毫火針聯(lián)合自擬芪白湯對(duì)白癜風(fēng)皮膚和外周血病理影響研究

柏志芳 丁小杰 蔣培 于瑞蓮 馬倩

摘要?目的：探討毫火針與自擬芪白湯聯(lián)合應(yīng)用于白癜風(fēng)的治療，對(duì)患者皮膚與外周血病理相關(guān)指標(biāo)的影響。方法：選取2015年10月至2017年10月江蘇省第二中醫(yī)院收治的白癜風(fēng)患者72例作為研究對(duì)象，按照治療方案不同隨機(jī)分對(duì)照組（n=35）和觀察組（n=37），對(duì)照組單純采取自擬芪白湯治療，觀察組采取毫火針結(jié)合自擬芪白湯治療，比較2組治療前后皮膚、外周血病理學(xué)相關(guān)指標(biāo)變化情況。結(jié)果：觀察組皮膚組織液病理指標(biāo)IL-2（5.03±0.84）U/mL、T-AOC（5.13±1.08）U/mL、MDA（0.56±0.18）nmol/mL、ROS（0.61±0.25）U/L、IL-1β（5.22±1.39）pg/mL顯著低于對(duì)照組，SOD（91.18±10.62）U/mL、GSH-Px（19.12±3.92）mg/mL顯著高于對(duì)照組（P<0.05）;觀察組在治療3療程后外周血病理指標(biāo)IL-1β（16.22±3.46）pg/mL、MDA（3.26±0.46）nmol/mL、IL-2（188.50±9.16）U/mL、T-AOC（5.13±1.12）U/mL、ROS（0.74±0.25）U/L顯著低于對(duì)照組，GSH-Px（35.12±4.25）mg/mL、SOD（171.18±12.67）U/mL顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。治療后，觀察組中醫(yī)癥狀評(píng)分（3.55±1.56）分明顯優(yōu)于對(duì)照組（9.15±1.22）分P<0.05。結(jié)論：在自擬芪白湯治療白癜風(fēng)的基礎(chǔ)上，增加毫火針能夠有效調(diào)節(jié)患者氧化應(yīng)激、免疫應(yīng)答等病理學(xué)指標(biāo)，對(duì)促進(jìn)患者病情康復(fù)有積極意義。

關(guān)鍵詞?毫火針;自擬芪白湯;白癜風(fēng);皮膚;外周血;病理;氧化應(yīng)激;免疫應(yīng)答

Study on the Changes of Skin and Peripheral Blood Pathology of Find Fire Needle Combined with Self-made Qibai Decoction in the Treatment of Vitiligo

Bai Zhifang1，Ding Xiaojie1，Jiang Pei1，Yu Ruilian2，Ma Qian3

（1 Department of Dermatology，The Second Traditional Chinese Medicine Hospital of Jiangsu，Nanjing 210017，China; 2 Pharmacy College，Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210023，China; 3 Department of Pathology，The Second Traditional Chinese Medicine Hospital of Jiangsu，Nanjing 210017，China）

Abstract?Objective：To explore the effect of fine fire needle combined with self-made Qibai decoction on the changes of skin and peripheral blood pathology for the treatment of vitiligo.Methods：From October 2015 to October 2017，72 patients with vitiligo in The Second Traditional Chinese Medicine Hospital of Jiangsu were randomly divided into 2 groups according to the different schemes.The control group（n=35）were treated with self-made Qibai Decoction and the observation group（n=35）were treated with fine fire needle combined with self-made Qibai Decoction.The changes of skin and peripheral blood pathological indexes were compared before and after treatment between the 2 groups.Results：In the observation group，the pathological index of skin tissue fluid IL-2（5.03±0.84）U/mL，T-AOC（5.13±1.08）U/mL，MDA（0.56±0.18）nmol/mL，ROS（0.61±0.25）U/L，IL-1β（5.22±1.39）pg/mL were significant lower than those of control group.SOD（91.18±10.62）U/mL and GSH-Px（19.12±3.92）mg/mL were significant higher than those of control group（P<0.05）; In the observation group after the treatment for 3 courses，the pathological indexes of the peripheral blood IL-1β（16.22±3.46）pg/mL，MDA（3.26±0.46）nmol/mL，IL-2（188.50±9.16）U/mL，T-AOC（5.13±1.12）U/mL，ROS（0.74±0.25）U/L were significant lower than those of control group，GSH-Px（35.12±4.25）mg/mL，SOD（171.18±12.67）U/mL were significant higher than those of control group（P<0.05）.After treatment，in the observation group，the score of TCM symptom（3.55±1.56）was significantly better than that in the control group（9.15±1.22）（P<0.05）.Conclusion：On the basis of self-made Qibai Decoction for treatment of vitiligo，fine fire needle can effectively regulate the pathological indexes such as oxidative stress and immune response for the patients with vitiligo.It has a positive significance in promoting the recovery of patients.

