張麗敏，呂 虹，陳柯霖，劉淑靜，周 金，谷愉愉，康熙雄，張國軍△

(1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院檢驗科，北京 100070；2.北京市免疫試劑臨床工程技術(shù)研究中心，北京 100070)

性傳播疾病是一類以性接觸為主要傳播方式的泌尿生殖道感染性疾病。性傳播指的是一種傳播方式，有直接傳播和間接傳播2種。北京天壇醫(yī)院婦科門診對患者進行的性傳播疾病病原體檢查主要包括解脲脲原體(UU)、沙眼衣原體(CT)和淋球菌(NG)3種[1-2]。大部分患者因泌尿生殖道感染癥狀而就診，其中部分患者也會同時進行人乳頭瘤病毒(HPV)的檢測，后者也屬于性傳播疾病病原體的一種。在臨床工作中筆者發(fā)現(xiàn)UU、CT和NG檢測陽性的患者，其HPV陽性檢出情況也較多，那么二者之間是否存在協(xié)同感染，即UU/CT/NG與HPV感染是否存在相關(guān)性是值得探討的問題。本研究探討婦科門診患者性傳播疾病病原體分布情況及感染特征，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年2月至2017年11月于北京天壇醫(yī)院婦科門診初診婦女共2 064例，年齡17～75歲，平均(35.25±10.18)歲?；颊叩某醪皆\斷主要為陰道炎、子宮頸炎、盆腔炎、女性不孕和月經(jīng)紊亂等。患者未接受過抗性傳播疾病病原體相關(guān)治療，排除妊娠。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集 由婦科醫(yī)生使用陰道窺器暴露宮頸，采用專門的采樣刷采集宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本,將毛刷放入盛有細(xì)胞保存液的收集管中，4～8 ℃冰箱保存，3 d內(nèi)完成檢測。

1.2.2儀器與試劑 采用潮州凱普生物化學(xué)有限公司生產(chǎn)的UU/CT/NG和HPV基因分型檢測試劑盒，采用凱普導(dǎo)流雜交技術(shù),對UU/CT/NG及21種常見的HPV基因型進行分型檢測，HPV包括13種高危型HPV和8種低危型HPV，高危型包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68,低危型包括HPV6、11、42、43、44、53、66和CP8304。

1.2.3實驗過程 取裝有宮頸細(xì)胞的細(xì)胞保存液0.8 mL，用pH 7.2的PBS洗滌2次，棄上清液，然后用DNA提取試劑盒(凱普生物技術(shù)有限公司)提取樣本DNA，取2 μL作PCR的DNA模板。采用試劑盒中自帶的UU/CT/NG引物和HPV引物進行PCR擴增。利用導(dǎo)流雜交技術(shù)將擴增產(chǎn)物與基因芯片上的探針進行雜交，洗膜、酶標(biāo)顯色后根據(jù)顯色位點判斷病原體檢出情況。同時基因芯片上2個質(zhì)控點均顯色為藍色斑點，提示PCR擴增及產(chǎn)物雜交過程在控，實驗有效。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析；計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。二分類變量之間的相關(guān)采用相關(guān)分析，相關(guān)系數(shù)r越接近于1，說明關(guān)系越密切。

2 結(jié) 果

2.1婦科門診患者宮頸感染UU/CT/NG檢出情況

2.1.12 064例婦科門診初診患者，檢出UU/CT/NG陽性例數(shù)為1 335例(UU/CT/NG檢出一項陽性即為陽性)，總陽性檢出率為64.68%(1 335/2 064)，3種病原體均有檢出。各病原體檢出情況見圖1。其中UU檢出率最高，共1 311例，陽性率為63.52%，CT和NG陽性率分別為5.81%和0.68%。

圖1 婦科門診患者UU/CT/NG檢出情況

2.1.2單一及多重感染分布 在1 335例檢出陽性標(biāo)本中，單一感染1 229例，占總陽性標(biāo)本的92.06%，主要為UU感染，其次為CT。二重感染102例，占總陽性標(biāo)本的7.64%，主要為UU合并CT感染；三重感染4例，占總陽性標(biāo)本的0.3%。見圖2。

圖2 婦科門診患者檢出UU/CT/NG單一及多重感染分布

2.1.3婦科門診患者感染UU/CT/NG年齡分布情況 婦科門診患者不同年齡段UU/CT/NG感染率呈現(xiàn)2個峰值，分別為≤30歲和41～50歲2個年齡段。其中≤30歲感染率最高，為68.20%。年齡≥61歲患者感染率最低，為32.69%。見表1。

表1 婦科門診患者感染UU/CT/NG年齡分布情況

注：與≤30歲比較，*P<0.05；與31～40歲比較，#P<0.05；與41～50歲比較，&P<0.05；與51～60歲比較，★P<0.05

2.2婦科門診患者宮頸感染UU/CT/NG合并HPV檢出情況 2 064例患者中，有1 090例同時進行了HPV檢測，對其進行4種病原體的感染特點分析如下。

2.2.11 090例樣本HPV檢出情況 1 090例樣本中，檢出HPV陽性例數(shù)為205例，感染率為18.81%。其中高危感染檢出210人次(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68至少1種陽性即為陽性)，低危感染檢出69人次(HPV6、11、42、43、44、53、66和CP8304至少1種陽性即為陽性)。各基因型檢出情況見圖3 。在205例陽性樣本中，單一感染153例，占陽性樣本的74.63%；二重感染35例，占總陽性標(biāo)本的17.07%；三重及以上感染17例。見圖4。

