梁偉清

（南寧協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西 南寧 530031）

在世界范圍內(nèi)，有20億人感染過HBV。其中，有近4億人的病情可發(fā)展為慢性乙型肝炎[1,2]。在慢性HBV感染的患者中，約有2億患者的肝臟存在持續(xù)的炎癥反應(yīng)，其體內(nèi)HBV的復(fù)制較為活躍，其病情可發(fā)展為肝硬化、肝癌。我國是乙型肝炎高發(fā)的國家。HBV攜帶者可達(dá)到1.2億人，約占全世界HBV感染者的1/3。HBsAg是HBV的外殼蛋白，本身不具有傳染性。由于HBsAg的出現(xiàn)常伴隨HBV的存在，因此HBsAg是機(jī)體發(fā)生HBV感染的標(biāo)志。研究發(fā)現(xiàn)，在人體感染HBV后的2～6個(gè)月內(nèi)，在其血液中天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的含量明顯升高的前2～8周，可在其血清中檢測到HBsAg。對乙肝患者進(jìn)行HBsAg定量檢測在為其制定治療方案、評估其臨床療效和預(yù)后方面均具有較高的應(yīng)用價(jià)值[3,4]。臨床上常用的HBsAg定量檢測法包括ELISA檢測法、TRFIA檢測法及CLIA檢測法?，F(xiàn)就上述檢測方法進(jìn)行綜述。

1 HBsAg檢測方法的概述

進(jìn)行HBsAg檢測的方法可分為HBsAg定性檢測和HBsAg定量檢測兩種類型。過去，臨床上常對疑似乙肝患者進(jìn)行HBsAg定性檢測。進(jìn)行HBsAg定性檢測的項(xiàng)目包括乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗體（抗HBs）、乙肝表面е抗原（HBeAg）、乙肝表面е抗體（抗HBe）及乙肝表面核心抗體（抗HBc）。根據(jù)進(jìn)行HBsAg定性檢測的結(jié)果可以判斷患者是否發(fā)生HBV感染，但無法了解其體內(nèi)HBV的復(fù)制情況和傳染性。近年來，臨床上對乙肝患者常進(jìn)行HBsAg定量檢測。HBsAg定量檢測法主要包括酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、時(shí)間分辨免疫熒光分析法（TRFIA）和化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）。

2 ELISA檢測法

ELISA檢測法是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù)。該檢測法通過將已知的抗原或抗體吸附在固相載體的表面，使酶標(biāo)記的抗原或抗體在固相載體的表面發(fā)生顏色反應(yīng)。然后根據(jù)抗原或抗體發(fā)生顏色反應(yīng)的情況判斷其是否出現(xiàn)相應(yīng)的免疫反應(yīng)。出現(xiàn)顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中抗體或抗原的含量呈正比[5]。ELISA檢測法的操作簡單，其檢測結(jié)果可受HBsAg濃度的影響。研究發(fā)現(xiàn)，使用ELISA檢測法對乙肝患者進(jìn)行HBsAg定量檢測的假陰性率為0.7%～1.0%，假陽性率為1.0%～2.0%。因此，用ELISA檢測法對乙肝患者進(jìn)行HBsAg定量檢測的效果存在一定的局限性。

3 TRFIA檢測法

TRFIA檢測法是一種新型的非同位素免疫分析方法。在對乙肝患者的血清標(biāo)本進(jìn)行TRFIA檢測時(shí)，用鑭系元素標(biāo)記HBsAg，根據(jù)鑭系元素螯合物的發(fā)光特點(diǎn)，用時(shí)間分辨技術(shù)測量其熒光，同時(shí)檢測波長和時(shí)間這兩個(gè)參數(shù)，以分辨獲得信號的特點(diǎn)，從而實(shí)現(xiàn)對HBsAg進(jìn)行定量檢測。TRFIA檢測法具有靈敏度高、操作簡單、重復(fù)性好、無放射性等優(yōu)點(diǎn)。有研究指出，用TRFIA檢測法和CLIA檢測法對HBsAg的陽性標(biāo)本進(jìn)行定量檢測的靈敏度、準(zhǔn)確性基本相同[6-7]。

4 CLIA檢測法

上個(gè)世紀(jì)70年代，Arakawe首先使用CLIA檢測法對乙肝患者進(jìn)行HBsAg定量檢測。該檢測法是將化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)和免疫反應(yīng)相結(jié)合的一種分析方法。這使得CLIA檢測法既具有化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)的高靈敏度，也具有免疫反應(yīng)的高特異性。此外，CLIA檢測法具有試劑存放時(shí)間長、操作簡單的優(yōu)點(diǎn)，是目前臨床上最為常用的一種對HBsAg進(jìn)行定量檢測的方法。近年來，臨床上使用全自動化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析系統(tǒng)對乙肝患者的血清標(biāo)本進(jìn)行HBsAg定量檢測。該系統(tǒng)對定量檢測HBsAg的靈敏度、特異性及批內(nèi)、批間的精密度均較高[8,9]。

5 討論

ELISA檢測法、TRFIA檢測法及CLIA檢測法是臨床上對乙肝患者進(jìn)行HBsAg定量檢測的常用方法。ELISA檢測法的耗時(shí)長，其檢測結(jié)果易受檢測人員操作的熟練度和操作環(huán)境的影響，無法同時(shí)對大批量標(biāo)本進(jìn)行HBsAg定量檢測。因此，ELISA檢測法常被用于實(shí)驗(yàn)室中的HBsAg定量檢測。與之相比，TRFIA檢測法和CLIA檢測法具有靈敏度高、穩(wěn)定性好、操作簡單的特點(diǎn)，是臨床上對乙肝患者進(jìn)行HBsAg定量檢測的首選方法。

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