Key Words?Fine fire needle; Self-made Qibai Decoction; Vitiligo; Skin; Peripheral Blood; Pathology; Oxidative stress; Immune response

中圖分類號(hào)：R275.9;R758.4+1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.12.062

白癜風(fēng)為一類色素脫失性損容性皮膚病，常具有原發(fā)性、局限性或泛發(fā)性，在全世界各種族中均可發(fā)生，具有易診難治的特點(diǎn)。盡管不會(huì)造成致殘致畸的后果，但對(duì)患者容貌與心理健康有一定危害。關(guān)于白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制目前尚不完善，以氧化應(yīng)激學(xué)說、遺傳學(xué)說、病毒學(xué)說、免疫學(xué)說等為主[1-2]。盡管臨床上有多種治療白癜風(fēng)的方案，但療效不一，仍缺乏統(tǒng)一定論[3]。本研究通過分析毫火針聯(lián)合中藥自擬芪白湯治療白癜風(fēng)的效果，旨在為本病治療提供新依據(jù)，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)如下。

1?資料與方法

1.1?一般資料?選取2015年10月至2017年10月在江蘇省第二中醫(yī)院接受治療的72例白癜風(fēng)患者作為研究對(duì)象，按照治療方法不同對(duì)入選者進(jìn)行進(jìn)行隨機(jī)分組，對(duì)照組（n=35）和觀察組（n=37），2組一般資料無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。見表1，表2。本次研究經(jīng)過倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理批件號(hào)：20150602）。

1.2?診斷標(biāo)準(zhǔn)?達(dá)到《中國臨床皮膚病學(xué)》[4]以及《黃褐斑和白癜風(fēng)的診療標(biāo)準(zhǔn)》[5]中關(guān)于白癜風(fēng)的診斷準(zhǔn)則：1）具有皮損處皮膚光滑、白斑邊界清晰，周圍顏色加深，患處顏色脫失，以白色或乳白色為主的特點(diǎn);2）皮損面積低于體表面積的30%;3）年齡16～55歲;4）簽署知情同意書。

1.3?排除標(biāo)準(zhǔn)?1）排除有暈針史者;2）排除4周內(nèi)接受白癜風(fēng)治療者;3）排除孕期與哺乳期女性;4）排除資料不全或中途退出者;5）排除伴心、肝、腎等功能不全者。

1.4?治療方法?對(duì)照組予以自擬芪白湯治療，組方為：當(dāng)歸、黃芪各20 g，墨旱蓮、女貞子各15 g，郁金、功勞葉、桑枝、川芎、蒺藜、赤芍、桃仁、制何首烏、白芷、補(bǔ)骨脂、紅花、紫草各10 g，炙甘草6 g，（各種中藥由江蘇同仁藥房提供）共制成7劑，每日1劑，用水煎煮成400 mL，口服。觀察組基于對(duì)照組，在自擬芪白湯治療期間，增加毫火針治療：在患者臥位或坐位的體態(tài)下進(jìn)行，充分顯露皮損處，消毒，使用0.35 mm×25 mm（0.3×10 mm）的一次性無菌毫火針（由蘇州市華倫醫(yī)療用品有限公司生產(chǎn)），左手持酒精燈，右手持2～3根毫火針，燒針尖至發(fā)紅，按照由外緣環(huán)向中心的順序，迅速在皮損部位內(nèi)點(diǎn)刺，刺過表皮，至皮膚稍微潮紅為止，燒1次點(diǎn)刺1次，針間距均勻，間距0.2～0.3 cm左右。每周進(jìn)行1次治療，持續(xù)治療4周為1療程，共治療3療程。

