張艷萍　邵玲俐

【摘要】 目的 探討紅細(xì)胞冷凝集對(duì)血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的影響和處理對(duì)策及與感染階段的關(guān)系。

方法 選取3例感染早、中、后期患者， 采集其空腹靜脈血， 制作紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本， 并分別于37℃水浴0.5 h、37℃水浴1.0 h、血漿置換等處理后， 在Sysmex-xs1000i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀上檢測(cè)。記錄并分析患者就診時(shí)血常規(guī)結(jié)果及不同處理方法血常規(guī)結(jié)果。結(jié)果 冷凝集標(biāo)本處理前肉眼觀察可見(jiàn)采血管內(nèi)壁血液標(biāo)本呈紅色細(xì)沙樣顆粒。不同處理方案后復(fù)測(cè)發(fā)現(xiàn)發(fā)病初期， 37℃熱水浴0.5 h即可糾正冷凝集標(biāo)本的血常規(guī)結(jié)果。發(fā)病時(shí)間長(zhǎng)， 單純37℃熱水浴后， 紅細(xì)胞（RBC）和血小板計(jì)數(shù)（PLT）分布圖仍明顯異常并有相應(yīng)的報(bào)警;RBC和紅細(xì)胞壓積（HCT）結(jié)果顯著減低， 紅細(xì)胞平均體積（MCV）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MCH）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）結(jié)果均顯著增高， 血紅蛋白（HGB）輕度增高， 白細(xì)胞（WBC）變化不大， PLT增高。對(duì)于37℃水浴1.0 h仍不能糾正標(biāo)本， 采用血漿置換后復(fù)測(cè)， 血細(xì)胞分布圖和各參數(shù)的檢測(cè)結(jié)果均可糾正。結(jié)論 感染早期， 低滴度冷凝集標(biāo)本可用熱水浴糾正， 而感染中后期， 血漿置換是糾正高滴度冷凝集標(biāo)本的最優(yōu)選擇。對(duì)懷疑為紅細(xì)胞冷凝集的標(biāo)本應(yīng)選擇快速有效的方法進(jìn)行糾正， 為臨床提供正確有效的檢驗(yàn)報(bào)告。

【關(guān)鍵詞】 紅細(xì)胞冷凝集;血漿置換;血常規(guī)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.16.043

血常規(guī)是臨床最常用的檢測(cè)項(xiàng)目， 血常規(guī)結(jié)果的準(zhǔn)確性直接關(guān)系到治療方案的選擇， 因此如何做好血常規(guī)的質(zhì)量控制是檢驗(yàn)工作中不斷探索的課題。紅細(xì)胞冷凝集是血常規(guī)檢驗(yàn)工作中常見(jiàn)的現(xiàn)象。為了能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)和正確排除紅細(xì)胞冷凝集對(duì)血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的干擾， 作者對(duì)日常工作中發(fā)現(xiàn)的3例紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本進(jìn)行了一些研究試驗(yàn)， 結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 病例1：患者， 女， 75歲， 因咳嗽伴低熱

1 d到本院就診， 予銀黃顆粒、清熱感冒顆?？诜委? d后未好轉(zhuǎn)， 入院后檢查：肝腎功正常， 紅細(xì)胞沉降率61 mm/h， 抗鏈球菌溶血素O和類風(fēng)濕因子正常， 肺炎支原體免疫球蛋白M（IgM）陽(yáng)性。結(jié)合胸片診斷為社區(qū)獲得性肺炎， 予莫西沙星400 mg， 1次/d， 抗感染治療10 d后好轉(zhuǎn)出院。

病例2：患者， 男， 73歲， 因上呼吸道感染， 間斷發(fā)熱

3 d來(lái)本院就診， 胸片顯示肺部有陰影， 收治入院， 肝腎功正常， 紅細(xì)胞沉降率35 mm/h， 抗鏈球菌溶血素O和類風(fēng)濕因子正常， 肺炎支原體IgM陰性。診斷為社區(qū)獲得性肺炎， 予阿奇霉素250 mg， 1次/d， 配合左氧氟沙星500 mg， 1次/d， 治療5 d后好轉(zhuǎn)。