圖4 1 090例樣本檢出HPV單一及多重感染分布

UU/CT/NG感染HPV感染陽性(n)陰性(n)HPV陽性率(%)Pχ2r陽性16453723.40*0.00027.0750.156陰性4134810.54合計20588518.81

注：與UU/CT/NG陰性組比較，*P<0.01

2.2.2UU/CT/NG感染與HPV感染的相關(guān)性分析 與UU/CT/NG陰性組比較，UU/CT/NG陽性組的HPV陽性率較高，為23.40%，兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。兩組間相關(guān)系數(shù)r=0.156。見表2。

3 討 論

UU、CT和NG是泌尿生殖道感染的主要病原體，可引起女性不孕不育及早產(chǎn)[3]，有報道認(rèn)為性傳播疾病病原體檢出率呈增長趨勢[4]。首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院對患者進行此項檢查為一組合項目，即一份樣本同時進行3種病原體的檢測。HPV也參與了生殖道炎癥的發(fā)生，并且是宮頸癌發(fā)生的重要因素。因此，在對2 064例患者人群進行UU、CT和NG的感染特征分析基礎(chǔ)上，本研究進一步對其中同時進行HPV檢測的1 090例患者進行4種病原體的感染情況統(tǒng)計及相關(guān)性分析，以了解首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院婦科門診女性泌尿生殖道感染病原體分布情況。

UU是人類泌尿生殖道常見的寄生菌之一，在特定環(huán)境下可致病，引起泌尿系統(tǒng)感染和不孕癥。國際上將UU分為生物1群和生物2群，共包含14個血清型，認(rèn)為不同血清型UU致病性不同[5]。而目前大部分實驗室采用的檢測方法并不能區(qū)分血清型。近年來，UU所致泌尿生殖道感染日益受到重視，約占非細(xì)菌性尿道炎的60%，若上行感染，可引起男性前列腺炎或附睪炎、女性陰道炎、宮頸炎，并可感染胎兒導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)及低體質(zhì)量胎兒等。本研究數(shù)據(jù)顯示，UU檢出率最高，感染率為63.52%，遠遠高于其他同類報道的28.40%和5.86%[5-6]，但與有的研究報道數(shù)據(jù)相近[7-8]。分析原因，首先，可能與研究人群不同有關(guān)，UU感染率存在地域及性別差異。其次，上述研究采用的方法學(xué)也不盡相同，雖然都采用了PCR技術(shù)，但試劑盒設(shè)計的引物序列不同，并且有的檢測方法為熒光PCR，擴增效率或檢出靈敏度可能均存在差異。另外，樣本量也存在較大差異，有的研究僅對100多例樣本進行分析，并不能很好地代表大樣本人群的分布情況。CT引起的泌尿生殖道感染主要由D～K血清型引起。男性多表現(xiàn)為尿道炎，女性能引起尿道炎、宮頸炎等，輸卵管炎是較嚴(yán)重并發(fā)癥。因其多為隱匿性感染，因此，實驗室檢查為明確CT感染的主要手段。本研究顯示其感染率為5.81%，遠遠低于UU感染率，與既往報道相一致[5]。NG是導(dǎo)致淋病的病原菌。人類是NG唯一的自然宿主。NG侵入泌尿生殖系統(tǒng)繁殖，男性發(fā)生尿道炎，女性引起尿道炎和子宮頸炎。如治療不徹底，可擴散至生殖系統(tǒng)。胎兒可經(jīng)產(chǎn)道感染造成新生兒淋病性急性結(jié)膜炎。本研究2 064例樣本中NG陽性樣本僅為14例，雖然NG感染率低(0.68%)，但一經(jīng)診斷，應(yīng)積極給予治療。

上述3種病原菌以單一感染為主，單一感染率為92.06%，其次為二重感染，以UU合并CT感染為主，這主要與NG本身感染率很低有關(guān)。在年齡分布上，國外學(xué)者NAUMENKO等[9]研究報道，20～45歲的人群是性傳播疾病的高發(fā)人群。本研究數(shù)據(jù)顯示，≤30歲及41～50歲2個年齡段感染率最高，二者間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。這可能與≤30歲的年輕女性性生活較頻繁，多個性伴侶引起交叉感染有關(guān)。而41～50歲的女性處于更年期，體內(nèi)激素水平波動較大，宮頸狀況較差，導(dǎo)致抵抗病原菌感染的能力下降有關(guān)。因此，應(yīng)將這2組人群作為性病防治的重點對象。

筆者前期的工作中對首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院婦科門診婦女及妊娠婦女HPV感染情況進行了系統(tǒng)的描述(部分?jǐn)?shù)據(jù)尚未發(fā)表)[10]，此次研究主要針對UU/CT/NG人群中同時進行HPV檢測的患者進行了HPV的感染特征分析。結(jié)果顯示，HPV陽性檢出率為18.81%，高于前期研究中該院妊娠婦女(10.41%)及體檢婦女(12.84%)的HPV檢出率。這與目標(biāo)人群來源不同有關(guān)，因婦科門診患者一般均有身體不適的癥狀或體征而來院就診檢查，因此，其具有較高的陽性率。在基因型別及感染類型上均與之前的研究一致[10]。對于UU/CT/NG感染與HPV感染的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，UU/CT/NG陽性組其HPV感染率明顯高于UU/CT/NG陰性組(P<0.01)，這說明二者間具有一定的協(xié)同感染作用，但相關(guān)系數(shù)r=0.157，這同時也表明二者相關(guān)性一般。

4 結(jié) 論

婦科門診患者性傳播疾病病原體感染具有其自身的特點，當(dāng)患者存在一種病原體感染時，應(yīng)警惕其是否合并其他病原體感染。早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)，對保障女性及母嬰健康具有重要的意義。