銀屑病患者CC趨化因子配體20、IL-36及其受體拮抗劑IL-36Ra水平與脂代謝相關(guān)性分析

周慧麗

(河北省任丘市人民醫(yī)院皮膚性病科，河北 任丘 062550)

銀屑病是一類可以影響關(guān)節(jié)以及皮膚的慢性炎癥性皮膚病，具有一定的遺傳傾向性，組織學上主要以血管增生分化改變、炎癥滲入、角質(zhì)形成細胞過度增殖等為特征[1]。銀屑病通常伴有不同程度的心血管疾病、2型糖尿病、血脂異常、高血壓以及肥胖等代謝性疾病有關(guān)[2]。銀屑病的疾病發(fā)生進展與脂肪因子變化以及脂代謝紊亂具有一定的相關(guān)性[3]。脂代謝通常會受到酶、激素、神經(jīng)體液、遺傳、肝臟等的調(diào)節(jié)，當上述因素發(fā)生一定的異常時，可引起有關(guān)器官以及脂代謝紊亂發(fā)生一定的諸如動脈粥樣硬化、脂肪肝、肥胖癥、高脂血癥等病理生理變化[4]。研究[5]表明，細胞炎癥因子受體以及細胞炎癥因子可以一定程度對促進局部角質(zhì)細胞成熟，IL-36以及IL-36Ra可以通過對巨噬細胞、骨髓來源性樹突狀細胞以及單核細胞進行富集，進而誘導機體自身免疫調(diào)控的異常，加劇慢性皮膚炎癥反應(yīng)。CCL20主要是由被活化的角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生，與銀屑病的脂代謝具有一定的相關(guān)性。報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇我院2016年5月至2018年6月收治的96例銀屑病患者作為研究對象，根據(jù)患者的病情的嚴重程度將其分為尋常性銀屑病(PV組，n=42)和泛發(fā)性膿皰性銀屑病(GPP組，n=54)兩組，另取同期來我院檢查的50例健康人作為對照組。其中PV組患者男26例，女16例，年齡19～56歲，平均年齡(28.64±5.69)歲，BMI指數(shù)(22.35±1.36) kg/m2；GPP組患者男32例，女22例，年齡18～55歲，平均年齡(28.32±5.73)歲，BMI指數(shù)(22.41±1.30) kg/m2；對照組受試者男30例，女20例，年齡18～55歲，平均年齡(28.32±5.78)歲，BMI指數(shù)(22.12±1.43)kg/m2。上述三組受試者在年齡、性別、BMI指數(shù)等一般資料方面差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。診斷標準、納入和排出標準見相關(guān)資料[6]。

1.2方法 (1)血脂水平測定 所有受試者入院后，抽取其5ml清晨空腹靜脈血，加入35 μL 10%的乙二胺四乙酸抗凝，通過離心機(Ortho BioVue；強生(上海)醫(yī)療器材有限公司)在4 ℃、離心半徑為10.5 cm、轉(zhuǎn)速3 000 r/min條件下，離心10 min，分離得到血清，冰箱-75 ℃條件下保存，待測。采用采用全自動生化分析儀(CS-6400型，迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司)，通過過氧化氫酶清除法對低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平測定；通過甘油磷酸氧化酶-過氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法對總膽固醇(TC)和三酰甘油(TG)水平進行測定。(2)血清IL-36以及IL-36Ra水平測定 選用標準品稀釋液將標準品進行復溶，之后靜置混勻，將對比稀釋后的7個濃度加入至板條孔中，空白對照孔不加，之后再將100 μL的檢測液加入至每一個孔中，通過封蓋板密封，置于室溫條件反應(yīng)120 min，再用PBS液體進行3次洗滌，除空白對照孔以外，每個孔中再次加入100 μL的檢測液，室溫條件下，進行為期1 h的孵育，再用PBS液體進行3次洗滌，每個孔中再加入50 μL的底物，避光條件下，進行為期25 min的孵育，最后將終止液加入其中，5 min后于450 nm處進行吸光度的測定。IL-36Ra以及IL-36α、IL-36β、IL-36γ抗體均購于上海勁馬生物科技有限公司，羅氏檢測公司為其提供相配套的試劑，操作方法嚴格按照說明書執(zhí)行。(3)血清CCL20以及CCR6水平測定 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法對血清CCR6和CCL20濃度進行測定，試劑盒購于通蔚試劑(上海)有限公司，操作方法嚴格按照說明書執(zhí)行。

2 結(jié) 果

2.1三組受試者血脂水平比較 PV組和GPP組患者的TG水平均明顯高于對照組，TC、LDL-C以及HDL-C水平均明顯低于對照組，且GPP組患者的上述指標變化明顯更為顯著，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 三組受試者血脂水平比較

注：與對照組相比，*P<0.05；與PV組相比，△P<0.05。

2.2三組受試者血清IL-36以及IL-36Ra水平比較 三組受試者的IL-36α、IL-36γ水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。PV組和GPP組患者的IL-36β水平明顯高于對照組，IL-36Ra水平明顯低于對照組，且GPP組患者的上述指標變化明顯更為顯著，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 三組受試者血清IL-36以及IL-36Ra水平比較

