李 勤，曾素根，楊舒羽，石 佳，盧興兵，周 靜

(四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科，四川成都 610041)

糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)是人體血液中紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白與血糖結(jié)合的產(chǎn)物，HbA1c的形成為不可逆反應(yīng)，在臨床上可有效反映糖尿病患者2～3個(gè)月的血糖控制水平，也是臨床中2型糖尿病早期診斷的重要評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[1]。2010年，美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)(ADA)已將HbA1c≥6.5%推薦作為糖尿病的一項(xiàng)診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。筆者在臨床工作中觀察到1例健康體檢者的HbA1c為0.0%的案例，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 臨床病例

健康體檢者張某，男性，40歲，每年單位組織定期來(lái)本院體檢。檢測(cè)HbA1c的結(jié)果為0.0%(HLC-723 G8，日本東曹，高效液相色譜法)，見(jiàn)圖1A。該中年健康體檢者出現(xiàn)如此低的糖化血紅蛋白確實(shí)很難解釋，查看其歷史數(shù)據(jù)及相關(guān)檢驗(yàn)結(jié)果：體檢者為第一次查HbA1c，故無(wú)該項(xiàng)目的歷史數(shù)據(jù)。血液細(xì)胞分析結(jié)果，其紅細(xì)胞所有參數(shù)均未發(fā)現(xiàn)異常，見(jiàn)圖1B；空腹血糖結(jié)果為5.77 mmol/L，其在正常參考范圍內(nèi)。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，該體檢者的HbA1c結(jié)果與其他相關(guān)檢驗(yàn)結(jié)果不相符。

為查找原因后期做了以下相關(guān)檢測(cè)：(1)糖化清蛋白檢測(cè)結(jié)果為11.25%，其也在正常參考范圍內(nèi)。(2)另一種儀器檢測(cè)HbA1c結(jié)果仍然為0.0%(VARIANT-Ⅱ，美國(guó)伯樂(lè)，高效液相色譜法)。(3)參考方法檢測(cè)HbA1c的結(jié)果為4.3%[Waters Xevo TQS，美國(guó)沃特世，高效液相色譜串聯(lián)電噴霧電離一級(jí)質(zhì)譜法，(HPLC-ESI/MS)]。(4)血紅蛋白電泳，圖譜中大量異常血紅蛋白峰(120 s～180 s)，而無(wú)HbA峰，見(jiàn)圖1C。

注：A表示高效液相色譜法；B表示血液細(xì)胞分析結(jié)果；C表示血紅蛋白電泳圖譜

圖1檢驗(yàn)結(jié)果

2 討 論

本科室檢測(cè)HbA1c的方法為日本東曹公司的HLC-723 G8儀器，采用高效液相色譜法，其原理是根據(jù)HbA1c所帶電荷與其他蛋白不同而將其分離，再根據(jù)峰值下面積來(lái)計(jì)算HbA1c占總HbA的比例。有資料顯示，當(dāng)標(biāo)本存在有異常血紅蛋白時(shí)，該方法存在不足，不能將異常血紅蛋白分辨出來(lái)，而影響HbA1或HbA0峰值下面積，導(dǎo)致HbA1c結(jié)果假性升高或假性降低[3-4]。由于該標(biāo)本存在異常血紅蛋白帶未見(jiàn)HbA峰，該離子交換高效液相色譜法無(wú)法檢測(cè)出HbA1c的值。為驗(yàn)證是否因?yàn)椴煌瑑x器和試劑等因素導(dǎo)致的檢測(cè)結(jié)果假性降低，后續(xù)用美國(guó)伯樂(lè)公司的儀器進(jìn)行驗(yàn)證，仍然未檢測(cè)HbA1c的值，結(jié)果也顯示為0.0%。

目前國(guó)際公認(rèn)的參考方法為IFCC推薦的高效液相色譜串聯(lián)電噴霧電離一級(jí)質(zhì)譜(HPLC-ESI/MS)或高效液相色譜串聯(lián)毛細(xì)管電泳[5]。原理是用HPLC-ESI/MS原理是對(duì)蛋白內(nèi)切酶GLU-C作用下得到的糖基化和非糖基化β鏈N末端六肽(HbA1c六肽、HbA0六肽)進(jìn)行定量分析，在標(biāo)準(zhǔn)曲線中根據(jù)HbA1c六肽、HbA0六肽的峰面積比計(jì)算得出HbA1c的量。后采用HPLC-ESI/MS參考方法檢測(cè)該標(biāo)本HbA1c的結(jié)果為4.3%，其反應(yīng)出該體檢者的真實(shí)糖化血紅蛋白水平。

HbA1c在糖尿病的診斷和治療監(jiān)測(cè)中的作用越來(lái)越受到臨床重視[6-7]。由于HbA1c是紅細(xì)胞中血紅蛋白與葡萄糖持續(xù)且不可逆地進(jìn)行非酶促蛋白糖基化反應(yīng)的產(chǎn)物，因此，任何引起血紅蛋白數(shù)量與質(zhì)量變化的因素都會(huì)對(duì)HbA1c的測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響[8-9]。在實(shí)際工作中常常遇到各種因素引起的貧血和異常血紅蛋白導(dǎo)致HbA1c結(jié)果假性降低，但該體檢者的HbA1c為0.0%極為少見(jiàn)。遇到這樣的情況應(yīng)及時(shí)與體檢中心進(jìn)行溝通，建議在未找到原因之前推遲發(fā)放報(bào)告，最好使用參考方法進(jìn)行檢測(cè)，或者建議臨床醫(yī)生參考糖化清蛋白的檢測(cè)結(jié)果，因?yàn)槠湟材芊从硻C(jī)體近期的平均血糖水平[10]。