譚匯雄

酮康唑曲安奈德乳膏是肇慶市皮膚病醫(yī)院的自擬制劑, 具有抗真菌、抗炎、抗過(guò)敏、止癢等作用［1］。因乳膏基質(zhì)差異較大, 2015 版《中國(guó)藥典》二部收載方法操作繁瑣, 經(jīng)試驗(yàn)且有基質(zhì)干擾, 不適用于此制劑［2,3］。為了更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量, 作者以高效液相色譜法測(cè)定此制劑中的酮康唑含量, 能較好地排除基質(zhì)干擾, 且操作簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確, 現(xiàn)具體報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

1.1.1 儀器 日本島津LC-15c 高效液相色譜儀；SPD-15c檢測(cè)器；LCsolution 15C 工作站；FA1004 分析天平。

1.1.2 試藥 酮康唑?qū)φ掌?中國(guó)食品藥品檢定研究所, 批號(hào)：100294-201203)；酮康唑曲安奈德乳膏(肇慶市皮膚病醫(yī)院, 批號(hào)：2180408、20180409、20180410)；甲醇為色譜純；水為超純水, 其余試劑為分析純。

1.2 測(cè)定方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱：Wondasil C18(4.6 mm×150 mm, 5 μm)色譜柱；流動(dòng)相：0.01 mol/L 磷酸氫二鉀∶甲醇(30∶70)并用1%磷酸調(diào)節(jié)pH 至6.0；流速：1.0 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：240 nm；進(jìn)樣量：20 μl；理論板數(shù)按酮康唑峰計(jì)算≥2500。

1.2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取酮康唑20 mg 置于 50 ml 量瓶中, 加適量75%乙醇使溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 精密量取10 ml 置100 ml 量瓶中, 加75%乙醇至刻度, 搖勻即得。

1.2.3 供試品溶液的制備 精密稱取供試品約1 g, 置于50 ml 量瓶中, 加75%乙醇適量, 置80℃水浴中加熱約2 min, 超聲15 min, 放冷至室溫, 用75%乙醇稀釋至刻度, 搖勻, 精密量取10 ml, 置于100 ml 容量瓶中, 加75%乙醇至刻度, 搖勻, 用0.45 μm 的微孔濾膜過(guò)濾, 即得［4］。

1.2.4 空白溶液的制備 按處方比例制成空白樣品, 按“1.2.3”項(xiàng)下方法制備。

2 結(jié)果

2.1 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 分別測(cè)定對(duì)照品溶液、供試品溶液、空白溶液。見圖1。對(duì)照品出峰位置無(wú)干擾峰, 酮康唑峰與其他峰分離度高, 證明該方法下空白基質(zhì)無(wú)干擾。

圖1 空白(A)、對(duì)照品(B)、供試品(C)色譜圖

2.2 線性關(guān)系考察 精密稱取酮康唑?qū)φ掌?7.25 mg, 置于100 ml量瓶, 用75% 乙醇稀釋至刻度, 搖勻, 分別精密吸1、2、4、6、8 ml置于50 ml容量瓶中, 用75%乙醇稀釋至刻度, 搖勻, 依法測(cè)定色譜峰面積, 以酮康唑進(jìn)樣濃度(mg/ml)為橫坐標(biāo), 峰面積為縱坐標(biāo), 計(jì)算回歸方程, 結(jié)果表明酮康唑進(jìn)樣濃度在0.00945～0.0756 mg/ml 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系?；貧w方程為Y=3.08839e-8X-0.000432931(r=0.9997)。

2.3 重復(fù)性試驗(yàn) 取樣品(批號(hào)：180408)配制供試品溶液5 份, 分別測(cè)定, 結(jié)果平均含量為100.2%, RSD 為0.8%(n=5)。

2.4 回收率試驗(yàn) 精密稱取酮康唑?qū)φ掌?8.80 mg, 置于50 ml 量瓶, 加75%乙醇至刻度, 分別精密吸取4、5、6 ml, 按處方比例加入空白基質(zhì)置于50 ml 量瓶中, 加75%乙醇至刻度, 依法測(cè)定, 平均加樣回收率為99.9%, RSD 為0.9% (n=9)。

2.5 樣品含量測(cè)定 取3 個(gè)批號(hào)的樣品, 按“1.2.3”項(xiàng)下方法制備樣品溶液, 分別測(cè)定含量, 結(jié)果見表2。

表2 酮康唑曲安奈德乳膏中酮康唑含量測(cè)定結(jié)果(n=3)

3 討論

酮康唑曲安奈德乳膏是復(fù)方乳膏制劑, 因基質(zhì)成分復(fù)雜, 而且基質(zhì)與藥物完全分離困難, 兩種主藥成分為酮康唑和醋酸曲安奈德, 所以排除酮康唑和醋酸曲安奈德相互之間的干擾及排除藥物與基質(zhì)間的干擾是建立含量測(cè)定方法需要首先解決的難題。曾有相關(guān)研究中的色譜條件試驗(yàn)同時(shí)測(cè)定兩主藥成分的含量, 結(jié)果存在基質(zhì)干擾［5-10］。

在本研究中, 作者采用高效液相色譜法, 色譜柱為Wondasil C18；流動(dòng)相：0.01 mol/L 磷酸氫二鉀溶液：甲醇(30∶70), 并用1%磷酸調(diào)節(jié)pH 至6.0；流速：1.0 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：240 nm。結(jié)果顯示, 酮康唑在0.01～0.08 mg/ml 范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好(r=0.9997), 平均回收率為99.9%, RSD 為0.9%(n=9)。

綜上所述, 本研究在參考相關(guān)研究的基礎(chǔ)上對(duì)色譜條件進(jìn)行了摸索, 酮康唑出峰時(shí)間隨著pH 的降低而提前, 選擇pH 為6.0 時(shí), 出峰時(shí)間控制在12 min 左右, 能與其他峰較好分離, 方法操作簡(jiǎn)單、靈敏, 對(duì)控制酮康唑曲安奈德乳膏的質(zhì)量具有重要作用。