李靜*,陳建興,李東岳,張譯元,梅云
赤峰學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院(赤峰 024000)
我國是世界上主要的飼養(yǎng)驢的國家之一,飼養(yǎng)歷史悠久[1]。2016年我國存欄驢456.9萬頭[2],總量逐年減少。驢的開發(fā)利用主要集中在驢皮、驢肉、驢乳、孕驢血清幾個(gè)方面,驢皮是熬制傳統(tǒng)阿膠的原料,驢乳低脂肪、低膽固醇,含有多種生物活性物質(zhì),具有較高營養(yǎng)價(jià)值,驢骨、驢血等有待開發(fā)成保健品或藥品加以利用[2-3]。
驢的總循環(huán)血量為活體驢體質(zhì)量的7.5%,屠宰時(shí)能收集到總量的60%~70%,其余滯留于肝、腎、皮膚和胴體中[4]。驢血作為驢屠宰過程的副產(chǎn)物,具有一定的保健和營養(yǎng)功效,主要是祛風(fēng)、除濕、干黃水,多被用來治療關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)等[5]。在醫(yī)學(xué)上將驢血制成二十五味驢血丸來治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[6]。驢血中蛋白質(zhì)的含量達(dá)17%~21%,還含有8種人體必需氨基酸,以及多種微量元素和礦物質(zhì)元素[7]。有學(xué)者研究表明,驢血清白蛋白的肽具有抑制高血壓及刺激細(xì)胞增殖分化的作用,而刺激細(xì)胞增殖分化的作用有類似于阿膠補(bǔ)血的功能[8]。布日額等[9]發(fā)現(xiàn)提取的庫倫驢血液白細(xì)胞抗菌肽具有較好的抑制金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌的作用。驢血具有很好的保健功效,具有一定的開發(fā)價(jià)值。在食品領(lǐng)域驢血的加工應(yīng)用研究較少,動(dòng)物血液雖然在很多的歐美國家通常制成香腸以及點(diǎn)心等食品,但在我國加工血豆腐是理想的補(bǔ)血佳品之一[10]。以驢血豆腐制作為研究目標(biāo),對凝固條件進(jìn)行研究,以期得到較優(yōu)參數(shù),以期為驢血的加工和利用奠定一定基礎(chǔ)。
驢血(取自“內(nèi)蒙古阿魯科爾沁旗太極天驢有限公司”)、食品級檸檬酸鈉和氯化鈣、食用鹽、純凈水;分析天平,京制00000246號賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司;水浴鍋,HH-601常州市金壇區(qū)環(huán)宇科學(xué)儀器廠。
原料的選擇→采血→抗凝→凝固→灌裝→滅菌→檢驗(yàn)→貯藏
2.2.1 原料選擇與采血
選擇檢疫合格的當(dāng)天宰殺時(shí)的新鮮驢血作為原料,每次采集2~3頭驢血,在驢屠宰線上放血過程中及時(shí)采集并通過20目篩濾入放有抗凝溶液的容器中,立即置于4 ℃左右的溫度下保藏備用[7]。
2.2.2 抗凝
抗凝是指利用化學(xué)或者物理學(xué)的方法抑制或除去血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法,而抗凝劑則是能阻止血液凝固的化學(xué)試劑[11]。檸檬酸鈉屬于抗凝劑的一種,它能夠與血液中的Ca2+形成可溶性的絡(luò)合物,使Ca2+失去凝血作用,從而阻止血液凝固[8]。
將過篩的450 mL驢血與450 mL抗凝溶液混合并倒入滅菌塑料桶中,充分混勻后倒入包裝盒中,每小時(shí)過濾1次,觀察是否有凝塊產(chǎn)生并記錄凝固時(shí)間[8]。
2.2.3 凝固、灌裝
加入一定濃度的凝固劑溶液,在真空度0.08 MPa脫氣5 min,將充分混勻的驢血灌裝入已滅菌的模具中,用封口機(jī)封口,待完全凝固后蒸煮滅菌。
2.2.4 滅菌
采用蒸煮滅菌的方法,驢血封口后,檢查封口是否嚴(yán)密,然后將密封完全的驢血放入85 ℃的水浴鍋中蒸煮25 min。滅菌的溫度和時(shí)間要控制好,以免溫度過高、過低或時(shí)間過長、過短影響驢血豆腐的品質(zhì)。
以血水比(1︰1.2,1︰1.6,1︰2.0,1︰2.4和1︰2.8),鹽濃度(0.6%,0.8%,1.0%,1.2%和1.4%),凝固劑濃度(0.15%,0.18%,0.21%,0.24%和0.27%)3個(gè)因素,綜合分析蒸煮損失率、感官評分2個(gè)指標(biāo)。
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選擇三因素三水平做正交試驗(yàn),以凝固時(shí)間、蒸煮損失率、感官評價(jià)為指標(biāo),綜合評價(jià)確定最優(yōu)凝固條件,正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表見表1。
