溶血、脂血標(biāo)本對(duì)血站血篩核酸檢測(cè)結(jié)果的影響分析

郭兆誠(chéng)

【摘 要】目的：研究溶血、脂肪血對(duì)血站血篩HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA核酸檢測(cè)（NAT）結(jié)果的影響。方法：應(yīng)用蘇州華益美核酸檢測(cè)系統(tǒng)及配套專用試劑，分別于5倍本核酸檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)下限（LOD）濃度的HBVDNA21.0IU/ml、HCVRNA62.5IU/ml、HIVRNA211.5IU/ml樣本，采用坼分單檢模式進(jìn)行NAT;對(duì)含終濃度為5倍LOD的HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA樣本的4組溶血樣本的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果：溶血樣本[血紅蛋白Hb濃度分別為0mg/dl（對(duì)照）、0mg/dl、250mg/dl、500mg/dl、/1000mg/dl]，脂肪血樣本[甘油三酯TG濃度分別為0.76mmol/L（對(duì)照）、17mmol/L、28mmol/L、34mmol/L]的HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA檢測(cè)循環(huán)閾值（Ct值）差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;Hb≤1000mg/dl以及TG≤34mmol/L時(shí)，對(duì)血站血篩NATHBVDNA、HCVRNA、HIVRNA沒(méi)有顯著性影響。

【關(guān)鍵詞】溶血;脂血;核酸檢測(cè)

【中圖分類號(hào)】R450【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1005-0019（2020）04--01

核酸檢測(cè)技術(shù)能縮短病毒感染標(biāo)志物檢測(cè)的“窗口期”以及檢出因病毒變異、隱匿性感染等而漏檢的污染血液，降低了經(jīng)輸血傳播疾病的風(fēng)險(xiǎn)[1]，但在實(shí)際核酸檢測(cè)工作中，標(biāo)本的溶血、脂肪血等樣本質(zhì)量因素可能會(huì)直接影響核酸檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[2-3]。鑒于此本文旨在探討分析溶血、脂血標(biāo)本對(duì)于血液核酸檢測(cè)的影響。

1 材料和方法

制備溶血血漿樣本4份，2ml/份 （血紅蛋白Hb濃度分別為0mg/dl（對(duì)照）、250mg/dl、500mg/dl、/1000mg/dl）;脂血樣本4份，2ml/份（甘油三酯TG濃度分別為0.76mmol/L（對(duì)照）、17mmol/L、25mmol/L、34mmol/L），然后加入 HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA標(biāo)準(zhǔn)品，使得檢測(cè)的終濃度分別為檢測(cè)下限的5倍。HBVDNA、HCV RNA、HIV RNA 分別準(zhǔn)備16份（每種Hb濃度單陽(yáng)3份，混三陽(yáng)1份，共4種濃度）+16份（每種TG濃度單陽(yáng)3份，混三陽(yáng)1份，共4種濃度）樣本。

2 儀器和試劑：

蘇州華益美核酸檢測(cè)系統(tǒng)，PCR-熒光法;ABI PCR7500;蘇州華益美乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒人類免疫缺陷病毒（1+2型）核酸檢測(cè)試劑盒（有效期內(nèi)使用）;

3 核酸檢測(cè)：

每份樣本上機(jī)雙孔平行坼分單檢模式檢測(cè)。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：

采用SPSS17.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差標(biāo)識(shí)，P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

5 結(jié)果

5.1 溶血標(biāo)本與對(duì)照組溶血組與對(duì)照組重負(fù)檢測(cè)的Ct值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1-表3。

5.2 脂血組與對(duì)照組重負(fù)檢測(cè)的Ct值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表2。

6 討論

本研究結(jié)果顯示，使用蘇州華益美核酸血篩系統(tǒng)檢測(cè) HBV DNA，HCV RNA，HIV RNA，溶血組與對(duì)照組、脂血組與對(duì)照組比較的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義，提示血液標(biāo)本中血紅蛋白Hb濃度≤正常參考值范圍上限的250倍，甘油三酯TG的濃度≤正常參考值范圍上限的20 倍時(shí)，不會(huì)因?yàn)槿苎?、脂血因素?dǎo)致核酸結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性或者假陰性。盡管華益美核酸血篩系統(tǒng)試劑使用說(shuō)明書注明溶血樣本血紅蛋白Hb濃度≤500mg/dl，脂肪血樣本甘油三酯TG濃度≤28mmol/L對(duì)檢測(cè)結(jié)果無(wú)影響，但是實(shí)際檢測(cè)工作中，當(dāng)脂血漿表面時(shí)，我們都會(huì)將乳糜層去除后再進(jìn)行檢測(cè)，盡量減少脂肪顆粒對(duì)檢測(cè)造成影響。

雖本研究提升溶血、脂血標(biāo)本對(duì)于蘇州華益美核酸血篩系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯影響，但還示需要按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范采集記一系列相關(guān)處理。

參考文獻(xiàn)

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