1.5?觀察指標(biāo)

于治療前1 d和治療3療程后對(duì)2組皮膚和外周血氧化應(yīng)激與炎性反應(yīng)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)評(píng)價(jià)。

1.5.1?皮膚組織液采集?應(yīng)用皮膚分離儀（廠家：紹興市衛(wèi)星醫(yī)療設(shè)備制造公司;型號(hào)：BFY型）對(duì)患者白癜風(fēng)皮損部位和非皮損部位分別放置一個(gè)發(fā)皰盤，待水皰完全形成，進(jìn)行負(fù)壓吸皰，期間注意壓力適中，以-30～-60 kPa為宜，防止產(chǎn)生血皰，以1 mL無菌注射器吸取1 mL組織液，去除纖維組織和血性皰液，進(jìn)行標(biāo)記后，置入-70 ℃冰箱保存。

1.5.2?外周血樣本采集?取晨8：00-10：00空腹外周血5 mL，以低溫高速離心機(jī)（德國艾本德股份公司，型號(hào)：5810R）分離血清，提取上清液，將其放置在-20 ℃冰箱中。

1.5.3?標(biāo)本測(cè)定?電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱由上海姚氏儀器設(shè)備廠提供，型號(hào)為YTG-9050A;立式壓力蒸汽滅菌器由上海立德泰勀科學(xué)儀器公司提供，型號(hào)為LT-CPS38C;自動(dòng)純水蒸餾器由武漢格萊莫檢測(cè)設(shè)備公司提供，型號(hào)為SZ-97A;三用恒溫水箱由上海啟前電子科技公司提供;本研究所用試劑盒均源自上海索橋生物科技公司，實(shí)驗(yàn)中所使用的雙蒸水為實(shí)驗(yàn)室自制。本研究檢測(cè)的指標(biāo)為丙二醛（Malondialdehyde，MDA）（黃嘌呤氧化酶法）、白細(xì)胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法）、定活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）（熒光探針檢測(cè)法）、谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GSH-Px）（比色測(cè)定法）、超氧化物歧化酶（Superoxide Oxygen Dismutase，SOD）（硫代巴比妥酸法）、白細(xì)胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法）、總抗氧化能力（Total Antioxidant Capacity，T-AOC）（比色測(cè)定法）。

1.5.4?中醫(yī)癥狀評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)?參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[6]及《中醫(yī)診斷學(xué)術(shù)語規(guī)范研究中存在問題的探討》[7]等擬定的白癜風(fēng)癥狀量化表。根據(jù)癥狀的嚴(yán)重程度賦予不同分值，輕度計(jì)1分，中度計(jì)2分，重度計(jì)3分。計(jì)算各組治療前、后的平均癥狀積分并比較。

1.6?統(tǒng)計(jì)學(xué)方法?采用2015年版統(tǒng)計(jì)學(xué)工具CHISS分析本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，使用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（±s）表示，組間以成組t檢驗(yàn)，組內(nèi)以配對(duì)t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)果

2.1?2組患者皮膚組織液病理指標(biāo)比較?用藥前，2組皮膚組織液GSH-Px、IL-1β、ROS、SOD、T-AOC、MDA、IL-2差異不顯著（P>0.05），用藥后，2組各項(xiàng)皮膚組織液病理指標(biāo)均變化顯著變化，觀察組IL-2、T-AOC、ROS、IL-1β、MDA顯著低于對(duì)照組，GSH-Px、SOD顯著高于對(duì)照組，（P<0.05）。見表3。

