%。

1.2方法

1.2.1樣品采集方法 2016年1月—11月在婺源縣婦幼保健院對(duì)8 936名調(diào)查對(duì)象進(jìn)行問卷調(diào)查和生物標(biāo)本采集。首先，采用自行設(shè)計(jì)的問卷，由經(jīng)過統(tǒng)一培訓(xùn)的調(diào)查員對(duì)調(diào)查對(duì)象進(jìn)行人口學(xué)信息、HPV疫苗認(rèn)知和接種意愿信息收集，然后，在對(duì)象知情同意后，由婦科醫(yī)生采用宮頸刷收集子宮頸口和子宮頸管脫落細(xì)胞，并將樣品放入加有PBS保存液取樣管，于4℃環(huán)境中保存待檢。

1.2.2樣品檢測(cè)方法 根據(jù)操作說明書，應(yīng)用DNA試劑盒（遼寧大連Takara公司生產(chǎn)）進(jìn)行采集標(biāo)本的DNA提取。取保存有子宮頸脫落細(xì)胞的細(xì)胞保存液0.5 mL，然后取1μL制備好的DNA樣本作為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，取20μL擴(kuò)增液95℃加熱5min，隨后冰水浴≥2min，在45℃條件下進(jìn)行雜交。用鑷子取出雜交膜并進(jìn)行洗膜、顯色，經(jīng)計(jì)算機(jī)掃描判定結(jié)果。應(yīng)用亞能生物技術(shù)（深圳）有限公司生產(chǎn)的人乳頭瘤病毒基因分型（23型）檢測(cè)試劑盒（PCR-反向點(diǎn)雜交法）進(jìn)行HPV病毒分型。檢測(cè)的23型基因亞型包括18種高危型，即HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPVS1、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73、HPV83、HPVMM4，以及5種低危型，即HPV6、HPV11、HPV42、HPV43型和陽(yáng)性質(zhì)控PC位點(diǎn)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用EpiData 3.0軟件建立數(shù)據(jù)庫(kù)，調(diào)查資料雙人雙遍錄入。錄好的數(shù)據(jù)由專業(yè)人員進(jìn)行統(tǒng)一審核、編碼、抽驗(yàn)，并進(jìn)行一致性檢驗(yàn)。不一致的數(shù)據(jù)查找原始調(diào)查問卷，進(jìn)行修改，直到兩遍錄入的數(shù)據(jù)庫(kù)完全一致。最后將數(shù)據(jù)庫(kù)轉(zhuǎn)化為SPSS數(shù)據(jù)集，運(yùn)用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。定量變量用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，定性變量用構(gòu)成比（%）表示，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)分析不同特征婦女HPV感染分型、HPV疫苗接種意愿之間的差異，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果

2.1一般人口學(xué)特征

8 936名研究對(duì)象中，最小年齡20歲，最大60歲，平均年齡為（38.15±8.43）歲。研究對(duì)象文化程度以高中/中專為主（3 965人，44.37%），其次為初中及以下文化程度（2454人，27.46%），大專文化程度有1762人（19.72%），大學(xué)及以上文化程度有755人（8.45%）。研究對(duì)象的平均月收入以2000～3000元為主（5127人，57.37%），其次為3001～5000元（2216人，24.80%），平均月收入<2 000元和>5 000元者分別有635人（7.11%）和958人（10.72%）。

2.2 HPV感染率和基因分型

8936名研究對(duì)象中，1698名HPV陽(yáng)性，陽(yáng)性率為19.01%。1698名HPV陽(yáng)性對(duì)象中，HPV單基因亞型陽(yáng)性者1124人，占66.20%，2個(gè)基因亞型陽(yáng)性者383人（22.56%），3個(gè)基因亞型陽(yáng)性者109人（6.42%），4個(gè)及以上基因亞型陽(yáng)性者82人（4.83%）。在單基因亞型陽(yáng)性者中，低風(fēng)險(xiǎn)亞型基因主要為HPV6和HPV11，高風(fēng)險(xiǎn)亞型基因主要為HPV16、HPV58、HPV52和HPV18。見表1。