表1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表
2.5.1 感官評定方法
驢血豆腐的感官評價(jià)評分[13]。
2.5.2 凝固時(shí)間測定方法
從原料混合均勻開始計(jì)時(shí),至血液完全凝固(即指血液沒有流動(dòng)性)記為凝固時(shí)間(min)。
2.5.3 蒸煮損失測定方法
驢血豆腐蒸煮前后由于蒸煮水分損失致使質(zhì)量發(fā)生減少,稱為蒸煮損失。蒸煮損失過大或偏小不僅會影響驢血豆腐的口感和顏色,還會使驢血豆腐變得易碎沒有彈性。蒸煮損失的計(jì)算公式如下:式中:G1為蒸煮后驢血豆腐質(zhì)量,g;G2為蒸煮前驢血血塊質(zhì)量,g。
從表2可看出,未添加任何抗凝劑的驢血在3 min時(shí)就已開始凝固,并且完全凝固的速度很快;加入0.4%,0.5%和0.6%濃度抗凝劑的驢血48 h內(nèi)均未發(fā)生凝固,0.7%時(shí)驢血72 h時(shí)未發(fā)生凝固現(xiàn)象??紤]到驢血的衛(wèi)生、加工延時(shí)等問題,選擇凝固時(shí)間適宜的濃度更為合適,此外抗凝劑濃度高對凝固效果有一定影響,因此選擇0.4%的檸檬酸鈉[14]。
表2 不同抗凝劑濃度下驢血的凝固時(shí)間
從表3可看出,隨著水添加量的增多,驢血的凝固時(shí)間越來越長,血水比為1︰1.2,1︰1.6和1︰2.0時(shí)驢血的凝固時(shí)間相對較短;此外感官得分呈下降趨勢,蒸煮損失率呈上升趨勢。其中血水比為1︰1.2的感官得分最高為36.67分,蒸煮損失為20.19%,血水比為1︰1.2時(shí)的血豆腐顏色為紅褐色且口感細(xì)膩,較符合制作驢血豆腐的品質(zhì)要求。故試驗(yàn)最終選取1︰1.2為最佳血水比。
表3 不同血水比對驢血豆腐品質(zhì)的影響
從表4可看出,隨著鹽濃度的升高,凝固時(shí)間越長,蒸煮損失越大,鹽濃度為1.0%時(shí)蒸煮損失率較低,為5.20%,與0.8%鹽濃度的蒸煮損失率無明顯差異,此時(shí)的驢血豆腐感官得分最高,為39.33,凝固時(shí)間較適宜,故試驗(yàn)最終選取1.0%為最佳鹽濃度。
表4 不同鹽濃度對驢血豆腐品質(zhì)的影響
從表5可看出,蒸煮損失隨凝固劑濃度的增大而降低,且相互間差異明顯;凝固時(shí)間隨凝固劑濃度增大而逐漸縮短,當(dāng)凝固劑濃度為0.24%時(shí)感官得分最高,為37.67分,制作出的驢血豆腐色澤均勻、顏色為紅褐色、口感細(xì)膩、組織形態(tài)適中,但凝固時(shí)間較長,這可能與驢血冷藏時(shí)間較長,凝固時(shí)溫度還比較低,影響了凝固時(shí)間。故試驗(yàn)最終選取0.24%為最佳凝固劑濃度。
表5 不同凝固劑對驢血豆腐品質(zhì)的影響
根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,選取A(血水比)、B(鹽濃度)、C(凝固劑濃度)3個(gè)因素,各取3個(gè)水平進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn),以各組感官評定的得分作為評定標(biāo)準(zhǔn)[11]。結(jié)果見表6。
從表6結(jié)果可知,4個(gè)因素對驢血豆腐品質(zhì)影響的大小A>C>D>B,即血水比>凝固劑濃度>空列>鹽濃度,血水比影響最大,凝固劑濃度影響較小,鹽濃度對驢血品質(zhì)無顯著影響。K值最優(yōu)組合為A3B1C2(即血水比為1︰2.0、鹽濃度0.8%、氯化鈣濃度0.24%),得分最高組合為A1B2C2(即血水比1︰1.2,鹽濃度1.0%,凝固劑濃度0.24%),將其與最優(yōu)組合比較,結(jié)果見表7。
表6 正交試驗(yàn)結(jié)果
表7 A3B1C2和A1B2C2對比結(jié)果
比較A3B1C2和A1B2C2,發(fā)現(xiàn)A1B2C2的凝固時(shí)間和感官評定得分相對較好,雖然蒸煮損失與A3B1C2相比略高一點(diǎn),但是綜合比較來看A1B2C2更適合制作驢血豆腐。
目前對驢血在食品方面的研究較少,以鴨血、豬血為原料的研究常見,且已從工藝研究向感官評價(jià)指標(biāo)篩選、工藝優(yōu)化、質(zhì)構(gòu)分析等[16-19]改善品質(zhì)的領(lǐng)域發(fā)展,驢血豆腐的研究填補(bǔ)了驢血應(yīng)用的空白,奠定了基礎(chǔ)。由于受到條件的限制,驢血受到溫度、貯存的影響導(dǎo)致凝固時(shí)間略長。
通過對驢血豆腐凝固條件選擇的試驗(yàn),選擇檸檬酸鈉作為抗凝劑、氯化鈣作為凝固劑,分別研究檸檬酸鈉的抗凝效果,不同血水比、鹽濃度、氯化鈣濃度等關(guān)鍵步驟對驢血豆腐品質(zhì)的影響,確定凝固條件為檸檬酸鈉濃度0.4%、血水比為1︰1.2、鹽濃度1.0%、氯化鈣濃度0.24%。