2.2?2組患者外周血病理指標(biāo)比較?用藥前，2組外周血GSH-Px、MDA、IL-2、IL-1β、ROS、SOD、T-AOC表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），用藥后，2組各項(xiàng)病理指標(biāo)均產(chǎn)生顯著變化，觀察組GSH-Px、SOD顯著高于對(duì)照組，IL-2、T-AOC、IL-1β、MDA、ROS顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。見表4。

2.3?中醫(yī)癥狀評(píng)定比較?治療后，觀察組中醫(yī)癥狀評(píng)分明顯優(yōu)于對(duì)照組P<0.05。見表5。

3?討論

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制可能是患者具有本病的遺傳素質(zhì)，并在受到多種外在原因或內(nèi)在原因刺激的影響下，產(chǎn)生免疫功能紊亂，或誘發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)，或受到神經(jīng)精神癥狀影響，改變了內(nèi)分泌、代謝功能，使酶系統(tǒng)黑素細(xì)胞破壞或受到抑制，形成黑化過程障礙，最終造成色素脫失的病情[8]。目前有研究指出[9]，皮膚組織液及外周血IL-1β和IL-2等細(xì)胞因子與白癜風(fēng)病情形成和發(fā)展過程中的免疫機(jī)制有密切關(guān)聯(lián)。IL-1β為一種內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞等細(xì)胞在應(yīng)答感染過程中釋放出來的細(xì)胞因子，能夠和免疫球蛋白超家族受體結(jié)合，在刺激血小板生長因子，或者是刺激集落刺激因子后，促成輔助性T淋巴細(xì)胞中IL-2的產(chǎn)生，具有修復(fù)組織和參與免疫應(yīng)答的作用。IL-2主要是輔助性T淋巴細(xì)胞生成的，在誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖，形成B細(xì)胞抗體，促成Lak細(xì)胞產(chǎn)生等方面均有一定作用，是一種重要的免疫調(diào)節(jié)因子[10-11]。本研究中，觀察組在治療后，皮膚組織液和外周血IL-2、IL-1β表達(dá)量均顯著降低，且顯著低于對(duì)照組（P<0.05），提示觀察組在促進(jìn)白癜風(fēng)患者免疫應(yīng)答方面有明顯效果。

一般情況下，人體處于正?？寡趸癄顟B(tài)，具有抵抗外源性及內(nèi)源性氧化侵害的能力，當(dāng)白癜風(fēng)患者處于病理狀態(tài)下，其抗氧化與氧化水平會(huì)處于紊亂的狀態(tài)[12-13]。有多份研究報(bào)道顯示[14-16]，白癜風(fēng)患者機(jī)體氧化應(yīng)激能力會(huì)產(chǎn)生變化，表現(xiàn)為血液和皮膚內(nèi)的氧化物質(zhì)明顯增加，抗氧化物質(zhì)明顯降低，由此造成大量活性自由基積聚在皮膚，導(dǎo)致黑色素細(xì)胞功能減退，甚至喪失，形成白癜風(fēng)。在本研究中，我們選取了氧化應(yīng)激指標(biāo)GSH-Px、SOD、MDA、ROS、T-AOC作為觀察指標(biāo)。其中GSH-Px為過氧化物分解酶，具有將有毒的過氧化物進(jìn)行還原反應(yīng)，生成無毒羥基化合物的作用，以此達(dá)到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，降低其受過氧化物損傷的目的;SOD為一類酶制劑，由生命體活性物質(zhì)產(chǎn)生并釋放，具有消解人體新陳代謝中有害物質(zhì)的作用，可達(dá)到一定抗衰老的效果;MDA為一類重要的膜脂過氧化物，通過鏈?zhǔn)交蜴準(zhǔn)街ф湻磻?yīng)，加劇活性氧作用，攻擊膜中不飽和脂肪酸，能夠造成膜損傷，形成細(xì)胞損傷;ROS為氧代謝中的副產(chǎn)物，能夠傳導(dǎo)細(xì)胞信號(hào)，維持人體恒常性;T-AOC為反映人體抗氧化能力的重要指標(biāo)，具有保護(hù)皮膚的作用。本研究結(jié)果顯示，觀察組治療后在降低皮膚及外周血IL-2、T-AOC、IL-1β、MDA、ROS，提高GSH-Px、SOD濃度方面有顯著效果，且和對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示觀察組具有調(diào)節(jié)患者氧化應(yīng)激水平，恢復(fù)機(jī)體微循環(huán)的明顯效果。