病例3：患者， 男， 87歲， 因低熱、咳嗽、咳痰5 d來(lái)本院就診， 血常規(guī)結(jié)果異常， 有慢性粒細(xì)胞白血病（慢粒）病史， WBC 16.25×109/L， 肝腎功能無(wú)明顯異常， 紅細(xì)胞沉降率41 mm/h， 抗鏈球菌溶血素O和類風(fēng)濕因子正常， 肺炎支原體IgM陽(yáng)性。初步診斷為社區(qū)獲得性肺炎， 予莫西沙星400 mg， 1次/d， 抗感染治療10 d后好轉(zhuǎn)出院。

1. 2 研究方法

1. 2. 1 標(biāo)本采集 用EDTA-K2紫色真空采血管抽取患者空腹靜脈血2 ml。

1. 2. 2 儀器與試劑 日本Sysmex-xs1000i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套原裝試劑， 該儀器以細(xì)胞化學(xué)染色加光散射法檢測(cè)WBC， 電阻抗法檢測(cè)RBC和PLT。儀器使用前已校準(zhǔn)， 每日測(cè)定配套質(zhì)控物， 結(jié)果均在靶值允許范圍內(nèi)。

1. 2. 3 實(shí)驗(yàn)方法 按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行標(biāo)本操作。將冷凝集標(biāo)本采用下述不同方案進(jìn)行處理：①37℃水浴0.5 h;②37℃水浴1 h;③血漿置換：記錄血量， 3000 r/min離心10 min， 用加樣槍插至上清液與血細(xì)胞交界面3 mm處， 緩緩將上層血漿吸出棄掉， 加入等量生理鹽水混勻， 反復(fù)洗滌3次， 最后一次棄掉上清后， 加入等量生理鹽水， 顛倒混勻后上機(jī)檢測(cè)。

1. 4 觀察指標(biāo) 記錄并分析患者就診時(shí)血常規(guī)結(jié)果及不同處理方法血常規(guī)結(jié)果。

2 結(jié)果

冷凝集標(biāo)本處理前肉眼觀察可見(jiàn)采血管內(nèi)壁血液標(biāo)本呈紅色細(xì)沙樣顆粒。不同處理方案后復(fù)測(cè)發(fā)現(xiàn)發(fā)病初期， 37℃熱水浴0.5 h即可糾正冷凝集標(biāo)本的血常規(guī)結(jié)果。發(fā)病時(shí)間長(zhǎng)， 單純37℃熱水浴后， RBC和PLT分布圖仍明顯異常并有相應(yīng)的報(bào)警;RBC和HCT結(jié)果顯著減低， MCV、MCH、MCHC結(jié)果均顯著增高， HGB輕度增高， WBC變化不大， PLT增高。對(duì)于37℃水浴1.0 h仍不能糾正標(biāo)本， 采用血漿置換后復(fù)測(cè)， 血細(xì)胞分布圖和各參數(shù)的檢測(cè)結(jié)果均可糾正。患者就診時(shí)血常規(guī)結(jié)果分析見(jiàn)表1。不同處理方法血常規(guī)結(jié)果分析見(jiàn)表2。

