吳玉敏，趙志紅

(鄭州大學附屬洛陽市中心醫(yī)院輸血科，河南 鄭州 471000)

不規(guī)則抗體是臨床輸血過程中發(fā)生率較高，是由于患者輸血治療過程中血清中含外抗－A、抗－B外的其他抗體，治療前如果未能發(fā)現(xiàn)，將會造成溶血性反應，增加輸血風險。因此，臨床上對于需要輸血治療患者必須進行輸血前不規(guī)則抗體篩選[1]。常規(guī)篩查方法以聚凝胺法為主，該測定方法雖然能篩選出不規(guī)則抗體，但是篩查方法相對復雜，影響因素較多，難以提高輸血安全[2]。微柱凝膠技術(shù)（MGT）也是血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體篩查中常用方法，能完成血液中不規(guī)則抗體的篩選，有助于提高輸血安全性[3]。因此，加強微柱凝膠血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體的影響因素及處理措施對降低治療風險、提高預后具有重要的意義[4，5]。本課題以2014年6月－2017年7月自愿到醫(yī)院進行治療的輸血治療患者473例作為研究對象，探討微柱凝膠血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體的影響因素及處理措施，報道如下。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 選擇2014年6月－2017年7月自愿到醫(yī)院進行治療的輸血治療患者473例作為研究對象，男 281 例，女 192 例，年齡（5～94）歲，平均（48．51±8．86）歲?；颊咧?，再生障礙性貧血 279 例，急性單核細胞白血病89例，血小板減少性紫癜105例。本課題均得到醫(yī)院倫理委員會批準，且患者自愿簽署輸血相關(guān)條約

1．2 納入及排除標準 納入標準：⑴符合輸血治療適應證者[6]；⑵輸血前均完成血小板血型配型、紅細胞血型不規(guī)則抗體篩選；⑶能嚴格遵循醫(yī)囑完成相關(guān)檢查、治療。排除標準：⑴不符合輸血治療或存在輸血風險者。⑵合并嚴重肝、腎功能異?；虼嬖诿黠@的精神異常者；⑶資料不全或治療后無法根據(jù)實驗要求完成隨訪。

1．3 儀器與試劑 本課題所需儀器、試劑包括：微柱凝膠試劑卡（北京中山金橋）、專用離心機和孵育器（福州邁新）、篩選細胞儀和鑒定譜細胞（上海血液生物）、聚凝胺試劑卡（福州邁新）、數(shù)字顯示式恒溫水浴箱（上海一恒）、全自動血庫系統(tǒng)（深圳愛康Metis 200）等。

1．4 方法 輸血前分別采用微柱凝膠法和聚凝胺法對患者紅細胞血型不規(guī)則抗體進行測定；通過血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體影響因素進行多因素Logistic回歸分析。⑴紅細胞血型不規(guī)則抗體篩選。篩選前盡可能將干膠、氣泡等排除，選擇合格的試劑卡，將選定好的試劑卡放于18℃～25℃下，采用專用離心機對標本進行5min離心，速度為1900rpm。對于需要輸血治療患者輸血前空腹下采集靜脈血2ml，提取壓積紅細胞10μl、紅細胞稀釋液1．2ml，混合均勻后向微柱孔中加入50μl和25μl混合懸液，然后放置在專用孵育器中進行15min孵育，孵育完畢后利用專用離心機完成 10min 離心，速度為 9000rpm[7，8]。⑵判讀方法。陰性：紅細胞沉在微柱底部，滯留在中、上部為陽性。⑶影響因素分析。通過血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體影響因素（包括：性別、輸血史及妊娠史等）進行多因素Logistic回歸分析[9]。

1．5 統(tǒng)計分析 采用SPSS 18．0軟件處理， 計數(shù)資料行χ2檢驗，采用n（%）表示，計量資料行t檢驗，采用（±s）表示，P＜0．05 差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2．1 微柱凝膠法和聚凝胺法不規(guī)則抗體篩選率比較 微柱凝膠法血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體篩選率為4．86%，高于聚凝胺法3．17%（P＜0．05），見表 2。

表2 微柱凝膠法和聚凝胺法不規(guī)則抗體篩選率比較

2．2 微柱凝膠法和聚凝胺法不規(guī)則抗體陽性構(gòu)成比較 微柱凝膠法和聚凝胺法不規(guī)則抗體抗c、抗－Mur、抗－M、抗－N、抗－JKb、抗－P1 及自身抗體比較差異無統(tǒng)計學意義 （P＞0．05）； 微柱凝膠法抗－D、抗－E、抗 Ec、抗－Lea、抗－Leb、冷抗體，均高于聚凝胺法（P＜0．05），見表 3。

