文/陳金泉 林登光

1 引言

堿性紫3和堿性藍(lán)26均屬于三苯甲烷系堿性染料[1]，主要用在紡織、皮革、羽毛、紙張等的染色[2-4]。但是堿性藍(lán)26和堿性紫3均存在有吸入、皮膚接觸和吞咽有害，刺激眼睛，并且具有致癌可能[5]。因此2016年版國(guó)際環(huán)保紡織協(xié)會(huì)的紡織品生態(tài)標(biāo)準(zhǔn)（OEKO-Tex 100）將這兩種染料列為不得使用[6-7]，限量為50 mg/kg。目前的研究主要集中在化妝品、著色劑[8]中堿性藍(lán)26相關(guān)檢測(cè)分析和玩具中堿性紫3檢測(cè)分析。已報(bào)道的檢測(cè)方法有高效液相色譜法[9]、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等[10]，其中高效液相色譜法的設(shè)備價(jià)格相對(duì)較低，操作及維護(hù)簡(jiǎn)單易學(xué)，開發(fā)的檢測(cè)方法容易推廣。

因此，本文采用高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器（HPLC-DAD）對(duì)紡織品中的堿性紫3和堿性藍(lán)26進(jìn)行分析研究，方法快速可靠。

2 試驗(yàn)部分

2.1 材料和試劑

堿性紫3標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號(hào)：548-62-9），純度為87.4%，Dr.Ehrenstorfer公司制，堿藍(lán)26標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號(hào)：2580-56-5），純度為93.5%，Dr.Ehrenstorfer公司制。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制：分別準(zhǔn)確稱取適量的堿性紫3和堿性藍(lán)26標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇配制濃度為1000mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。使用時(shí)，用甲醇配制成堿性紫3和堿性藍(lán)26標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇配制濃度為1000mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。使用時(shí)，用甲醇配制成堿性紫3濃度為0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L和堿性藍(lán)26濃度為0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。甲醇為色譜純（CNW公司），水為超純水，乙酸銨為色譜純。

2.2 儀器設(shè)備

1200型高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器（美國(guó)Agilent公司）；ZORBAX Eclipse Plus C18型色譜柱（4.6mm×250mm，膜厚5μm，美國(guó)Agilent公司），HC-C18型色譜柱（4.6mm×250mm，膜厚5μm，美國(guó)Agilent公司），ZORBAX SB-C18（4.6mm×250mm，膜厚5μm，美國(guó)Agilent公司）；KQ-500E超聲波清洗儀；0.22μm聚四氟乙烯過(guò)濾膜。

2.3 試驗(yàn)方法

試樣提?。簻?zhǔn)確稱取1.0g±10mg的試樣，加入10mL的甲醇提取溶劑，70℃超聲波萃取60min，迅速冷卻至室溫，用0.22μm聚四氟乙烯過(guò)濾膜過(guò)濾后供色譜分析。

儀器分析條件：流動(dòng)相為甲醇/5mmol/L的乙酸銨水溶液（85/15，V/V），色譜柱：Eclipse PlusC18型色譜柱（4.6mm×250mm，膜厚5μm）；柱箱溫度為30℃；流速為1.0mL/min；檢測(cè)器波長(zhǎng)為585nm和605nm。

3 結(jié)果與分析

3.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

在200nm～800nm波段分別對(duì)堿性紫3和堿性藍(lán)26的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行光譜掃描，光譜圖詳見圖1。

圖1 堿性紫3和堿性藍(lán)26的光譜圖

圖1表明：堿性紫3在300nm、585nm處有較強(qiáng)的吸收，在585nm處的吸收強(qiáng)度遠(yuǎn)大于300nm處的吸收強(qiáng)度，因此選擇585nm作為堿性紫3的吸收波長(zhǎng)；堿性藍(lán)26的吸收波長(zhǎng)在605nm處有最強(qiáng)的吸收強(qiáng)度，因此選擇605nm作為堿性藍(lán)26的吸收波長(zhǎng)。