3 討論

冷凝集素是一種多克隆或單克隆自身抗體， 絕大多數(shù)單克隆冷凝集抗體發(fā)現(xiàn)于淋巴網(wǎng)狀細(xì)胞瘤患者， 而多克隆冷凝集抗體則多由感染引起， 特別是支原體肺炎或傳染性單核細(xì)胞增多癥[1-3]。冷凝集自身抗體主要是IgM完全抗體， 少數(shù)為免疫球蛋白G（IgG）或免疫球蛋白A（IgA）。IgM抗體對(duì)人紅細(xì)胞Ⅰ類抗原具有特異性， 與其抗原有10個(gè)結(jié)合位點(diǎn)， <30℃抗體可與多個(gè)RBC結(jié)合后迅速形成血凝塊， 造成RBC數(shù)量明顯假性減少， 溫度提高后凝集可消失。健康人體血清幾乎都有低滴度的冷凝集素存在， 當(dāng)其效價(jià)<1︰16時(shí)對(duì)血常規(guī)的影響不明顯， 當(dāng)其效價(jià)越高影響越明顯[4]。本例感染早期患者體內(nèi)冷凝集素處于相對(duì)較低滴度， 通過(guò)熱水浴即可糾正血常規(guī)結(jié)果。感染中后期患者體內(nèi)冷凝集素處于相對(duì)高滴度， 熱水浴并不能將其糾正， 血漿置換則可糾正， 其RBC參數(shù)和PLT與感染前檢測(cè)結(jié)果最吻合。末梢血稀釋法可糾正但效果欠佳， 稀釋雖降低了標(biāo)本的凝集效價(jià)， 減少了細(xì)胞的聚集， 降低了冷凝集素的干擾， 但稀釋本身就存在誤差， 容易使結(jié)果有所偏差[5]。另外， 1例患者入院時(shí)肺炎支原體IgM陰性， 可能與患者處于感染早期及實(shí)驗(yàn)方法學(xué)敏感性限制有關(guān)， 因本科目前尚未開(kāi)展冷凝集檢測(cè)， 故未能提供患者體內(nèi)可能存在冷凝集自身抗體的充分證據(jù)， 但通過(guò)檢測(cè)血液標(biāo)本發(fā)現(xiàn)存在明確的冷凝集現(xiàn)象， 同時(shí)莫西沙星抗感染治療有效[6]， 似乎也從另一個(gè)角度驗(yàn)證了患者體內(nèi)可能出現(xiàn)了冷凝集自身抗體的判斷。

Sysmex-xs1000i全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀采用電阻抗法檢測(cè)RBC， 冷凝集素使紅細(xì)胞凝集， 導(dǎo)致RBC數(shù)減低， 盡管凝集的RBC體積大于單個(gè)RBC體積， 在通過(guò)血細(xì)胞分析儀微孔計(jì)數(shù)時(shí)得到的MCV增大， 但紅細(xì)胞凝集時(shí)以RBC減低為主要特征[7]。因此， HCT（HCT=RBC×MCV）結(jié)果仍然減低， 并由此造成MCH（MCH=HGB/RBC）、MCHC（MCHC=HGB/HCT）的計(jì)算值異常升高。冷凝集素除對(duì)RBC有作用外， 也可凝集淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和PLT， 使WBC、PLT的結(jié)果也假性減低。本儀器采用的是細(xì)胞化學(xué)染色加光散射法檢測(cè)WBC， 可以較準(zhǔn)確地區(qū)分WBC和未溶解的凝集RBC， 故對(duì)WBC影響不大。雖然RBC和PLT經(jīng)同一通道進(jìn)行檢測(cè)， 但由于PLT體積比RBC小， 理論上對(duì)PLT計(jì)數(shù)影響不大， 但本例患者冷凝集素造成PLT假性增高， 具體原因有待以后進(jìn)一步探討。HGB是由SLS-HGB測(cè)定法（比色法）進(jìn)行測(cè)定， 因此影響不大[8]。

綜上所述， 在日常工作中要對(duì)每份血細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果仔細(xì)分析， 發(fā)現(xiàn)結(jié)果或細(xì)胞分布圖有異常時(shí)， 應(yīng)查找原因， 排除干擾， 對(duì)懷疑為紅細(xì)胞冷凝集的標(biāo)本， 低滴度冷凝集標(biāo)本可用熱水浴糾正， 而高滴度標(biāo)本則可選擇血漿置換來(lái)糾正， 通過(guò)選擇快速有效的糾正方法為臨床提供正確有效的檢驗(yàn)報(bào)告是醫(yī)務(wù)工作者的職責(zé)所在。

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