2．3 微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規(guī)則抗體影響單因素分析 單因素結(jié)果顯示：微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規(guī)則抗體與性別、輸血史及妊娠史關(guān)系密切（P＜0．05），見表 4。

2．4 微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規(guī)則抗體影響多因素Logistic回歸分析 多因素Logistic回歸分析顯示：微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規(guī)則抗體與性別、輸血史及妊娠史關(guān)系密切（P＜0．05），見表5。

3 討論

輸血是臨床上常用的搶救、治療危急重癥患者的治療方法，臨床上如何提高輸血安全性，降低輸血不良反應發(fā)生率成為研究的熱點。文獻報道顯示：交叉配血是提高輸血安全性的重要方法[10]。目前，臨床上使用的配血方法相對較多，但是不同方法各有優(yōu)缺點，篩選準確度受到的影響因素較多。根據(jù)國家規(guī)定：對于伴有輸血史、妊娠史或短時間內(nèi)需要進行多次輸血者必須進行不規(guī)則抗體篩查[11]。常用篩查方法以聚凝胺法為主，該方法雖然能實現(xiàn)輸血前不規(guī)則抗體的篩查，但是診斷敏感度、特異度相對較低，導致患者預后較差[12]。

表3 微柱凝膠法和聚凝胺法不規(guī)則抗體陽性構(gòu)成比較[n（%）]

表4 微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規(guī)則抗體影響單因素分析（n=23）

表5 微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規(guī)則抗體影響多因素Logistic回歸分析

近年來，聚凝胺法在血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體中得到應用，且效果理想[13]。本研究中，微柱凝膠法血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體篩選率為4．86%，高于聚凝胺法 3．17%（P＜0．05）。 由此看出：將微柱凝膠法用于輸血前不規(guī)則抗體篩查中有助于提高篩查率，有助于指導臨床治療。微柱凝膠法完成不規(guī)則抗體篩選時主要根據(jù)紅細胞抗原與測定抗體聚集反應判斷，當二者反應后將會造成紅細胞阻滯在凝膠中[14]。而對于未見不規(guī)則抗體的紅細胞則會沉淀在微柱的底部。因此，通過觀察紅細胞的位置能判斷血液中是否存在不規(guī)則抗體[15]。本結(jié)果中，微柱凝膠法和聚凝胺法不規(guī)則抗體抗c、抗－Mur、抗－M、抗－N、抗－JKb、抗－P1及自身抗體比較差異無統(tǒng)計學意義 （P＞0．05）； 微柱凝膠法抗－D、 抗－E、抗Ec、抗－Lea、抗－Leb、冷抗體，均高于聚凝胺法（P＜0．05）。提示：利用微柱凝膠法有助于提高不規(guī)則抗體篩查率。文獻報道顯示：微柱凝膠技術(shù)是在抗人蛋白試驗基礎(chǔ)上演變而來的新型的篩選方法，在交叉配血、不規(guī)則抗體的篩查及血型的鑒定中均發(fā)揮了重要的作用。數(shù)據(jù)報道顯示：微柱凝膠法在紅細胞不規(guī)則抗體檢測中靈敏度較高、特異性強，并且該篩選方法操作相對簡單，臨床漏診率、誤診率僅為 0．01%－0．1%。

文獻報道顯示[16]：血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體的數(shù)量、質(zhì)量受到的影響因素較多，與B細胞、T細胞等存在緊密的聯(lián)系。當機體受到抗原刺激后，將會使得B細胞發(fā)生增殖、分化為記憶細胞。因此，臨床上，將微柱凝膠法用于血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體篩選中受到的影響因素相對較多，不同影響因素之間相互作用，影響篩選結(jié)果。本結(jié)果中，單因素及多因素Logistic回歸分析顯示：微柱凝膠法檢測紅細胞血型不規(guī)則抗體與性別、輸血史及妊娠史關(guān)系密切（P＜0．05）。為了提高微柱凝膠法篩查血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體效果，臨床上應采取有效的措施進行干預處理。輸血前應加強輸血前宣傳教育，告知患者輸血治療的目的、治療過程中的注意事項，讓患者對輸血治療有一個全面的認識和了解。同時，不規(guī)則抗體篩選陽性者，則應該進一步明確不規(guī)則抗體的性質(zhì)，在相關(guān)醫(yī)師指導下制定相應的方案，提高輸血安全性，最大限度降低輸血并發(fā)癥發(fā)生率。輸血過程中應密切觀察患者生命體征，對于出現(xiàn)異常患者應立即停止輸血，促進患者早期恢復[17]。

綜上所述，將微柱凝膠法用于血小板血型配型實驗中紅細胞血型不規(guī)則抗體中效果理想，能消除假陽性反應。但是，微柱凝膠法紅細胞血型不規(guī)則抗體測定中影響因素較多，應采取有效的方法進行處理干預，提高輸血安全性。