史欣諾

摘 要：隨著社會主義經(jīng)濟(jì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展與科技力量的不斷發(fā)展，高效液相色普儀器如今已經(jīng)成為世界使用范圍最多、發(fā)展最快的現(xiàn)代先進(jìn)設(shè)備儀器之一。因?yàn)楦咝б合嗌V是一種靈敏度、選擇度高的高效率快速分析技術(shù)。而高效液相色譜儀不僅可以用來分析微量化學(xué)組分，也能用于生物化學(xué)分離制備技術(shù)。它的運(yùn)用性靈活且運(yùn)用范圍廣泛，生化藥物的研究分析離不開高效液相色譜儀，其為促進(jìn)醫(yī)藥業(yè)發(fā)展有著極其重要的貢獻(xiàn)。為了保證高效液相色譜儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)，少不了日常的維護(hù)處理，因此，此文將對高效液相色譜儀器的維護(hù)及問題處理作出分析。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜;儀器維護(hù);問題處理

1.高效液相色譜儀系統(tǒng)

1.1相色譜儀的組成

高效液相色譜儀是經(jīng)過理論發(fā)展而來，主要是由溶液貯器、高壓輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、數(shù)據(jù)處理控制軟件系統(tǒng)組成【1】。

1.2溶液的貯存器

因?yàn)槿芤旱奶厥庑?，就要求制作貯液罐的的材料耐腐蝕，而且在貯存液體時(shí)，需要進(jìn)行密閉處理，避免溶劑揮發(fā)時(shí)引起的流動(dòng)相組成產(chǎn)生變化以及漂浮在工作區(qū)中的有害物濃度超過標(biāo)準(zhǔn)，損害人體健康。

1.3高壓輸液泵

市場的高效液相色譜柱通常用小顆粒作為填料，但用小顆粒填料填充會產(chǎn)生很大的阻力，所以需要增加高壓泵【2】。而絕大部分高壓泵是由不銹鋼材料制成，因此對輸液泵的要求很高。需要輸液泵達(dá)到高精度、流速穩(wěn)定、梯度精確性高的特性。而輸液泵的主要功能是把樣品隨著流動(dòng)相一起進(jìn)入色譜柱中，實(shí)現(xiàn)樣品分離。

1.4色譜柱

色譜柱是整個(gè)高效液相色譜儀中重要的組成，分離效果的優(yōu)劣取決與色譜柱的質(zhì)量。通常情況下，色譜柱是由不銹鋼管制成，柱內(nèi)壁光潔平滑【3】。物體的分離工作都是再色譜柱內(nèi)進(jìn)行。

（1）高效液相色譜柱的類別

高效液色譜柱有反向、正向、離子交換、體積排除以及疏水作用等幾種分離類型【4】。反向分離主要在大部分有機(jī)化合物、多肽、蛋白質(zhì)、核酸等生物大小分子中使用，通常情況下可溶于水;正向分離在中性以及非極性化合物中使用，樣品能與有機(jī)溶劑相溶;在離子型化合物以及可解離型化合物中需要用離子交換分離方法，此時(shí)樣品只溶于不同的PH值和有離子強(qiáng)度的水溶液中。

1.5檢測器

高效液相色譜儀中的檢測器在儀器的運(yùn)作中起著至關(guān)重要的作用。檢測器具有高靈敏性的特點(diǎn)，當(dāng)溶質(zhì)紫外光區(qū)或可見光區(qū)時(shí)，檢測器可以檢測出大部分的溶質(zhì)【5】。一般有紫外吸收檢測器、示差折光檢測器以及熒光檢測器。

2.高效液相色譜儀器的維護(hù)

為了保證相色譜儀的正常使用，通常會進(jìn)行維護(hù)，以保證分析工作的正常進(jìn)行。

2.1輸液泵的維修護(hù)理

（1）高壓輸液泵的作用之一是防止一切固體小粒子進(jìn)入泵內(nèi)。起到保護(hù)柱塞、密封缸體以及單向閥的作業(yè)【6】。日常在使用前要進(jìn)行流動(dòng)相進(jìn)行過濾，且要在泵的入口裝過濾片。一旦過濾器達(dá)到一定使用量還要進(jìn)行及時(shí)更換。