中醫(yī)學(xué)將白癜風(fēng)稱之為“白駁風(fēng)”“白癜”“白駁”。《諸病源候論》中首次記載了白癜風(fēng)的病名由來，“白癜風(fēng)者，面及頸項(xiàng)身體皮肉色變白，與肉色不同，亦不癢痛，謂之白癜”。有關(guān)本病的病因、病機(jī)古代亦有很多論述，《諸病源候論》謂之本病是由“風(fēng)邪搏于皮膚，血?dú)獠缓退病薄Ｇ宕跚迦卧凇夺t(yī)林改錯(cuò)》提到白癜風(fēng)由“血瘀于皮里”所致，現(xiàn)代著名許多中醫(yī)學(xué)家均提出本病根本在于“肝腎不足”，并以此為依據(jù)，采用滋補(bǔ)肝腎、養(yǎng)血祛風(fēng)法治療白癜風(fēng)取得了較好療效。白癜風(fēng)主要因先天稟賦不足，肝腎虧虛，榮衛(wèi)無暢達(dá)之機(jī)，皮膚腠理失養(yǎng)，加之后天勞恐傷腎、郁怒傷肝，以致氣血耗傷，肝腎精血更加虧虛肝氣郁結(jié)，氣機(jī)不暢，復(fù)受風(fēng)邪，毛竅閉塞阻滯經(jīng)脈，使局部氣血瘀滯，均可致局部氣血失和，精血不能滋養(yǎng)肌膚而發(fā)病?？傊静∫愿文I虧虛為本，皮膚損害為標(biāo)，感受風(fēng)邪所引起的氣血不調(diào)，陰陽失合，血不榮膚的外在表現(xiàn)。此外，還有精神因素、化學(xué)污染及飲食所傷也會(huì)影響機(jī)體免疫功能，造成氣滯血瘀，毛竅閉塞，皮膚失于營養(yǎng)而發(fā)病。因此，在治療上則應(yīng)以補(bǔ)益肝腎，養(yǎng)血祛風(fēng)，活血化瘀為主要治療方法[18-19]。

本研究采取了毫火針輔助自擬芪白湯的治療方法。自擬芪白湯主要采用了紫草、川芎、墨旱蓮、女貞子、赤芍、蒺藜、當(dāng)歸、黃芪、桃仁、制何首烏、白芷、郁金、功勞葉、補(bǔ)骨脂、紅花等多味名貴藥材精制而成。方中當(dāng)歸、紅花、赤芍、川芎、桃仁具有補(bǔ)血和血、活血行氣之功效;黃芪具有脫毒生肌、益氣固表之功效;墨旱蓮、補(bǔ)骨脂、蒺藜、女貞子、制何首烏具有補(bǔ)肝腎、潤五臟之功效;桑枝、郁金具有涼血止血、行氣祛瘀之功效;紫草、功勞葉具有益氣斂汗、養(yǎng)陰清熱之功效;白芷具有活血排膿，生肌止痛之功效;炙甘草具有和中緩急、調(diào)和諸藥之功效[20]。全方具有益氣固表、清熱解毒、活血化瘀、健脾除濕之功效，因而對(duì)白癜風(fēng)的治療發(fā)揮了良好輔助作用。

綜上所述，對(duì)于白癜風(fēng)的治療，在自擬芪白湯基礎(chǔ)上，使用毫火針治療，對(duì)促進(jìn)患者病理學(xué)免疫指標(biāo)和氧化應(yīng)激指標(biāo)恢復(fù)有良好效果，毫火針結(jié)合自擬芪白湯能夠有效促進(jìn)白癜風(fēng)病情的恢復(fù)。

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（2019-01-21收稿?責(zé)任編輯：蒼寧）