注：與對照組相比，*P<0.05；與PV組相比，△P<0.05。

2.3三組受試者血清CCL20以及CCR6水平比較 PV組和GPP組患者的血清CCL20以及CCR6水平均明顯高于對照組，且GPP組患者的上述指標變化明顯更為顯著，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 三組受試者血清CCL20以及CCR6水平比較

注：與對照組相比，*P<0.05；與PV組相比，△P<0.05。

2.4銀屑病患者CCL20、IL-36及IL-36Ra水平與脂代謝相關(guān)性 銀屑病患者的CCL20水平與TC、LDL-C、HDL-C水平呈現(xiàn)負相關(guān)，與TG水平呈現(xiàn)正相關(guān)；IL-36Ra水平與TC、LDL-C、HDL-C水平呈現(xiàn)正相關(guān)，與TG水平呈現(xiàn)負相關(guān)；IL-36β水平與TC、LDL-C、HDL-C水平呈現(xiàn)負相關(guān)，與TG水平呈現(xiàn)正相關(guān)，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 銀屑病患者CCL20、IL-36及IL-36Ra水平與脂代謝相關(guān)性

3 討 論

臨床相關(guān)的病例對照研究以及橫斷面研究顯示，銀屑病關(guān)節(jié)炎或者銀屑病患者大都表現(xiàn)為相對較高的血脂水平[8]。對于文中的銀屑病血脂水平研究結(jié)果，可能是由于TC包含有各種結(jié)合脂蛋白中的膽固醇量之和，在人體內(nèi)以膽固醇酯或者游離膽固醇的形式存在[9]。TG是一種不溶于水的經(jīng)過脂肪酸酯化的甘油分子，在載脂蛋白的輔助下，形成脂蛋白，進入血液，隨后進入機體各個組織進行代謝。LDL-C是由極低密度脂蛋白經(jīng)過酯酶水解而成，是血液中含有TC量最高的一種脂蛋白；HDL-C是一種具有特殊轉(zhuǎn)運方式的脂蛋白，可以將外周血中的TC向肝臟中進行轉(zhuǎn)運，之后進行相應(yīng)的分解代謝，可以有效的避免LDL-C在血管壁上的沉積，從而起到一定程度的抗動脈粥樣硬化效果[10]。另外在銀屑病患者而血液中的TG水平較高時，還可使機體內(nèi)的肝脂肪酶和具有脂蛋白分解功能的膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白水平增加，進而促進機體內(nèi)的HDL代謝分解。而病情更為嚴重的膿皰性銀屑病患者TG水平最高，可能是由于TG是一種可以保護銀屑病的分子[11]。另外，銀屑病主要以毛細血管擴張充血、棘層肥厚以及表皮角化過度為主要的病理變化，會一定程度引起機體免疫功能紊亂，進而導致機體發(fā)生代謝性綜合征，造成脂代謝紊亂。

關(guān)于文中相關(guān)性結(jié)果，可能是由于IL-36是一種包含有IL-36α、IL-36β以及IL-36γ的炎癥細胞因子，IL-36需要與機體內(nèi)部的特異性受體IL-36R相結(jié)合(IL-36Ra是其受體拮抗劑)，并在諸如削刮內(nèi)皮炎癥性疾病、CD4+T淋巴細胞調(diào)節(jié)異常以及紫外線等外源性因素的刺激下，發(fā)揮促炎癥作用[12]。而IL-36、IL-36R以及IL-36Ra主要在機體食道、氣管、皮膚、胸腺、支氣管以及內(nèi)臟器官的纖維結(jié)締組織中進行表達，B細胞、單核細胞、角質(zhì)形成細胞在受到外界刺激后可被活化，進行合成分泌IL-36[13]。IL-36R、IL-36以及IL-1受體輔助蛋白形成一條新的傳導信號的通路，可以對靶基因的表達起到很好的促進作用，發(fā)揮促炎癥效果，而IL-36R與IL-36特異性結(jié)合形成復合物后，將不能夠?qū)π盘柾愤M行激活，降低機體抗炎癥效果[14]。IL-36Ra、IL-36與銀屑病的病發(fā)關(guān)系密切。有學者[15]人對于小鼠體外研究結(jié)果顯示，在患有銀屑病的小鼠中會出現(xiàn)IL-6的過度表達，同時小鼠表現(xiàn)為皮膚表面多層鱗屑以及增厚，組織病理學以真皮內(nèi)炎細胞浸潤和棘層肥厚為主要表現(xiàn)，與人銀屑病患者具有相似的臨床表現(xiàn)，同時抗菌肽、IL-23、IL-22、IL-17等銀屑病相關(guān)基因的表達較多，而病情相對較為嚴重的泛發(fā)性膿皰性銀屑病上述表現(xiàn)以及炎癥因子表達癥狀加重，再結(jié)合文中對于PV和GPP患者血脂水平研究結(jié)果，得到銀屑病患者的CCL20、IL-36及IL-36Ra水平與脂代謝存在密切的相關(guān)性。

綜上所述，銀屑病患者血清CCL20、IL-36以及IL-36Ra與其血脂水平之間具有一定的相關(guān)性，可為銀屑病的臨床診斷治療提供參考。