（2）要注意所有具有腐蝕特性的物質(zhì)都不能存在與流動(dòng)相中，禁止輸液泵中留有緩沖溶液的流動(dòng)相【7】。當(dāng)結(jié)束分析作業(yè)后，要及時(shí)清理并清晰輸液泵，加入適合保存色譜柱和泵護(hù)理的溶劑，且不宜把緩沖液流動(dòng)相長時(shí)間留在泵中。

2.2高效液相色譜柱的維護(hù)

（1）在使用新的色譜柱時(shí)要注意潤濕以及平衡色譜且流動(dòng)相要能溶于譜柱儲溶劑【8】。當(dāng)色譜柱中流動(dòng)相發(fā)生變化，要及時(shí)提高此時(shí)流動(dòng)相的速度，此時(shí)也要維持基線平穩(wěn)，通常使用十倍柱體體積的流動(dòng)相進(jìn)行平衡。對于不同的物質(zhì)，色譜柱平衡時(shí)間不一致，應(yīng)該注意控制。

（2）保持色譜柱的穩(wěn)定性，不能撞擊和劇烈震動(dòng)色譜柱?？梢园惭b一個(gè)保護(hù)柱子進(jìn)行保護(hù)【9】。應(yīng)保證流入的樣品質(zhì)量高，注入色譜柱前做好凈化處理工作，尤其是一些成分較為多的樣品，用濾膜多次過濾。

（3）當(dāng)色譜柱受到污染時(shí)，及時(shí)用干凈有機(jī)溶劑進(jìn)行清理;如果觀察到色譜柱內(nèi)的壓力開始增加或者時(shí)出現(xiàn)了交叉峰，要注意保護(hù)住是否到達(dá)使用極限。一旦發(fā)現(xiàn)問題，及時(shí)更換處理，若壓力依舊持續(xù)升高，則考慮色譜柱被堵塞情況，選區(qū)適宜的有機(jī)物進(jìn)行溶解處理。

當(dāng)長時(shí)間不使用色譜柱時(shí)，要進(jìn)行保存處理。一般四天內(nèi)不使用不需要采取措施，一旦超過四天不使用，就需要再色譜柱中添加乙腈封閉保存，避免柱床干涸。

2.3檢測器的維護(hù)

檢測器再分析中有重要作用，檢測器的性能直接影響數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，因此要注意檢測器的維護(hù)。

（1）紫外吸收檢測器一旦產(chǎn)生噪音將直接導(dǎo)致分析數(shù)據(jù)出現(xiàn)誤差，而產(chǎn)生噪音主要是由于檢測器池內(nèi)產(chǎn)生了氣泡。因此，檢測器一旦出現(xiàn)噪音，就要用完全脫氣的流動(dòng)相減小氣泡的數(shù)量【10】。當(dāng)超過四天不用檢測器時(shí)，也要進(jìn)行系統(tǒng)清洗。噪音產(chǎn)生的另一個(gè)原因是因?yàn)闄z測器中光源使用時(shí)間過長，光源強(qiáng)度降低，從而導(dǎo)致噪音音量增加。所以，再使用完檢測器后要及時(shí)關(guān)閉，減少空氣中的小顆粒的進(jìn)入，影響關(guān)傳播效率，從而影響分析數(shù)據(jù)的結(jié)果。

3.結(jié)束語

由于高效液相色譜儀器在醫(yī)療業(yè)、化工業(yè)、食品分析檢測等行業(yè)的廣泛使用，其在促進(jìn)人類生活發(fā)展，提高我國經(jīng)濟(jì)水平方面具有重大的意義。尤其是在藥物含量的分析，藥物在人體內(nèi)的殘留量分析方面，協(xié)助醫(yī)生進(jìn)行診療判斷，幫助病患治療效果顯著，對疾病的診斷和療效檢測也起著至關(guān)重要的作用。因此，為了延長高效液像色譜儀的使用壽命，保證分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，對像色譜儀的日常檢查，維護(hù)相色譜柱、檢測器的正常運(yùn)行就尤為重要。

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