3.2 色譜柱的選擇

色譜柱是液相色譜儀中影響試驗(yàn)的關(guān)鍵因素。本試驗(yàn)在其他條件相同的情況下，考察了ZORBAX Eclipse Plus C18型色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）和ZORBAX SBC18（4.6mm×250mm，5μm）對(duì)目標(biāo)化合物的分離效果，結(jié)果見圖2。

圖2 不同色譜柱的分離效果圖

3.3 流動(dòng)相的選擇

在其他條件相同的情況下，考慮到堿性紫3和堿性藍(lán)26都是三苯甲烷系氯化物，考察了甲醇-水和甲醇-乙酸銨體系對(duì)目標(biāo)化合物分離的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甲醇-乙酸銨體系的目標(biāo)物的峰形尖銳對(duì)稱，因此選擇甲醇-乙酸銨作為試驗(yàn)流動(dòng)相。

3.4 流速的選擇

對(duì)于液相色譜，過(guò)高的流速會(huì)產(chǎn)生高壓進(jìn)而容易損壞色譜柱，而且不容易分離目標(biāo)物，而過(guò)低的流速又會(huì)延長(zhǎng)分析時(shí)間，且增強(qiáng)縱向擴(kuò)散效應(yīng)，使色譜峰變寬。本試驗(yàn)考察了0.8mL/min、0.9mL/min、1.0mL/min、1.1mL/min和1.2mL/min這5種流速對(duì)目標(biāo)化合物的分析效果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)堿性紫3和堿性藍(lán)26隨著流速的增加響應(yīng)值逐漸減小，在流速為1.0mL/min時(shí)，堿性紫3和堿性藍(lán)26的分離度和保留時(shí)間響應(yīng)值已經(jīng)達(dá)到最佳，故選擇流速1.0mL/min作為液相色譜的流速。

3.5 線性關(guān)系與方法檢出限

取1.1中的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行分析，以質(zhì)量濃度x（mg/L）對(duì)峰面積y進(jìn)行線性回歸分析，堿性紫3和堿性藍(lán)26的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表1。

結(jié)果表明，堿性紫3和堿性藍(lán)26在各自濃度范圍內(nèi)質(zhì)量濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系，以3倍的空白相對(duì)偏差與斜率的比值確定方法檢出限：堿性紫3為0.5mg/kg，堿性藍(lán)26為2.0mg/kg；以10倍的空白相對(duì)偏差與斜率的比值確定方法的定量限：堿性紫3為2.0mg/kg，堿性藍(lán)26為5.0mg/kg。

3.6 回收率試驗(yàn)

為了考察樣品處理方法的可靠性，選取4種陰性紡織面料相應(yīng)加入3個(gè)水平的堿性紫3和堿性藍(lán)26標(biāo)準(zhǔn)溶液按本試驗(yàn)方法條件進(jìn)行試驗(yàn)，每個(gè)添加水平進(jìn)行6次平行試驗(yàn)，計(jì)算回收率和精密度。結(jié)果見表2所示，回收率為89.4%～103.8%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.4%～7.9%，滿足日常檢測(cè)要求。

表1 堿性紫3和堿性藍(lán)26的回歸方程及相關(guān)系數(shù)

表2 試驗(yàn)方法的回收率和精密度

4 結(jié)論

采用液相色譜法對(duì)堿性紫3和堿性藍(lán)26進(jìn)行分析研究的方法。選用甲醇為溶劑，超聲波提取紡織品中堿性紫3和堿性藍(lán)26，選擇Eclipse Plus C18色譜柱進(jìn)行分離，以甲醇/乙酸銨水溶液（85/15，V/V）作為流動(dòng)相，流速為1.0mL/min，在585 nm和605 nm的波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)，該方法檢出限低，準(zhǔn)確度和精密度均較高，能夠滿足紡織品中堿性紫3和堿性藍(lán)26的檢測(cè)要求。

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